胸膜肺炎放线杆菌生物Ⅰ型标准抗血清的制备及初步临床应用   总被引：4，自引：0，他引：4  

陈凡  何启盖  陈焕春  刘正飞  张震亚  张迎  Ross Bowle  Pat Blackall 《中国预防兽医学报》2004,26(6):458-461

用十三种血清型的胸膜肺炎放线杆菌标准菌株免疫家兔,制备了标准抗血清,通过玻片凝集试验,琼脂扩散试验和免疫电泳试验,对抗血清的特异性、效价和保存期进行了监测,结果表明,制备的抗血清有较好的特异性,在4℃可以保存一个月、-20℃和、-80℃下保存一年无明显变化.用抗血清对从湖南,安徽,河南等地分离的胸膜肺炎菌株进行分型鉴定,分别为血清2,3,8型;而PCR检测均为阳性,说明抗血清可用于野生株的鉴定和流行病学调查.  相似文献   

应用在大肠杆菌中表达的猪2型圆环病毒ORF2蛋白建立一种ELISA诊断方法   总被引：13，自引：1，他引：13  

琚春梅  陈焕春  刘正飞  曹胜波  何启盖 《畜牧兽医学报》2004,35(6):689-693

根据GenBank中猪2型圆环病毒(PCV2)序列(AY035820)，设计1对引物，并以包含PCV2全基因组的重组质粒pT-PCV为模板，扩增出含ORF2全基因的片段(709bp)，回收PCR产物，将其克隆入pMDl8-T载体，获得重组质粒pTORF2，并对其进行序列测定。重组质粒经Bal I和Sal I双酶切，回收ORF2基因，将其插入pGEX-KG的Sma I和Sal I位点间，构建原核表达质粒pGEXORF2，阳性重组质粒转化E．coli BL21(DE3)，进行原核表达。用此表达产物包被酶标板，建立EUISA诊断方法，并对临床676份送检血清进行了检测，结果表明其总阳性率为62．7％(424／676)，仔猪阳性率为38．9％(74／190)，肥猪阳性率为63．2％(84／133)，母猪阳性率为74．6％(249／334)，公猪阳性率为89．5％(17／19)。  相似文献   

猪伪狂犬病和传染性胸膜肺炎混合感染的诊断与防制     

王贵平  何启盖  刘军发  刘正飞  吴斌  陈焕春  石勇  冷光敏 《中国兽医杂志》2004,40(4):21-22

1　发病情况　某场存栏生产母猪 5 93头 ,2 0 0 2年 4月份产仔 347头 ,其中弱仔 4头 ,占 1.2 % ,木乃伊 18头 ,占 6 .95 % ,死胎 5 1头 ,占 14 .7%。新生仔猪一周龄内死亡 5 7头 ,占 16 .4 % ,断奶 (30天 )前死亡 81头 ,占 2 3.3% ,共计损失 2 11头。育成率为 39.2 %。母猪返情率 2 0 %。 2 0 %左右育肥猪发病 ,死亡 8头。2　临床症状　新生仔猪表现为被毛粗乱、体表苍白 ,精神委靡不振、消瘦、喘气、腹泻 ,拉黄色水样粪便 ,体温升高 (40～ 4 1.5℃ )。少数仔猪出现转圈、发抖、四肢呈划水状等神经症状。育肥猪呈犬坐式、腹式呼吸、喘气、体温升高 (39～ 4 2℃ ) ,全身发绀 ,严重的病猪口吐白沫、四肢呈划水状、鸣叫 ,最终衰竭而死亡。3　病理变化　现场共剖检了 6头仔猪 ,主要表现为 :濒死仔猪脑膜充血、肿胀和出血。鼻黏膜肿胀、出血 ,有黏液流出 ;扁桃体肿大、充血直至溃疡。气管内有大量的渗出液。肺脏呈紫黑或暗红色变化、水肿、充血 ,表面出现大小不一的灰白色的化脓灶 ,横切面出现血样泡沫 ;胸腔积液 ,...  相似文献   

