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21.
猪繁殖与呼吸综合征病毒实验感染SPF猪外周血单核细胞和肺泡巨噬细胞早期凋亡细胞的观察 总被引:7,自引:0,他引:7
采用Annexin V-FITC/PI双染色法,用流式细胞仪检测了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)实验感染SPF猪不同时期外周血单核细胞和肺泡巨噬细胞感染Annexin V-FITC^+/PI^-细胞群(早期凋亡细胞群)。结果显示,PRRSV感染猪外周血单核细胞和肺泡巨噬细胞Annexin V-FITC^+/PI^-细胞群的表达率均明显高于正常对照猪,感染后24h表达率达最高值。 相似文献
22.
为了获得具有高效广谱裂解特征的噬菌体,本试验以96株鸡源大肠杆菌(E.coli)临床分离株为宿主菌,用双层平板法从鸡场采集的5份粪便样品中分离纯化噬菌体,测定噬菌体的裂解谱,并对筛选到的噬菌体进行形态观察、生物学特性测定和全基因组序列分析。结果显示,从鸡场采集的粪样中分离到1株烈性大肠杆菌噬菌体,命名为LHE71,在菌苔上形成透亮带晕环的噬斑。透射电镜观察该噬菌体形态为长尾噬菌体,正二十面体的头部直径约为70 nm,弯曲的尾部长约150 nm。以E.coli K12为宿主菌增殖噬菌体,当感染复数为0.1时效价最高,可达到2.6×1015 PFU/mL;该噬菌体增殖的潜伏期约为40 min,爆发量约为104 PFU/cell。噬菌体LHE71在60℃以下、pH 7~9的范围内活性稳定,对紫外线有一定的抵抗力。噬菌体LHE71基因组全长50 158 bp,预测到81个开放阅读框,其中24个编码已知功能蛋白,无tRNA,不含毒力基因和耐药基因。GenBank数据库中共有32株噬菌体与LHE71有同源性,基于噬菌体衣壳蛋白和末端酶大亚基的进化分析结果... 相似文献
23.
24.
【目的】克隆德州驴血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)基因,对其进行原核表达及多克隆抗体制备,同时检测HO-1基因在德州驴不同组织中的表达情况,为后期研究HO-1基因功能提供支撑材料。【方法】参考GenBank中公布的马HO-1基因序列(登录号:XM_023631135.1)设计特异性引物,从驴原代肺泡巨噬细胞(donkey primary alveolar macrophages, DPAMs)中提取RNA,反转录为cDNA后进行PCR扩增HO-1基因编码区(coding sequences, CDS),对测序所获序列与其他物种进行相似性比对并构建系统进化树;应用多种在线软件对HO-1基因编码蛋白进行生物信息学分析。将HO-1基因序列克隆至pCold-SUMO载体进行原核表达,经镍柱亲和层析纯化后,以重组的HO-1蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,利用ELISA和Western blotting检测多克隆抗体特异性及与抗原结合的最大稀释度。利用免疫组化试验检测德州驴4种组织中HO-1蛋白的表达水平。【结果】德州驴HO-1基因CDS区全长873 bp,编码... 相似文献
25.
为了解山东地区驴源沙门氏菌的流行情况及其生物学特性,试验将采自山东多地的14份驴流产病料及137份驴粪便样本分别接种于沙门氏菌显色培养基中对沙门氏菌进行分离培养,提取细菌基因组DNA后采用双重PCR方法判定分离菌是否为沙门氏菌并进一步判定是否为马流产沙门氏菌,并对分离到的沙门氏菌进行血清型鉴定、生化试验、细菌运动力和生物膜形成能力检测及药敏试验,选取部分菌株进行致病性试验,并采用双层平板法检测分离菌对9株噬菌体A18028、C59102、F59102、F18024、F18038、E17016、DS2、DS4、5FS4的敏感性。结果表明:从驴流产病料中共分离到14株马流产沙门氏菌(A1~A14株);从驴粪便样本中共分离到22株其他血清型沙门氏菌(F1~F22株),其中F1株为山夫顿堡沙门氏菌,F2、F3、F4、F5、F7、F8、F9、F10、F12、F13、F15株为肯塔基沙门氏菌,F6、 F11株为Give沙门氏菌,F14株为乙型副伤寒Java型沙门氏菌,F16、F20株为阿哥纳沙门氏菌;F17株为鼠伤寒沙门氏菌,F18、 F19株为汤卜逊沙门氏菌,F21株为阿伯丁沙门氏菌,F22株未... 相似文献
26.
