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目前检测卵黄抗体的方法很多,但IHA方法具有简便快速的优点,本研究的目的是为了建立抗犬瘟热高免卵黄抗体检测方法。采用犬瘟热病毒和犬细小病毒二联疫苗处理作为疫苗抗原,用犬瘟热病死犬的肝脏部分处理后作为组织抗原,制备敏化绵羊红细胞,用IHA方法确定了犬二联疫苗抗原和犬瘟热病毒组织抗原的最适含量。二联疫苗提取抗原的含量为0.7 mg/mL致敏红细胞时,与犬瘟热单克隆抗体反应显著,抗体效价为1∶256;而患犬瘟热松狮犬的肝脏组织抗原蛋白浓度为0.5mg/mL,与犬瘟热单克隆抗体反应显著,抗体效价为1∶128。经过IHA验证,制备的松狮犬瘟热肝组织抗原,蛋白含量0.5 mg/mL 1%致敏红细胞,对应的单抗、鸡血清均出现了凝集,阳性对照也出现凝集,阴性对照未出现凝集。建立的IHA抗体检测方法,为准确检测制备抗犬瘟热高免卵黄抗体的效价奠定了基础。 相似文献
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【目的】探讨经促孕散对不孕奶牛治疗前后血清中微量元素(Cu、Fe、Mn、Zn)与白介素(IL-1、IL-6)的含量变化规律。【方法】利用火焰法、原子吸收光谱法和酶联免疫吸附法检测实验组和正常组治疗前、后血清中微量元素和白介素的含量。【结果】①促孕散治疗持久,黄体有效率为91.67%,卵巢静止有效率为88.89%,②持久黄体型治疗前血清中Cu、Zn含量显著高于正常组(P<0.05),Mn含量极显著低于正常组(P<0.01),治疗后血清中含量接近正常,且含量水平差异不显著(P>0.05),Fe、IL-1、IL-6含量治疗前后与正常组比较差异不显著,③卵巢静止型治疗前血清中Mn含量低于正常组(P<0.01),IL-1含量高于正常组(P<0.05),治疗后逐步与正常组含量水平差异不显著(P>0.05),Cu、 Fe、Zn、IL-6含量治疗前后与正常组比较差异不显著(P>0.05)。【结论】促孕散对不孕奶牛血清中部分微量元素和白介素含量有微调作用,在奶牛不孕症治疗效果上有不可忽视的作用。 相似文献
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为探讨促孕散治疗持久黄体的作用机理,本研究通过直肠检查结合B超直肠检查对持久黄体奶牛做出诊断后口服促孕散,应用B超每3 d对黄体直径、卵泡数量、卵巢长度、卵巢宽度、子宫角纵径和子宫颈纵径进行测量,并统计1次,与用药前进行对比。30头持久黄体奶牛口服促孕散后,治疗有效头数25头,有效率为83.3%。停药后第1天卵巢出现小卵泡和中等卵泡,停药后分别在第10和19天大卵泡数量最多,部分奶牛出现发情并排卵,与用药前卵巢相比,结果发现左、右侧卵巢长在停药后均降低,但差异不显著(P>0.05);左、右卵巢宽在停药后均降低,但差异不显著(P>0.05);子宫颈纵径和子宫角纵径均在停药后升高,但差异不显著(P>0.05)。结果表明,B超是诊断奶牛持久黄体的有效手段,中药促孕散对持久黄体奶牛卵巢和子宫形态等指标具有一定的影响,可以促进黄体的溶解。 相似文献
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本试验旨在探讨经理囊散治疗不孕症奶牛前后,血清中微量元素(Cu、Fe、Mn、Zn)与白介素(IL-1、IL-6)的含量变化规律。利用火焰法原子吸收光谱法和酶联免疫吸附法分别检测试验组和对照组治疗前、后血清中微量元素和白介素的含量。试验结果表明,①理囊散治疗卵泡囊肿有效率为83.33%,排卵延迟有效率为90.91%;②在卵泡囊肿型奶牛中,Mn、Zn含量治疗前均显著低于正常组(P<0.05),Fe治疗前显著高于正常组(P<0.05),经治疗后逐渐达到正常值水平,Cu、IL-1、IL-6含量治疗前后差异不显著;③在排卵延迟型奶牛中,Fe治疗前显著高于正常组(P<0.05),Mn含量治疗前极显著低于正常组(P<0.01),Zn含量治疗前显著低于正常组(P<0.05),经治疗后逐渐达到正常值水平,Cu、IL-1、IL-6含量治疗前后差异不显著。因此,理囊散对奶牛不孕症血清中部分微量元素和白介素含量有微调作用,在奶牛不孕症治疗效果上有不可忽视的作用。 相似文献
