磺胺类药物在饲料和畜产品中的残留、危害与检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘庆堂  邓瑞广  张改平 《饲料工业》2007,28(17):33-35

<正>药物性饲料添加剂的应用,造成畜产品中药物残留,从而造成的环境危害以及"三致"[致癌(Carcinogenic effect)、致畸(Teratogenic effect)、致突变(Mutagenicity)]作用等已经成为人们关注的焦点问题。磺胺类药物作为应用广泛的抗菌素,由于其具有  相似文献   

西马特罗人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备   总被引：8，自引：0，他引：8  

职爱民  刘庆堂  李青梅  杨苏珍  胡骁飞  柴书军  邓瑞广  张改平 《华北农学报》2010,25(4)

拟合成并鉴定西马特罗(Cimaterol,CIM)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源CIM多克隆抗血清.通过重氮化方法将西马特罗偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原BSA-CIM和包被抗原OVA-CIM,并采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行了鉴定.结果表明,半抗原CIM和载体蛋白偶联成功.动物免疫试验结果显示,6只小鼠效价均达1×10-3以上,且4号小鼠多抗血清抗CIM的IC50为86.9 ng/mL,表明成功获得了高效价、特异性好、亲和力高的的鼠源抗CIM多抗血清.  相似文献   

磺胺嘧啶多克隆抗体的制备     

杨继飞  职爱民  刘庆堂  邓瑞广  柴书军  张改平 《河南农业科学》2009,(5)

为制备磺胺嘧啶(sulfadiazine,SD)多克隆抗体(pAb),用重氮化方法将SD偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成免疫抗原BSA-SD和包被抗原OVA-SD。用紫外扫描、SDS-PAGE凝胶电泳试验检测,结果表明偶联成功。用BSA-SD免疫新西兰大白兔,间接ELISA测定多克隆抗体效价。阻断ELISA结果显示:SD单克隆抗体(pAb)的IC50达19.19ng/mL,和其他磺胺类药物交叉反应小于等于2.7%。结果表明,获得了高效价和特异的pAb。  相似文献   

诺氟沙星单克隆抗体的制备及其特性鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘庆堂  职爱民  李青梅  柴书军  赵东  张磊  邓瑞广  张改平 《中国预防兽医学报》2010,11(9)

为制备诺氟沙星单克隆抗体(MAb),用碳二亚胺法将诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)分别偶联于载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA),合成免疫原BSA-NFLX和包被原OVA-NFLX,并用紫外(UV)扫描、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠进行鉴定;用BSA-NFLX免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌NFLX MAb的细胞株,用体内诱生腹水法制备NFLX MAb;对NFLX MAb的效价、敏感性和特异性等特性进行测定。结果表明:NFLX人工抗原制备成功,融合筛选后获得3C6、3G11两株特异敏感的杂交瘤细胞,两株细胞培养上清液效价为1∶512,腹水效价为1∶6.4×105,3C6株对NFLX的IC50为2.52μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03%的交叉反应性,与其他抑制物无交叉反应性。本实验获得了高效价、敏感、特异的抗NFLXMAb,为NFLX残留快速检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   

口蹄疫诊断技术研究进展   总被引：3，自引：2，他引：1  

杨苏珍  李清州  张改平  鲍登克  万博  刘庆堂 《河南农业科学》2009,(10)

口蹄疫是一种严重影响畜牧业生产的急性传染病,防制口蹄疫的重要环节是要做出及时准确的诊断。随着对口蹄疫研究的不断深入,口蹄疫诊断技术也得到了很大发展。为此,对传统的病毒分离、ELISA方法、核酸探针技术、RT-PCR方法以及目前的免疫动物和自然感染动物的鉴别诊断技术以及合成肽ELISA技术进行了综述,旨在为口蹄疫的预防和控制提供参考。  相似文献   

喹乙醇单克隆抗体的制备及其免疫学特性的鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

宋春美  李青梅  刘庆堂  职爱民  张改平  王选年 《核农学报》2010,24(4):777-783

通过质谱法鉴定合成喹乙醇-半琥珀酸酯(OLA-HS),紫外法及凝胶电泳法鉴定全抗原OLA-BSA和OLA-OVA后,使用杂交瘤技术制备喹乙醇单克隆抗体(OLA mAb),对其效价、亲和力、敏感性、特异性及亚型进行鉴定,并通过体内诱生腹水法进行大量制备。试验结果表明,本研究成功制备了OLA-HS,且半抗原与载体蛋白偶联成功;筛选出的5株杂交瘤细胞单抗同种型均为IgG1,细胞培养上清间接ELISA效价在1∶3.0×102～1∶1.28×103之间,用4E12细胞株制作的腹水效价为1∶5.12×105。OLAmAb亲和常数Ka为3.75×1010L/mol,对OLA的IC50为1.51ng/ml,且具有较好的特异性。试验获得了高效价、敏感、特异的OLA mAb,可用于动物性食品中OLA残留检测的免疫学试验。  相似文献   

