应用重组N蛋白—ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

王云峰  周艳君  仇华吉  钱平  蔡雪晖  柴文君  童光志 《中国兽医杂志》2001,37(3):3-5

利用昆虫杆状病毒表达系统表达的猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白作为抗原，包被聚苯乙烯微量反应板，建立了猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白-ELISA诊断方法。试验证明，该方法对其他8种猪疫病阳性血清均无交叉反应，对标准阳性样品的检出率为100%。具有敏感性高、特异性强的特点。  相似文献   

rNP-ELISA检测抗猪流感病毒抗体工作条件的优化   总被引：1，自引：0，他引：1  

李曦  符芳  周艳君  王晓武  童光志 《中国兽医杂志》2007,43(10):21-22

猪流感是生猪养殖的国家普遍都会遇到的猪的呼吸道病[1]。虽然HI检测已经被作为可信赖的抗流感病毒抗体的检测方法[2]。但是,应用ELISA方法检测抗体具有明显的优势,对于待检血清不需要进行任何处理,而且也不必要对应用的抗原进行更换与选择[3]。试验采用的包被抗原为重组NP蛋白  相似文献   

PRRSV SD2株ORF5/ORF6基因克隆及双基因真核表达载体的构建     

李俊  王金宝  袁小远  崔尚金  李曦  符芳  周艳君 《动物医学进展》2006,27(10):78-81

以PRRSV细胞培养物为模板，经RT—PCR扩增得到ORF5／ORF6基因，该产物和pIRES真核表达载体分别经双酶切，连接构建pIRES-ORF5／ORF6。经PCR、双酶切鉴定和测序证明成功构建了真核表达载体pIRES-ORF5／ORF6。测得的ORF5／ORF6序列与VR-2332株的氨基酸同源性分别为99％和100％，属北美洲型。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF6基因在毕赤酵母中的表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

钱平  周艳君  童光志  仇华吉  王云峰  吴丹  薛强  陈焕春 《中国预防兽医学报》2002,24(3):161-164

根据酵母表达系统的密码子偏爱性、poly(A)信号以及外源基因mRNA5’端的二级结构等特性 ,对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)ORF6基因进行简并改造和人工合成 ,然后以正确的读码框架插入到分泌型酵母高效表达载体pPICZαA的α因子信号肽编码序列 3’端 ,构建成酵母转移载体 ,用化学方法转化受体酵母菌GS115 ,经PCR和酶切鉴定证实 ,目的基因已整合到重组酵母菌染色体中。对重组酵母进行诱导表达 ,并通过SDS_PAGE和Westernblot分析进行筛选 ,获得了一株高效表达目的蛋白的重组酵母菌 ,该重组蛋白具有免疫学活性 ,其表达水平可达 2 .0g/L ,而未经改造的ORF6基因则不表达  相似文献   

三湘生态旅游·郴州篇     

志高 《湖南林业》2005,(4)

去年以来,湖南省全面启动了以健康、绿色、阳光为主体的10大生态健康之旅系列活动,即长沙“多情山水,天下洲城”阳光之旅、张家界绿色健康之旅、韶山伟人故里绿色圣地之旅、南岳生态健康游、邵阳緉山自然风光游、益阳农家乐自然生态观光游、湘西民族文化边城山水游、郴州生态文化健康游、岳阳龙舟文化观光游、常德桃花源健康浪漫之旅。为使广大读者对我省旅游资源、旅游文化等有所了解,本刊将推介一些精品线路及景点,以飨读者。  相似文献   

机动喷雾喷粉机的正确使用     

刘俊生张战利  吴金亮雷虹 《农友致富月刊》2001,(4):23-24

机动喷雾喷粉机具有轻便灵活、易操作、效率高、成本低、性能稳定、用途广泛等优点，广泛应用于小麦、油菜、玉米、棉花等大田作物病虫草害的防治。据不完全统计，目前陕西省农村拥有各类机动喷雾机数量已达4万～5万台。我们以目前使用最多的泰山—18型背负式机动喷雾喷粉机为代表，就用户经常来电来信咨询的机动喷雾机的正确使用作以系统介绍，希望能对使用者有所帮助。  相似文献   

厦门地区主要棕榈植物病害种类普查鉴定及其防治   总被引：18，自引：0，他引：18  

金亮  丁印龙 《热带农业科学》2000,(4):12-19

普查和鉴定了厦门地区加拿利海枣等１５种棕榈植物的病害种类。结果表明,业经鉴定的棕榈植物病害共２０种,均为真菌所致。其中,有９种为首次报道。提出了这些病害的防治措施。  相似文献   

浙江省稽东镇标准农田土壤pH现状分析     

章小根  石其伟  林仁元  陈浙锋  祝燕丽  李杏美  金亮  陶娟花 《商界．城乡致富》2014,(1):38-39,60

[目的]研究浙江省绍兴市柯桥区稽东镇标准农田土壤pH现状。[方法]采取野外调查和室内分析的方法对52个土壤采样单元进行分析。[结果]该镇标准农田土壤pH平均值为4．96,属酸性,中性（6．5～7．5）的样本仅1个,占总调查样本数的1．92％,占总标准农田面积的1．78％;25．01％二等3级、8．27％二等4级田标准农田土壤处于中性或微酸性水平（5．5～7．5）,三等田全部为酸性或强酸性（〈5．5）土壤。[结论]建议采取施石灰、增施有机肥、推广测土配方施肥等进行改良、  相似文献   

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒基因缺失标记疫苗ELISA鉴别诊断方法的建立     

孙晶  周艳君  姜一峰  徐彦召  童武  童光志 《中国兽医寄生虫病》2014,(1):30-36

为了配合（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）基因标记疫苗株（rHN4-Δ25＋NP49株）的临床抗体鉴别诊断应用,本研究以标记疫苗中缺失的25个氨基酸多肽作为包被抗原,通过对ELISA反应条件的优化,确定抗原最适包被浓度为500 ng/孔,血清最佳稀释度为1：40,同时确定其阴阳性临界值S/P判定标准为0.15,批内和批间重复实验结果显示其变异系数均低于10%,表明该方法具有良好的重复性。对临床血清检测结果显示与IDEXX试剂盒检测结果的符合率为94.84%,采用25 aa负标记ELISA方法检测HuN4-F112免疫猪血清,结果显示从免疫后21 d可检测25 aa特异性抗体,该抗体至少可持续存在126 d。本研究建立的ELISA检测方法为今后PRRSV基因工程标记弱毒疫苗株在临床鉴别诊断的应用提供了有利保障。  相似文献   

P277多肽的表达、纯化及初步药效学分析     

朱爱华  刘文涛  鲁勇  金亮  王宇  刘景晶 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2007,28(4):13-17

通过PCR方法得到P277多肽基因,插入到含门冬酰胺酶C端第199~326氨基酸残基片段的后面,形成融合蛋白,中间预留酸水解位点,并在P277多肽和融合蛋白之间加入一段碱性序列,构建pET28AnsB-C-KR-P277高效表达载体。克隆的基因在大肠杆菌中高效表达,通过Triton X-100洗涤、乙醇分级沉淀纯化融合蛋白AnsB-C-KR-P277,酸水解后经等电点沉淀去除杂蛋白,再经阴离子交换柱层析,进一步分子筛脱盐,可得到纯化的目的多肽P277。这种多肽生产平台,为多肽生物合成提供了一个很好的方法。纯化后的P277免疫型糖尿病模型动物NOD(non-obese diabetic)小鼠,可明显降低NOD小鼠自发性糖尿病的产生。  相似文献