猪传染性胸膜肺炎新型亚单位菌苗对小鼠的效力研究   总被引：8，自引：2，他引：8  

刘建杰  陈焕春  何启盖  吴斌  李冲  徐晓娟  陈汉阳 《畜牧兽医学报》2005,36(2):177-180

利用大肠杆菌表达猪胸膜肺炎放线杆菌的分泌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ，提取表达产物包涵体，再加入我国流行的猪胸膜肺炎放线杆菌7型菌，和等量弗氏佐剂乳化后制成亚单位菌苗，免疫BALB／c小鼠，间隔2周加强免疫1次。每次免疫后采血检测毒素I、Ⅱ、Ⅲ的EuSA抗体和7型菌的血凝抗体，第2次免疫2周后用5LDso的猪胸膜肺炎放线杆菌1型、7型菌株进行攻毒。结果发现第2次免疫后抗体水平显著升高，用2种血清型进行攻毒后其保护力分别为83．3％和91．7％，从死亡小鼠的体内分离到了攻毒菌株，初步的动物试验表明此种新型亚单位菌苗对同型和异型的APP菌株具有较好的保护力，为进一步研制高效的亚单位菌苗打下基础。  相似文献   

伪狂犬病诊断方法的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

熊符  何启盖 《中国动物保健》2000,(5):20-20,25

  相似文献   

疯牛病研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈凡  何启盖  金梅林  吴斌  刘正飞 《养殖与饲料．饲料世界》2003,(9):37-38

我国没有疯牛病。农业部曾经发出通知严防疯牛病传入我国。现将此文介绍给大家,供防疫和检疫时参考。  相似文献   

猪传染性胸膜肺炎诊断方法研究进展   总被引：17，自引：0，他引：17  

姚建聪  何启盖  王娟  贾振宇 《动物医学进展》2003,24(2):41-44

猪胸膜肺炎是国际上公认的危害现代养猪业的五大疾病之一。在我国,其血清阳性率呈上升趋势。研究快速、科学、准确的诊断方法对于本病的监测和控制具有很大的意义。本文从病原学、血清学和分子生物学等几个方面对该病的诊断研究进展作了综述。  相似文献   

猪肺炎支原体乳酸脱氢酶基因的克隆、表达、纯化及其间接ELISA检测方法的建立     

姚睿玉  何启盖  周锐  陈焕春 《中国兽医学报》2007,27(4):511-515,531

根据GenBank中的猪肺炎支原体乳酸脱氢酶（LDH）基因序列设计1对引物，PCR扩增LDH基因，首先将扩增片段连接到克隆载体pMD18-T上，然后连接到表达载体pGEX—KG上，经测序正确后诱导表达。重组质粒在大肠杆菌中表达的目的蛋白以可溶性蛋白和包涵体2种形式存在。将超声波破碎的诱导菌液高速离心，其上清用Glutathione Sepharose4Bbead亲和层析纯化。用猪肺炎支原体的标准阳性血清对纯化蛋白作Western—blot检测，出现目的条带；以纯化蛋白为抗原建立了检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA方法，该方法具有较好的稳定性和重复性，较高的特异性与敏感性。用建立的ELISA方法与中国兽医药品监察所研制的IHA试荆盒同时检测120份临床血清，二者总符合率为92．5％。用建立的ELISA方法检测了671份临床送检不同年龄阶段的猪血清，结果显示断奶前仔猪猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopnenmoniae，MHP）感染率为44．3％，保育猪为3．0％，育肥猪为17．44％，种猪为73．41％，这初步反映了猪喘气病在各个年龄阶段的感染率。  相似文献   

传染性副猪嗜血杆菌的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘正飞蔡旭旺  陈焕春吴斌 何启盖 《养殖与饲料．饲料世界》2004,(10):7-10

近年来，国内外许多猪场出现了一种以多发性浆膜炎和关节炎及高死亡率为特征，严重危害仔猪和青年猪的传染病，给养猪业带来巨大的经济损失。经细菌分离培养、生化鉴定和分子生物学试验研究表明．该传染病主要是由副猪嗜血杆菌(Hps)所引起。为了更加全面地本质地认识该病原体，本文对其流性病学、理化特性、分子生物学、诊断及防制作了较为全面的综述。  相似文献   

猪伪狂犬病和传染性胸膜肺炎混合感染     

王贵平  何启盖  刘军发  刘正飞  吴斌  陈焕春  石勇  冷光敏 《今日畜牧兽医》2004,(7)

1 发病 情况 某 场存 栏 生 产母 猪 593头 ,2002年 4月份 产仔 347头 ,其中 弱 仔 4头,占 1.2%;木 乃伊 18头 ,占 6.95%;死胎 51头 ,占 14.7%。新 生仔 猪一 周 龄 内 死 亡 57头 ,占 16.4%,断 奶 30d 前 死 亡 81头 ,占 23.3%,共计 损失 211头 ,育 成率 为 39.2%。 母猪 近情  相似文献