全文获取类型
| 收费全文 | 168篇 |
| 免费 | 1篇 |
| 国内免费 | 45篇 |
专业分类
| 5篇 | |
| 综合类 | 15篇 |
| 畜牧兽医 | 194篇 |
出版年
| 2024年 | 2篇 |
| 2023年 | 4篇 |
| 2022年 | 6篇 |
| 2021年 | 3篇 |
| 2020年 | 4篇 |
| 2019年 | 4篇 |
| 2018年 | 4篇 |
| 2017年 | 1篇 |
| 2016年 | 2篇 |
| 2015年 | 6篇 |
| 2014年 | 7篇 |
| 2013年 | 5篇 |
| 2012年 | 8篇 |
| 2011年 | 12篇 |
| 2010年 | 8篇 |
| 2009年 | 15篇 |
| 2008年 | 11篇 |
| 2007年 | 4篇 |
| 2006年 | 4篇 |
| 2005年 | 18篇 |
| 2004年 | 25篇 |
| 2003年 | 20篇 |
| 2002年 | 12篇 |
| 2001年 | 9篇 |
| 2000年 | 8篇 |
| 1999年 | 7篇 |
| 1998年 | 4篇 |
| 1988年 | 1篇 |
排序方式： 共有214条查询结果，搜索用时 28 毫秒
71.
猪胸膜肺炎放线杆菌快速PCR检测方法的建立 总被引：11，自引：0，他引：11
根据猪胸膜肺炎放线杆菌 (Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的 apx A基因序列设计了 1对可扩增 1个4 2 2 bp片段的特异性引物 ,成功地建立了一种检测 APP的快速 PCR方法 ,并确定了其特异性和灵敏性。对血清 1～ 13型等 13个 APP标准株均能扩增出预期 4 2 2 bp的特异性条带 ;对猪副嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌的扩增结果为阴性。对 APP菌液最低检出浓度为 6 8CFU/ m L(D6 0 0 为 0 .0 0 3)。 12株临床分离菌的 PCR扩增结果与生化鉴定结果是一致的。该方法能从病料中分离培养 8h的混合菌群中快速检测APP,可用于 APP的快速诊断和流行病学的调查。 相似文献
72.
正近两年来,腹泻是养殖业的一个大问题,尤其是冬春多发,夏天也有,由于目前很多规模猪场做的都是自动控温系统,猪场里面的温度是均衡的,因此,这种疾病的防控可能会成为常态化。猪消化系统正常的功能依赖于结构与功能的完整,以及有益微生物与有害微生物之间的平衡。在临床上,如果用抗生素治疗腹泻病3天,效果依旧不理想,甚至有时候越用抗生素腹泻越严重,这时候可以使用一些微生态制剂,恢复受损的胃肠道微生物。一、腹泻的原因猪场发生腹泻后,很多猪场都是先看是什么病原,其实更应该关注是什么原因导致的发病,常见的猪腹泻原因有以下几 相似文献
73.
正一、疾病发生概况疾病发生概况主要依据:笔者所在实验室2011~2012年猪病诊断结果;2011~2012年亚洲猪病信息(以第6届APVS论文集为依据);2013年国家生猪技术体系信息。(一)临床送检猪病归类分析2011年1月至2012年12月共接诊5203家规模化猪场送检的27022份临床病料、病猪和33215份血样,对其中2307家送检病猪猪场进行临床疫病分 相似文献
74.
【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actionobacillus pleuropneumoniae,App)鞭毛蛋白(flic)编码基因的重组表达质粒,对其编码蛋白进行生物信息学分析,并将其在原核细胞中进行表达。【方法】利用PCR方法扩增flic基因片段,将其克隆至pMD-18T载体后测序,利用生物信息学软件对其编码蛋白的二级结构及跨膜区进行预测。构建重组表达质粒pGEX-flic,转化大肠杆菌工程菌BL21,经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE及Western-blo对表达蛋白进行鉴定。【结果】获得的目的基因片段长度为528 bp,测序表明其序列与GenBank公布的一致;软件预测结果显示,该蛋白具有多个明显的二级结构成分及跨膜区;SDS-PAGE检测表明,在约50 ku处有一特异性条带;Western-blot检测表明,表达蛋白具有良好的抗原活性。【结论】成功获得了App的flic基因,其编码的蛋白质具有较多的α螺旋区和无规则卷曲区域,表达的鞭毛蛋白具有生物学活性。 相似文献
75.
猪防御素基因pBD-2在大肠杆菌中的重组和融合表达 总被引：2，自引：2，他引：0
哺乳动物防御素是动物机体在抵御病原微生物的防御反应中产生的一类重要的抗菌肽物质,具有十分广泛的抗菌谱,在先天免疫上起重要作用。本研究根据已报道的pBD-2基因cDNA序列,合成了3条基因片段(1、2、3)。片段1、2和片段2、3各有15个碱基互补配对,PCR扩增延伸得到pBD-2基因,将pBD-2基因克隆至原核表达载体pGEX-KG,成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出pBD-2融合蛋白。pBD-2基因的成功表达为进一步研究其抗菌活性打下了基础。 相似文献
76.
