猪流感病毒核酸检测装甲RNA质控样品的研制     

乔彩霞  高志强  蒲静  汪琳  刘环  张利峰  张鹤晓  刘金华 《中国预防兽医学报》2014,(5):371-375

为研制一种可以应用于猪流感病毒(SIV)核酸检测的质控品,本研究选取MS2噬菌体装甲RNA(Armored RNA)作为RNA病毒核酸检测质控样品,将MS2噬菌体成熟酶蛋白基因、衣壳蛋白基因、包装位点及SIV M基因克隆于表达载体pET-32a中,经原核表达后,利用Cellufine sulfate层析柱纯化,RT-PCR和实时荧光RT-PCR鉴定表明制备的装甲RNA(AR-SIVM)病毒样颗粒中包装有SIV M基因。稳定性研究显示,AR-SIVM可以耐受RNase的降解,并且在-20℃和4℃至少可以保存3个月。试验结果表明,AR-SIVM作为SIV核酸检测质控样品,能够实现对检测全过程(核酸提取、反转录和PCR)的质量控制。  相似文献   

应用TaqMan荧光定量PCR快速检测鹿血中副结核分枝杆菌   总被引：2，自引：2，他引：0  

王春雨  杨莉  刘金华  宋占昀  周亮  王海军  王振国  王全凯 《中国预防兽医学报》2011,33(3)

为建立快速检测鹿血中副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis,MAP)的荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的MAPf57基因序列设计并合成引物及探针,并检测该方法的特异性和敏感性。试验结果显示,该方法具有良好的特异性,对MAP的检测灵敏度可以达到单个菌细胞。对长春地区采集的549份血清样品进行检测,结果显示阳性血清101份,阳性率达到18.4%。本研究结果表明,荧光定量PCR用于动物性产品MAP的检测具有快速、准确的特点。  相似文献   

吉林省鹿源牛分枝杆菌MIRU分型研究     

杨莉  王春雨  孟庆峰  王海军  刘金华  王全凯 《中国预防兽医学报》2014,36(12)

为了解鹿源牛分枝杆菌(M.bovis)基因多态性,初步建立适合吉林省鹿源M.bovis的基因分型方法,本研究利用12个分枝杆菌散在重复单位(MIRU)位点,对96株鹿源M.bovis吉林分离株进行MIRU基因分型研究.结果显示,12个位点中有8个位点(MIRU2、4、16、23、27、31、39及40)具有多态性,可以将96株菌株分为1 1个基因型,分辨力指数(H)为0.893,其中6个中度多态性位点的分辨力为0.877.其余4个位点(MIRU 10、20、24及26)未显示多态性.研究结果表明,鹿源M.bovis与其他宿主来源的M.bovis在基因分型上存在差异.MIRU位点对鹿源M.bovis具有良好的分辨力,该分型方法可以作为鹿结核病分子流行病学研究的有效方法.  相似文献   

硫酸铝对苏打盐碱土吸附氟的影响研究     

刘金华  张志丹  赵兰坡  董蕊 《土壤》2014,46(4):674-677

采用平衡振荡法,通过加入不同比例的铝、氟来研究硫酸铝对苏打盐碱土吸附氟的影响。结果表明:苏打盐碱土加入硫酸铝以后,能够缩短对氟的吸附平衡时间,并且随着铝用量的增加和吸附时间的延长,氟的吸附量呈增加,而解吸率呈降低的趋势;其中1︰1铝氟摩尔比处理的吸附量高达640.45 mg/kg,为不施铝处理的6.5倍,但是其解吸率最低,为24.7%,为对照处理的0.3倍。这与Al3+和F–络合形成不同比的铝氟配合物,Al3+水解后降低土壤溶液pH,并形成羟基铝,进而与盐碱土中的蒙脱石形成聚合羟基铝–蒙脱石复合体有关。因此,铝的存在可以增加苏打盐碱土对氟的吸附,降低解吸率,进而减小氟在该土中的迁移,降低其生物有效性。  相似文献   

氟化钠对小鼠成骨细胞中RANKL/OPG mRNA体外表达的影响     

王建舫  曲伟杰  吴培福  吴清民  刘金华  韩博 《中国农业大学学报》2008,13(1):1-5

为探讨氟化钠对小鼠成骨细胞中核因子-kB 受体活化因子配体 (RANKL)和骨保护素(OPG)mRNA 表达比率的影响,选取新生小鼠颅盖骨,用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离培养成骨细胞.取其第3代成骨细胞,在实验组培养液中加入不同浓度的氟化钠(10-7、10-6和10-5mol/L),并分别培养24、48、96和144h,从细胞板贴壁细胞中提取总RNA,应用荧光定量 RT-PCR 方法检测细胞中 RANKL 与 OPG mRNA 表达比率的变化.结果显示,氟化钠增加了RANKL/OPG mRNA 的表达比率,且呈明显的时间剂量效应关系.对照组和实验组在培养 48 h时,RANKL 与 OPGmRNA 的表达比率显著增加(P相似文献   

