鸭肠炎病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定     

李慧昕  刘胜旺  韩宗玺  邵昱昊  刘晓丽  华育平  刘娣  孔宪刚 《中国兽医杂志》2013,49(1):9-12

应用截短表达的鸭肠炎病毒(DEV) VP5-C蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合及筛选,获得4株稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞株,命名为1B5、3A1、4F9、6F6.抗体亚类鉴定表明,4株单克隆抗体均为IgG、k链.间接免疫荧光检测结果表明,4株单克隆抗体均能够与DEV感染CEF发生特异性反应,而不与CEF对照发生反应.Western blot检测,4株单克隆抗体均能够识别大小约为150 kDa的蛋白,说明4株单抗隆抗体是特异性识别VP5蛋白的抗体.DEV VP5蛋白单克隆抗体的制备为进一步鉴定VP5蛋白B细胞抗原表位及VP5蛋白功能研究提供了有效工具.  相似文献   

水貂阿留申病发病机理的研究进展     

马建  华育平 《动物医学进展》2005,26(1):39-42

水貂阿留申病是由阿留申病病毒引起的一种可对水貂养殖业造成严重损失的传染病。该病困扰动物医学界多年 ,始终未得到攻克。近年来随着分子生物学技术的发展 ,国内外学者对该病分子水平的发病机理有了更多的认识 ,研究内容主要集中在与水貂阿留申病发病密切相关的抗病毒抗体、病毒核酸的晚启动子P3 6及其顺式作用元件(cis acting)、结构蛋白VP2等方面。文章对以上研究进展进行了详细的归纳总结与分析 ,并在此基础上提出了尝试使用反义RNA或干扰RNA对该病进行预防、治疗的设想 ,以期今后对阿留申病的继续深入研究能有所帮助。  相似文献   

同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、Ⅰ型和Ⅱ型犬腺病毒多重PCR方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘大飞  姜一曈  戚亭  程景  刘立奎  林文君  柴洪亮  杨天阔  王翀  华育平  曲连东  张洪英 《中国预防兽医学报》2012,34(11)

为建立检测多种犬病的多重PCR方法,本研究根据GenBank登录犬瘟热病毒(CDV)的N基因序列、犬细小病毒(CPV)的NS基因序列和犬腺病毒(CAV)的E3基因序列,设计合成3对特异性引物.通过优化反应条件,建立同时扩增CDV (507 bp)、CPV (287 bp)、CAV-Ⅰ (590 bp)和CAV-Ⅱ(1 027 bp)的多重PCR方法.实验结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测以上4种病毒,而狂犬病病毒检测为阴性;CDV、CPV、CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ的最低检出限分别为101.9 TCID50、101.7 TCID50、101.7 TCID50和102.2 TCID50.利用该方法对由黑龙江省不同地区所采集的30份犬病料样品进行检测,CDV阳性率为23.33％(7/30)、CPV阳性率为20％(6/30)、CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ的阳性率均为3.33％(1/30),证明建立的PCR方法可以用于临床诊断.  相似文献   

同时检测犬瘟热病毒和犬细小病毒双重PCR方法的建立     

刘大飞  姜一曈  杨天阔  林欢  刘春国  柴洪亮  王翀  崔英玲  姜晓飞  马旭青  刘大程  华育平  曲连东  张洪英 《中国预防兽医学报》2012,(3):211-213

为建立可以同时检测犬瘟热病毒(CDV)和犬细小病毒(CPV)的双重PCR方法,本研究根据GenBank登录的CDV N蛋白序列和CPV NS基因保守序列,设计合成2对特异性引物。通过优化反应条件,对CDV阳性病毒株反转录后的cDNA模板和CPV的DNA模板进行双重PCR扩增,同时得到2条与试验设计相符的669 bp(CDV)和392 bp(CPV)特异性条带,建立了同时检测CDV和CPV的双重PCR方法。实验结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测这2种病毒,而对犬腺病毒Ⅰ型、犬腺病毒Ⅱ型、狂犬病毒检测均为阴性;CDV和CPV的最低检出限分别为101.8TCID50和101.4TCID50。采用该方法对在黑龙江省不同地区所采集的30份犬病料样品进行检测,CDV阳性率为30%;CPV阳性率为23.33%,表明建立的PCR方法可以用于临床诊断。  相似文献   

水貂阿留申病病毒单克性抗体的研制和初步应用     

华育平  王金生 《中国畜禽传染病》1990,(6):49-52

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丹顶鹤马立克病的诊治   总被引：1，自引：0，他引：1  

曾祥伟  张显光  华育平  徐建峰  马建华  王文峰 《黑龙江畜牧兽医》2008,(7)

1 发病情况 2007年7月21日,黑龙江扎龙国家级自然保护区人工饲养的8只2月龄丹顶鹤幼鹤突然发病,兽医人员立即将其隔离观察.  相似文献   

禽流感病毒H3N8亚型野鸭源分离株基因特征     

王建琪  华育平  曾祥伟  张兰兰  程成  张玉稳 《东北林业大学学报》2011,39(3):92-95

根据已知禽流感病毒(AIV)的8个基因序列设计合成12对特异引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,分别成功扩增出分离于野鸭(Mallard)的1株H3N8亚型禽流感病毒的全基因片段,将其分别克隆到pMD18-T载体后进行序列测定.同时将8个基因片段与GenBank发表的相应序列进行比较,绘制各基因的进化...  相似文献   

一株野鸭源H6N1亚型禽流感病毒HA基因的克隆及分子进化分析     

张玉稳  柴洪亮  张苗  王建琪  华育平 《野生动物》2010,31(6):327-330,346

根据禽流感病毒的HA基因,设计特异性的引物,而后从尿囊液提取病毒的RNA,应用RT-PCR技术扩增该流感病毒的HA全基因序列,将该基因克隆到pMD-18T载体,并进行鉴定和测序,应用生物学分析软件进行同源性比对和绘制HA基因的进化树,并推导其氨基酸序列。结果表明：HA基因全长1701 bp,共编码567个氨基酸,与Genbank中选择的27株禽流感病毒基因的HA基因序列相比较,核苷酸序列和氨基酸序列同源性均在92%以上。通过对HA基因的同源性比对,可以明确毒株间的进化关系,从而为禽流感的遗传进化研究提供参考。  相似文献   

鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

张瑞莉  刘娣  梁尧  张婧  华育平 《中兽医学杂志》2010,(3):4-6

为证明鱼腥草抗新城疫病毒的作用效果,通过接种鸡胚方法,对病毒接种前、接种同时、接种后加药三种方式处理的鸡胚尿囊液血凝效价进行测定。结果显示,在三种不同的加药方式中,不同浓度的鱼腥草提取液都能够降低新城疫病毒感染鸡胚尿囊液的血凝效价;鱼腥草提取液和新城疫病毒同时注入鸡胚时,鱼腥草原液抗病毒效果最好;鱼腥草提取液于新城疫病毒接种后注入鸡胚时,2倍稀释液抗病毒效果最好;鱼腥草提取液先于新城疫病毒注入鸡胚时,4倍和8倍稀释液抗病毒效果最好。结果表明,鱼腥草提取液能够抑制新城疫病毒在鸡胚尿囊液中的增殖;鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒活性与其加药方式及浓度有关。  相似文献   

近年来黑龙江省毛皮动物犬瘟热的流行特点分析     

韩丹丹  曾祥伟  刘澜澜  华育平 《黑龙江畜牧兽医》2010,(4)

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