二氟沙星残留检测直接竞争ELISA方法的建立     

李彬彬  邓瑞广  侯玉泽  张改平  赵东  刘庆堂  柴书军  王自良 《农业生物技术学报》2009,17(3)

应用分泌抗二氟沙星(DIF)单克隆抗体(DIFmAb)的杂交瘤细胞株建立直接竞争ELISA分析方法.特异性实验结果表明,与达氟沙星的交叉反应率为0.32%,与其它氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应,该方法对DIF的检测限可达到0.1μg/L,半数抑制浓度IC(50)为2.2 μg/L,线性范围0.1～128.0μg/L,平均批内和批间变异系数小于15%.对牛奶和鸡肉分别添加0.4、2.0、10.0和50.0μg/L DIF标准品.平均回收率分别为89.3%和83.9%.直接竞争ELISA准确度高、重复性好、特异性强,适用于DIF残留快速检测的推广应用.  相似文献   

二氟沙星单克隆抗体的研制研制及其免疫学特征的鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

李彬彬  邓瑞广  侯玉泽  张改平  王自良  赵东  刘庆堂  柴书军 《中国农学通报》2008,24(10)

采用改进的碳二亚胺法,将半抗原二氟沙星(DIF)与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,制备得到二氟沙星全抗原DIF-BSA和DIF-OVA.采用紫外(UV),凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-DIF免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备二氟沙星单克隆抗体(DIF mAB),并对其效价、亲和力和特异性等进行鉴定.结果表明,BSA与DIF偶联成功,分子结合比为1:4.7,筛选出1H10、2F12、4D8共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:5.12×102、1:3.2x101、1:2.56×102,腹水效价分别为1:2.56×105、1:1.28x105、1:6.4×104.同种亚型分别为IgG1、IgG1、IgG2a,亲和常数(Ka)分别为2.94×1010L/mol、1.72×1010L/mol和1.35×1010L/mol.亲和力最高的1H10对DIF的IC50为2.2ng/ml,单抗与其他氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应.通过试验获得高效价、敏感、特异的mAb,适用于动物性食品中DIF的残留检测的免疫学试验.  相似文献   

二氟沙星单克隆抗体的研制及其免疫学特性的鉴定     

李彬彬  邓瑞广  张改平  侯玉泽  王自良  赵东  刘庆堂  柴书军 《勤云标准版测试》2008,(10)

采用改进的碳二亚胺法,将半抗原二氟沙星(DIF)与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,制备得到二氟沙星全抗原DIF-BSA和DIF-OVA.采用紫外(UV),凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-DIF免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备二氟沙星单克隆抗体(DIF mAB),并对其效价、亲和力和特异性等进行鉴定.结果表明,BSA与DIF偶联成功,分子结合比为1:4.7,筛选出1H10、2F12、4D8共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:5.12×102、1:3.2x101、1:2.56×102,腹水效价分别为1:2.56×105、1:1.28x105、1:6.4×104.同种亚型分别为IgG1、IgG1、IgG2a,亲和常数(Ka)分别为2.94×1010L/mol、1.72×1010L/mol和1.35×1010L/mol.亲和力最高的1H10对DIF的IC50为2.2ng/ml,单抗与其他氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应.通过试验获得高效价、敏感、特异的mAb,适用于动物性食品中DIF的残留检测的免疫学试验.  相似文献   

磺胺二甲基嘧啶人工抗原的合成及鉴定     

刘庆堂  职爱民  张改平  邓瑞广  柴书军  赵东  杨继飞  陈现臣 《河南农业科学》2008,(2):91-94

用重氮化方法将SM2偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成了免疫抗原BSA-SM2和包被抗原OVA-SM2。紫外扫描及SDS-PAGE电泳结果表明,BSA-SM2,OVA-SM2的紫外吸收光谱与BSA,OVA,SM2相比均发生了改变;用BSA-SM2免疫BALB/C小鼠,获得了高效价和特异的多克隆抗体,表明半抗原SM2和载体蛋白偶联成功。  相似文献