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以筛选安氏隐孢子虫T7噬菌体展示文库获得的肌动蛋白(CA42)部分编码基因的序列设计特异性引物,扩增目的基因CA42,构建重组表达载体pET-28a-CA42,通过大肠杆菌BL21的诱导表达,产物经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定。然后纯化重组蛋白,免疫BALB/c进行体液和细胞免疫水平的检测,并观察重组蛋白对微小隐孢子虫的交叉保护性效果。结果显示,成功构建重组原核表达质粒pET-28a-CA42,Western-blotting显示重组蛋白约为19ku,能被安氏隐孢子虫免疫小鼠的多克隆抗体识别。重组蛋白免疫BALB/c小鼠的抗体水平差异显著(P〈0.05),CD4^+T淋巴细胞数差异均显著,CD4^4/CD8^+T淋巴细胞数的值与佐剂对照组和空白对照组相比差异均显著(P〈0.05)。各组小鼠经接种微小隐孢子虫卵囊后,试验组与各对照组相比卵囊减少率为32.2%,差异均显著(P〈0.05)。结果表明,成功表达了重组安氏隐孢子虫肌动蛋白,纯化的重组蛋白具有一定的免疫原性和交叉保护性。 相似文献
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将5对2月龄NIH稀毛小鼠合笼,同时将5对2月龄正常小鼠合笼。记录窝产仔数与仔鼠离乳期存活率。使用统计学方法对1月龄与2月龄NIH稀毛小鼠与正常小鼠(雄性5只,雌性5只)的心、肝、脾、肺、肾的脏器系数进行分析。取1月龄的NIH稀毛小鼠与正常小鼠心、肝、肺、肾、背部皮肤石蜡切片后光镜观察,取1周龄与2周龄的NIH稀毛小鼠与正常小鼠的背部皮肤进行电镜扫描观察。研究发现NIH稀毛小鼠幼鼠的窝产仔数与仔鼠离乳期存活率均低于NIH正常小鼠,部分脏器系数差异显著(P0.05),心、肝、肺、肾组织学并未发现明显差异。NIH稀毛小鼠的背部皮肤表现为皮下组织及真皮层内毛囊数量较少且毛囊出现角化现象,未见观察到明显的毛干结构。 相似文献
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猫作为实验用动物在医学、生物学等研究领域的应用越来越广泛,在某些实验中,如降压实验、作为弱视动物模型及高眼压动物模型等方面具有不可替代的作用。随着国内科研对猫使用量的增多,实验用猫多是从商贩或"收购型饲养场"购买,其来源混杂,遗传、年龄、微生物和寄生虫等携带情况不明,实验重现性差,实验结果存在未知因素的影响。我国在猫标准化方面建设缓慢,已经无法适应实验动物学科的发展及人们对实验动物伦理与福利的需求。本文结合吉林省实验用猫使用情况,对猫实验动物标准化的研究进展及应用前景进行探讨。 相似文献
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从含有猫Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc的质粒中获取目的基因,将目的基因与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体LV5进行定向连接,构建慢病毒表达载体LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4、LV-c-Myc,将其连接产物分别转化至细菌感受态细胞中,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后测序,通过lipofectamine2000介导转染293T细胞对慢病毒进行包装并测定病毒滴度,探讨猫多能性基因Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc慢病毒载体的构建与包装。结果表明:经双酶切鉴定及测序分析,成功构建并包装出LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4及LV-c-Myc慢病毒载体,基因测序结果与目标序列完全一致,且病毒滴度均达到107 TU·mL-1以上。说明成功地构建了猫多能性基因慢病毒表达载体,获得稳定产生慢病毒颗粒的包装细胞株。 相似文献
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草原红牛及其杂种牛群体遗传变异与肉用性能的微卫星标记研究 总被引:3,自引:1,他引:3
选用草原红牛、草原红牛与利木赞杂交后代作为试验牛群体,经过基因组DNA的提取、微卫星引物的PCR扩增、扩增产物的电泳分型、各座位等位基因分析以及基因频率、多态信息含量(PIC)和杂合度(H)的计算等步骤,从分子水平上分析了草原红牛及其杂交牛群体的遗传变异。在此基础上,以体重、体尺作为衡量牛生长发育的指标,以肉牛线性体型评分方法中的肌肉度线性评分性状和屠宰肉用性状作为衡量牛肉用性能的指标,运用SPSS软件分析了21个性状与8个微卫星标记的关系,发现了6个微卫星标记对试验牛群体某些生长发育性状和肉用性状存在正面或负面影响。 相似文献
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选用草原红牛、利木赞与草原红牛杂交后代共计40头作为试验牛群体,以体重、体尺作为衡量牛生长发育的指标,以肉牛线性体型评分方法中的肌肉度线性评分性状和屠宰肉用性状作为衡量牛肉用性能的指标,运用SPSS软件之GLM分析了40头牛21个性状与8个微卫星标记的关系。结果表明,IDVGA55等位基因C(203bp)对体高、十字部高和坐骨端高3个体尺性状有正向效应;BM2113等位基因C(142bp)对腿围、净肉重和净肉率等性状有正向影响;ETH225等位基因A(123bp)对腰角宽具有正向影响;IDVGA46等位基因C(211bp)对5个肌肉度评分性状和4个屠宰肉用性状有负向影响;BM1824等位基因A(171bp)对十字部高、腰厚2个性状有正向效应,等位基因C(179bp)对胸深性状有正向效应;TGLA44等位基因E(221bp)对肉用性状有正向影响。 相似文献
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草原红牛体尺体重性状微卫星标记的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
研究选用草原红牛、草原红牛与利木赞牛杂交后代共计40头作为试验牛群体,以体尺、体重作为衡量其生长发育指标.利用SPSS软件分析了8个微卫星位点基因标记与体尺性状的关系。结果表明,IDVGA55等位基因C(203bp)对体高、十字部高和坐骨端高三个体尺性状有正效应;BM2113等位基因C(142bp)对腿围性状有正面影响;ETH225等位基因A(123bp)对腰角宽具有正面影响;BM1824等位基因A(171bp)对十字部高性状有正效应,等位基因C(179bp)对胸深性状有正效应;TGLA44等位基因E(221bp)对体重有正面影响。 相似文献
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选用欧洲野生穴兔的5个微卫星座位,分析了5个品种(系)家兔群体的遗传变异.结果表明:Vc-Ⅱ系獭兔的群体内平均多态信息含量和平均杂合度均最大,分别为0.552 6和0.620 2;新西兰兔群体内平均多态信息含量和平均杂合度都最小,分别为0.451 5和0.526 1,说明在5个品种(系)家兔中,新西兰兔群体内变异较小,相对较纯;Vc-Ⅱ系獭兔群体内变异较大,纯度相对较小.但总的来看,5个品种(系)家兔的平均多态信息含量和平均杂合度相差都不大,说明Vc獭兔在遗传性能上已接近其他优良品种兔.聚类结果表明:Vc-Ⅰ系獭兔与Vc-Ⅱ系獭兔亲缘关系最近,与日本大耳兔、青紫蓝兔亲缘关系较近,与新西兰兔亲缘关系最远,这与Vc獭兔育种事实相符.在Sat4和Sat8座位分别检测出了一条Vc獭兔所特有的条带,从而为进一步研究Vc獭兔的遗传特性打下良好的基础. 相似文献