猪肺Ⅱ型上皮细胞的分离和培养研究进展 总被引：2，自引：0，他引：2
肺泡Ⅱ型上皮细胞具有重要的生理功能,并与肺内其他细胞之间存在着复杂的关系。研究Ⅱ型细胞的体外培养,为科学评价Ⅱ型细胞在多种生物机制中所起的作用提供了有效的途径。上皮细胞的提取技术经过近30 年的发展,日渐成熟,呈现多样化的特点。总的说来,肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、纯化、原代培养和鉴定,操作复杂,时间长,损伤较大,且细胞形态功能易发生变化,因此仍然有必要改进分离和培养技术。文章主要概述了猪肺泡上皮细胞提取,以及原代培养技术的进展与存在的问题。 相似文献
77.
猪大肠杆菌水肿毒素SLT-ⅡeA基因的克隆和序列分析 总被引：4，自引：1，他引：3
研究以本地猪水肿病大肠杆分离物ED1株为材料,利用PCR克隆了含猪水肿病大肠杆菌(VTEC)slt—ⅡeA基因987bp的片段,并测定了含该克隆片段的BamHⅠ、HindⅢ酶切片段的核苷酸序列。结果表明,slt—ⅡeA基因的编码区全长960bp,编码319个氨基酸的蛋白质,序列与国外报导的S1179株进行比较发现其核苷酸同源性为98．9％。经推导的氨基酸序列的同源性为99．7％。这为进一步研究slt—ⅡeA的生物学特性、水肿病的分子诊断及其防制打下基础。 相似文献
78.
猪伪狂犬病油乳灭活疫苗最小免疫剂量测定及区域试验 总被引：6，自引：0，他引：6
猪伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ）是由疱疹病毒科的伪狂犬病毒引起,主要引起种猪不育,公猪睾丸发炎、肿胀、萎缩,丧失种用能力;母猪返情,配不上种;妊娠母猪流产、产死胎及弱胎;仔猪生后大量死亡,断奶仔猪发病死亡,育肥猪生长滞缓、增重减慢,造成较惨重的经济损失［１,２,３］。猪是本病的贮存者和传播者。伪狂犬病毒感染后能形成潜伏感染,,使病毒长期存在于中枢神经系统,在应激条件下被激活而导致本病的暴发［４］。免疫接种可以阻止临床症状的发生,降低经济损失,同时免疫后使猪减少向外排毒的数量,使环境野毒的数… 相似文献
79.
伪狂犬病是严重危害养猪业健康发展的主要疾病之一。近几年来,本病是母猪繁殖障碍的最常见和最主要的传染病之一,主要引起母猪流产、产死胎、木乃伊胎、新生仔猪的大量死亡,同时可导致母猪不育,屡配不孕［１］。对于本病应采取综合防制措施,如严格的灭鼠,杜绝传染源的传入（尤其是引种关）、加强免疫等。其中,免疫措施在受病原威胁或已发病猪场都是最重要和最实际的,因为目前在我国许多猪场尚未建立起严格的种猪引进检疫制度,因而在引种时,伪狂犬病病毒会随着处于潜伏感染状态的猪带进。目前,预防伪狂犬病所使用的疫苗有油乳剂灭… 相似文献
80.
2010年以来,猪流行性腹泻病毒(PEDV)GⅡ型变异毒株的出现,导致全世界范围内猪流行性腹泻(PED)的病死率显著增加。疫苗免疫是PED有效防控的重要策略之一,疫苗诱导的中和抗体水平是免疫效果评价和疫苗质量评估的重要指标。然而,在Vero-CCL81上开展的PEDV经典中和试验中所添加的胰酶会导致试验结果不稳定等问题。本研究拟在构建稳定表达绿色荧光蛋白的重组病毒基础上,建立一种能准确评估样品中和抗体的检测方法。本研究在pUC57载体上克隆插入GⅡb亚型PEDV-GDU株部分ORF1a和ORF1b基因片段与其他结构基因片段,并通过无缝克隆技术将ORF3基因替换为EGFP基因,构建辅助质粒pUC57-PEDV-GDU-dORF3-EGFP,通过RNA定向重组技术拯救重组荧光病毒rPEDV-GDU-dORF3-EGFP。进一步通过间接免疫荧光试验(IFA)、Western blot和病毒生长曲线测定等方法,比较重组荧光病毒和亲本病毒生物学特性。最终利用重组荧光工具病毒筛选在不添加胰酶的条件下仍能支持PEDV有效增殖的细胞系,并建立中和试验方法。结果表明,成功拯救重组荧光病毒rPEDV-GD... 相似文献