纳米氧化锌对肉仔鸡抗氧化性能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在研究纳米氧化锌对肉仔鸡抗氧化性能的影响.选用1日龄爱拔益加肉仔鸡192只,随机分为4个组,每个组4个重复,每个重复12只鸡.以添加硫酸锌(含锌80 mg/kg)的口粮为对照组,即A组,添加含锌40、80、120 mg/kg的3个纳米氧化锌水平组为试验组,即B、C、D组,试验期6周.试验结果表明:40 mg/kg锌添加水平的纳米氧化锌组能够显著提高(21、42 d)肉仔鸡血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05、P<0.01),极显著提高(21、42 d)血清中总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.01、P<0.01),减少(21 d)血清中一氧化氮(NO)生成(P<0.05).80 mg/kg锌添加水平的纳米氧化锌组能够极显著提高(42 d)肉仔鸡血清中GSH-Px活性(P<0.01),显著提高(42 d)肝组织中过氧化氢酶(CAT)和T-AOC活性(P<0.05、P<0.01),极显著提高(21 d)血清中T-AOC(P<0.01),减少(21、42 d)血清中NO生成(P<0.05、P<0.01),并能提高(42 d)血清抑制羟自由基能力(P<0.05),提高(21 d)肝组织中抗超氧阴离子自由基活性(P<0.05).由此可知,日粮添加纳米氧化锌可在一定程度上提高肉仔鸡机体的抗氧化性能,增强抗氧化酶活性,降低自由基的产生,以40、80 mg/kg添加量效果较佳. 相似文献
27.
水貂肠道酵母菌的分离鉴定及系统发育分析 总被引:1,自引:1,他引:0
了获得水貂专用的有益菌种,以为研究毛皮动物益生菌制剂提供理论基础。从健康水貂的肠道中分离纯化出2株酵母菌,编号为JM1和JM2,进行了形态学观察、生理生化试验以及26S rDNA基因序列分析,并构建了系统发育进化树,同时对其生长情况和安全性等进行了综合鉴定。传统鉴定方法和26SrDNA D1/D2区序列分析结果表明:JM1为弗比恩毕赤酵母,菌株JM2为酿酒酵母;生长情况结果表明:2菌株在14~30 h生长较快,在30~40 h生长趋于平稳;2菌株培养液中糖度12 h时波美度开始急速下降,并且在26 h后有升高趋势;安全性试验显示:2菌株对小鼠均无毒性,且在2.73×107cfu/mL时小鼠生长速度最快。 相似文献
28.
29.
【目的】提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因免疫的效果,构建含CpG基序和PRRSV ORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5。【方法】经酶切鉴定和序列测定,将重组质粒转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF5可表达PRRSV GP5蛋白。免疫SPF小鼠,检测鼠的特异性抗体滴度、脾T淋巴细胞亚群数量(CD4+和CD8+)以及淋巴细胞增殖反应(MTT法)水平。【结果】本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导小鼠产生针对PRRSV的体液免疫与细胞免疫。【结论】CpG-ODN可提高PRRSV基因疫苗的免疫效果。 相似文献
30.
纳米硒对肉鸡免疫和抗氧化能力的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
【研究目的】试验旨在研究纳米硒对肉鸡免疫和抗氧化性能的影响。【方法】选用1日龄Avian肉鸡225只,随机分为5个处理组,每组45只,设3个重复,每个重复15只。在玉米.豆粕型日粮基础上添加纳米硒(0、0.15、0.3、0.6、1.2mg/kg),以饲喂基础日粮组为对照组,试验期6周。【结果】结果表明:(1)试验至14、28日龄时,纳米硒在0.15~1.2mg/kg的添加水平肉鸡的新城疫抗体效价、免疫器官指数高于对照组(P〉0.05);42日龄时,纳米硒在0.3~1.2mg/kg的添加水平肉鸡的新城疫抗体效价、免疫器官指数显著高于对照组(P〈0.05)。14、28、42日龄时,纳米硒在0.6~1.2mg/kg的添加水平外周血T淋巴细胞转化率显著高于对照组(P〈0.05)。(2)14日龄时,纳米硒在0.6~1.2mg/kg的添加水平血浆中的总抗氧化能力(T-AOC)显著高于对照组(P〈0.05);纳米硒在0.15~1.2mg/kg的添加水平血浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、抑制羟自由基(OH.)能力高于对照组(P〉0.05),丙二醛(MDA)含量低于对照组(P〉0.05);纳米硒在0.3~1.2mg/kg的添加水平血浆中一氧化氮(NO)含量极显著低于对照组(P〈0.01)。28日龄时,纳米硒在0.3~1.2mg/kg的添加水平血浆中T.AOC极显著高于对照组(P〈0.01);纳米硒在0.15~1.2mg/kg的添加水平血浆中GSH-Px活力显著高于对照组(P〈0.05),MDA含量、NO含量显著低于对照组(P〈0.05);纳米硒在1.2mg/kg的添加水平血浆中抑制OH.能力的显著高于对照组(P〈0.05)。42日龄时,纳米硒在0.15~1.2mg/kg的添加水平血浆中的T-AOC、GSH-Px活力、T—SOD活力、抑制OH.能力、MDA含量、NO含量都显著高于或低于对照组(P〈0.05)。【结论】因此,纳米硒在0.6~1.2mg/kg的添加水平对提高肉鸡免疫能力效果最佳;纳米硒在0.15~1.2mg/kg的添加水平可以很好的提高肉鸡的抗氧化能力。 相似文献