旋毛虫G10-7基因在大肠杆菌中的高效表达   总被引：4，自引：0，他引：4  

牛廷献  刘明远  卢强  付宝权  吴秀萍  郑明光  Pascal Boireau 《中国兽医学报》2002,22(5):481-483

旋毛虫新生幼虫期特异性 G10 - 7基因从 PBK- CMV- G10 - 7重组质粒中亚克隆到 p ET- 2 8b( )原核表达载体上 ,成功地构建了重组表达质粒 p ET- 2 8b- G10 - 7。将其转化到大肠杆菌 DE3感受态细胞中 ,经 IPTG诱导表达 ,其细菌裂解物经 SDS- PAGE电泳可检测到相对分子质量约为 34 0 0 0的目的蛋白带 ,且随诱导时间的延长蛋白表达量逐渐增加 ,诱导 4h达到峰值 ,薄层扫描结果显示 ,目的蛋白占菌体总蛋白的 6 1.7%。Western- blotting检测显示 ,此蛋白可被感染旋毛虫家猪阳性血清所识别 ,表明该蛋白具有良好的抗原性。  相似文献   

南乐县小麦测土配方施肥应用效果调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴秀萍 《河南农业》2008,(1)

一、南乐县概况及测土配方施肥基本条件南乐县地处冀鲁豫三省交界处,拥有12个乡镇,322个行政村,50.1万人口。耕地面积3.2万公顷,主要粮食作物有小麦和玉米,其中小麦播种面积3.13万公顷,玉米2.3万公顷,杂粮4000公顷,年粮食总面积5.87万公顷,总产36万吨,是我省72个优质粮食基本县之一。  相似文献   

蛋黄卵磷脂中胆碱含量测定的探讨     

吴秀萍  程白羽  杨轶眉  方乙晨  陈羽菲 《农产品加工．学刊》2013,(21):75-76,80

采用分光光度法测定蛋黄卵磷脂中胆碱的含量,结果表明当水浴加热时间为6 h时能达到一个最佳水解效果,水解液的pH值对胆碱含量的测定结果没有直接影响。  相似文献   

黏蛋白在肠道寄生虫感染中的作用     

苗雅娟  吴秀萍  王光明  王学林  赵颖 《湖北农业科学》2012,51(12):2409-2411,2415

黏蛋白是由黏膜下腺体或上皮细胞中的黏液分泌的一种高分子蛋白,是一类具有典型黏附性和弹性的糖蛋白.在胃肠道寄生虫感染过程中,黏蛋白作为肠道黏膜屏障的主要组成部分在防御和清除寄生虫感染过程中发挥着重要作用.主要综述了黏蛋白的结构,糖基化模式以及感染个别肠道寄生虫时,相关的黏蛋白和黏蛋白样分子在宿主的先天性和适应免疫反应中所表现出的生化特性.  相似文献   

旋毛虫新生幼虫p46 000抗原基因的克隆及序列分析     

付宝权  吴秀萍  刘明远  张亚兰  原丽红  李莲瑞  卢强  陈启军  P.Boireau 《中国兽医学报》2005,25(1):37-39

应用旋毛虫感染猪血清，对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行了免疫筛选。对阳性克隆pBK-cMV-WN10的序列分析结果表明。cDNA全长为1352bp。含有1个1218bp的完整的开放阅读框架(ORF)，编码的多肽由406个氨基酸残基组成，其相对分子质量理论推导值为45900，等电点为5．43，N末端的信号肽及糖基化位点(NCS)表明其可能为分泌性糖蛋白，氨基酸序列19～156与158～295为重复区域，相似性为74％．C末端有1个半胱氨酸蛋白酶抑制剂结构域，但旋毛虫p46000抗原与其他线虫的半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白结构有很大差异，可能已经失去半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白的功能。PCR结果显示。从旋毛虫新生幼虫、肌幼虫、3日龄成虫和5日龄成虫cDNA中均扩增出此基因，表明此基因在旋毛虫各个时期均有表达。  相似文献   