鸵鸟新城疫并发大肠杆菌病的病理学观察   总被引：1，自引：0，他引：1  

佘锐萍  刘金华  王彩虹  何诚  董世山  管山红 《动物医学进展》1999,(3)

北京某鸵鸟场饲养４～６ 月龄鸵鸟１５０ 余只，１９９７ 年 １１ 月下旬有２０ 余只鸵鸟陆续先后发病，并相继死亡。临诊表现不吃、不喝、扭颈，口吐绿水，少数见背部脱毛，跗关节及腿部肿胀。经剖检观察，血清学检测，腺胃及脑组织作 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试验并经细菌培养后确诊为新城疫并发大肠杆菌病。用鸡新城疫灭活苗紧急预防接种 １ｍ Ｌ／只，同时用氟哌酸拌料饲喂后，病情基本得到控制。现将病理变化特点介绍如下：剖检变化：共剖检５ 只鸵鸟。主要变化在消化道，表现腺胃扩张，胃底糜烂、溃疡；十二指肠、空肠粘膜弥漫出血如红布，轻者 肠道淋巴滤泡处呈斑点状出血。胰脏均色泽苍白，弥散小点坏死灶，个别见有出血点。肝郁血有的散在小点坏死灶。心室显著扩张，有的见心包积液，心外膜有点出血；肾郁血肿胀，或色淡如土黄色。有的腹腔积液，气囊混浊，腹腔内有干酪样凝块。脾脏郁血肿胀。脑水肿，跗关节及腿部肿胀者，剖开肿胀关节及腿部皮肤可见皮下积聚暗红色血水，不凝固。病理组织学观察所见：胃肠粘膜严重变性脱落，固有膜裸露出血，大量淋巴细胞、浆细胞浸润。肝脏严重的脂肪变性或小点状坏死（空化）。胰腺均见严重的变性，散在小点坏死，脾脏呈密布的血海样变化，鞘动脉增生，管壁呈透明  相似文献   

注水猪肉的市场检疫与处理方法     

陈志刚  曹勇  刘金华  蒋德 《畜禽业》2006,(15):53-53

近几年来,随着生活水平的提高,人们对猪肉的消费量日趋增加,对猪肉质量的要求也越来越高。有些不法商贩为了达到牟取暴利的目的,坑害消费者,在生猪屠宰前对生猪注水,以增加猪肉的重量,这造成猪肉的肉质变差,严重影响食用价值,给消费者的健康带来危害,严重损害了消费者的利益。下面介绍几种注水猪肉的辨别检查方法及相关处理方法。1检查方法在检疫过程中,可以通过如下检查方法来对注水猪肉进行识别。1.1感观检查方法由于检疫手段还很落后,检疫工作流动性大,故常用本法。新鲜猪肉外表微干或微湿润,脂肪洁白,肌肉有光泽,弹性好,用手指压在肌肉…  相似文献   

车险六种情况将遭拒赔     

刘金华 《农村百事通》2013,(1)

一是驾驶员所持驾驶证已过有效期未按规定进行审验,所开车辆属于不合格车辆,保险公司可以根据保险合同拒绝任何理赔. 二是超载、无牌照车出险.对于超载车或者没有上牌的车辆出险,保险公司都会将其拒之门外.一旦发生事故与超载有关,保险公司可以超载为由拒赔.  相似文献   

应用随机PCR技术检测未知病毒基因序列的研究进展     

姚四新  宋东亮  王宪文  刘金华  刘兴友 《中国兽医杂志》2010,46(5)

随机引物PCR技术(random amplified polymorphic DNA,RAPD;arbitrarily primed PCR,AP-PCR)是由Welsh、Williams于1990 年几乎同时建立起来的一项DNA多态检测技术 .该技术以 PCR 为基础,利用一系列单一的人工合成的随机寡核苷酸链为引物,对所研究的基因组DNA 进行 PCR扩增.在该技术问世的短短几年内,因其独特的检测DNA多态性的方式以及简便快速等特点而  相似文献   

农用机械日常节能的主要途径     

刘金华  陈朝海 《农民致富之友》2013,(11):125

目前在农杌使用方面还存在许多问题,造成能源的浪费,节能减排潜力巨大。以河南省为例,主要存在农机装备结构不尽合理,超龄农机继续使用,农户经营规模小,农机与农艺不协调等问题。建议推广高效复式作业机械,改革种  相似文献