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【目的】 诊断致犊牛腹泻冠状病毒。【方法】采集石河子、沙湾、奎屯等10个规模化奶牛场141份腹泻犊牛粪样,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行冠状病毒检测,PCR方法进行核酸复检。同时根据GenBank登录的牛冠状病毒 N基因序列,设计特异性引物,对Mebus分离株N基因进行扩增,克隆到PMD 19-T载体后,将测序正确的基因片段经EcoRI和HindIII双酶切后连接到PET-28a和PET-32a载体中,构建重组表达载体PET-28a-N和PET-32a-N,进行测序,亚克隆入BL21(DE3)表达载体,用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。【结果】所采集141份腹泻犊牛粪便中,用ELISA检测阳性率70.21%;再用RT-PCR检测出阳性率为61.7%同时,克隆了牛冠状病毒N基因,片段大小为1 400 bp,双酶切鉴定目的条带正确,测序结果与标准序列的进行比对同源性达到98.22%,通过SDS-PAGE分析证实表达的重组蛋白PET-28a-N-DE3相对分子质量为54KD;重组蛋白BCV-32a-N-DE3相对分子质量为70KD,Western blot分析表明该重组蛋白BCV-32a-N-DE3和BCV-28a-N-DE3和可以与牛冠状病毒阳性血清发生特异性反应。【结论】犊牛冠状病毒是导致石河子、沙湾、奎屯等10个规模化奶牛场和部分肉牛场犊牛腹泻的主要病原;ELISA方法和RT-PCR方法结合应用检测犊牛冠状病毒效果具有参考意义。获得的牛冠状病毒N蛋白具有很好的免疫反应性,为牛冠状病毒诊断试剂研发奠定基础。 相似文献
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为了调查规模化牛场致犊牛腹泻轮状病毒病的感染情况,在石河子、昌吉、奎屯等地区的主要牛场采集犊牛腹泻样品共172份。通过设计并合成牛轮状病毒VP6基因引物,采用反转录聚合酶链试反应和ELISA双抗体夹心技术进行牛轮状病毒抗原检测,结果显示:172份样品中有127份牛轮状病毒RT-PCR检测阳性,阳性率73.83%,经序列同源分析,VP6基因与标准序列同源性达到100%;采用ELISA方法,检测出显示阳性样品100份,阳性率72%。新疆部分地区主要规模化奶牛场和部分肉牛场犊牛遭受牛轮状病毒病的感染,部分规模化奶牛场犊牛感染严重。 相似文献
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[目的]探讨理囊散治疗排卵延迟不孕奶牛血液生殖激素和微量元素含量关系,分析其相关性与回归方程。[方法]采用ELISA法测定理囊散治疗排卵延迟不孕奶牛前后血清中促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、孕激素(P)和雌二醇(E2)的浓度,采用原子吸收光谱法测定血清Cu、Fe、Mn和Zn含量,分析4种激素和4种微量元素间的相关关系与回归方程。[结果]P浓度与Cu、Mn、Zn含量呈正相关,而与Fe含量呈负相关。E2浓度与Cu、Fe、Zn含量呈正相关,而与Mn含量呈负相关。FSH浓度与Fe含量呈正相关,而与Cu、Mn、Zn含量呈负相关。LH浓度与Cu、Fe含量呈正相关,而与Mn、Zn含量呈负相关。[结论]排卵延迟不孕奶牛血清中微量元素含量对激素的分泌有影响。 相似文献
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