旋毛虫3日龄成虫cDNA文库的免疫筛选   总被引：5，自引：0，他引：5  

张亚兰  付宝权  刘明远  原丽红  吴秀萍  李莲瑞  卢强  陈启军  P.Boireau 《中国兽医学报》2004,24(4):355-357

以旋毛虫感染猪血清为抗体探针 ,对旋毛虫 3日龄成虫 c DNA文库进行免疫筛选 ,将获得的阳性克隆进行测序 ,用分子生物学软件对所得 c DNA序列进行序列分析。结果从 4× 10 5个重组噬菌体中共获得 33个阳性克隆。序列分析结果显示 :共发现新 c DNA序列 16个 ,已知 c DNA序列 4个。其中阳性克隆 Zh8,9,10 ,12 ,13,14 ,2 0 ,2 6 ,2 8,2 9,36 ,5 4 ,6 8,70编码丝氨酸蛋白酶。通过免疫学筛选直接获得了具有免疫反应原性的阳性 c DNA克隆 ,为旋毛虫病诊断抗原及保护性抗原的筛选奠定了基础  相似文献   

婴幼儿食品和乳品中维生素C的测定方法研究     

杨轶眉  戴彦韵  周泽琳  吴秀萍  程白羽 《农业机械》2012,(12):120-124

维生素C(又名:抗坏血酸)是维护机体生长发育、活动及正常代谢所需的营养素之一。维生素C在酸性条件下,经酸性活性炭氧化成脱氢抗坏血酸,它与邻苯二胺发生缩合反应生成荧光物质,于激发波长350nm,发射波长430nm条件下,用荧光分光光度计测定其荧光强度,其荧光强度与浓度呈良好的线性关系。婴幼儿食品和乳品中维生素C的添加量普遍较低,本文对使用荧光光度法测定过程中影响荧光强度的因素进行分析,从而提高分析结果的准确度。  相似文献   

豫北高产区冬小麦丰缺指标试验研究     

吴秀萍 《河南农业》2010,(13)

一、试验目的 通过冬小麦土壤养分丰缺指标试验,进一步研究豫北潮土区冬小麦施肥指标和养分吸收量、土壤供肥力、肥料利用率等相关参数,为施肥分区和肥料配方提供理论依据.  相似文献   

豫北高产区冬小麦合理施氮量研究     

吴秀萍 《河南农业》2010,(5)

氮、磷、钾肥料对提高小麦单产起到了重要作用,但随着施肥量的增加、肥料利用率降低、经济效益下降等问题日益突出,确定适宜的氮肥用量是小麦高产优质高效栽培的重要措施.为了摸清豫北高产区冬小麦氮肥最佳施肥量和最高产量施肥量,进一步完善小麦施肥指标体系,我们安排了小麦氮肥用量试验.  相似文献   

旋毛虫新生幼虫WN1抗原基因的克隆及表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

高长玲  付宝权  刘明远  郭桓  孙树民  吴秀萍  卢强  陈启军  P.Boireau 《中国兽医学报》2005,25(3):276-278

应用旋毛虫人工感染猪血清对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行免疫筛选，对阳性克隆WN1序列进行生物信息学分析。结果表明，WN1 cDNA全长为474bp，含有1个354bp的完整的开放阅读框架(ORF)，编码的多肽由117个氨基酸残基组成，其相对分子质量理论推导值为13200，等电点为4．25，N-末端的信号肽表明其可能为分泌性蛋白。GenBank数据库检索结果显示，此序列为一个新基因的全长cDNA。经PCR扩增WN1基因，将其克隆到原核表达载体pET28a，重组质粒经鉴定后，转化大肠杆菌BL21 star(DE3)并诱导表达出相对分子质量为15000的重组蛋白，与理论设计完全相符。  相似文献