家畜检疫安全溯源系统开发的研究与应用     

朱贤龙  黄夏  农英相  李紫伦  谭媛尹  唐小飞  李海波  磨敦华  黎伊宁 《中国动物检疫》2014,31(3):33-35

为了实现对家畜产品可追溯管理,加强质量安全监管,本研究通过采用动物标识、动物检疫合格证明信息和动物产地检疫电子出证、家畜屠宰检疫电子出证以及互联网等电子技术,构建了根据家畜屠宰前后的动物检疫合格证明信息进行对接而建立起来的家畜产品溯源模式,建立了经济、实用、有效的家畜检疫安全溯源系统。  相似文献   

鸡毒支原体(MG)地高辛探针的制备   总被引：5，自引：0，他引：5  

刘加波  谢芝勋  廖敏  邓显文  谢志勤  庞耀珊  唐小飞 《广西农业科学》2004,35(5):401-404

从带有鸡毒支原体(MG)732bp 16SrRNA DNA片段的重组质粒中回收．并制备出地高辛标记的MG DNA探针。其特异性检测结果表明．该探针能与MG不同毒株核酸抽提物起特异性杂交反应，而与对照NDV、ILTV、MS、MI和MM等病原抽提的核酸的杂交反应均为阴性。敏感性结果表明．该探针对MGDNA的最低检出量为1ng。应用该探针对人工感染MG的SPF鸡的咽喉棉试子进行检测，结果均出现杂交显色反应。表明所制备的探针用于MG的检测是可行的。  相似文献   

二温式PCR检测罗非鱼嗜水气单胞菌的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

刘加波  谢芝勋  唐小飞  邓显文  庞耀珊  谢志勤 《水利渔业》2007,27(4):99-100

根据基因库嗜水气单胞菌的脂肪酶基因序列设计1对特异性引物,用二温式PCR对从病死罗非鱼体内分离的8株嗜水气单胞菌进行扩增。特异性结果显示该引物对8株嗜水气单胞菌均能扩增出与预期大小相一致的760bp扩增产物,而对弧菌、肠炎杆菌、禽多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的扩增均无任何条带。二温式PCR敏感性结果表明可以检测到10pg的嗜水气单胞菌DNA模板。  相似文献   

一步法RT-PCR检测禽呼肠孤病毒的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

廖敏  谢芝勋  谢志勤  刘加波  庞耀珊  邓显文  唐小飞  何竞铭 《中国预防兽医学报》2003,25(1):53-55

根据已发表的禽呼肠孤病毒（ARV）S1133株S1基因序列，设计合成了一对扩增跨幅为532bp的引物。这对引物对ARV标准株，分离株以及人工感染SPF鸡跗关节组织抽提的核酸进行一步法RT-PCR扩增，即将反转录和PCR反应在一个PCR反应管中一次性完成。结果该方法对ARV4个标准株和5个分离株的扩增均获得了与预期大小一致的RT-PCR产物，而对照样品的扩增全为阴性；该方法最低可检测到0.16ng的ARV RNA，还可以直接从感染鸡关节组织抽提的核酸中检测到ARV RNA，表明该一步法RT-PCR对于ARV的检测是可行的。  相似文献   

二温式PCR检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌方法的建立与应用   总被引：9，自引：0，他引：9  

庞耀珊  谢芝勋  刘加波  邓显文  唐小飞  谢志勤 《广西农业科学》2006,37(2):203-205

为了探索简便、快速确诊猪传染性胸膜肺炎的方法,根据猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)apx IV基因序列,设计合成1对特异性引物,建立聚合酶链反应(PCR)检测APP的方法。采用该方法对APP和其他6种猪病病原核酸进行检测,结果只对APP扩增出与预期大小相符的422bp DNA片段,而对其他6种猪病病原核酸的扩增结果为阴性。该PCR最低可检出10pg的APP DNA。对送检的46份可疑病猪组织进行检测,结果有19份样品为阳性,27份为其他病原感染。  相似文献   

复旦1号叶面肥在小麦上应用效果初探   总被引：1，自引：0，他引：1  

邱海军  唐小飞 《上海农业科技》2007,(2):106-107

喷施叶面肥是补充作物营养、调节作物生长的重要手段之一，为验证复旦1号叶面肥在小麦上的应用效果，我们在小麦上进行了叶面肥肥效田间试验，现报道如下。  相似文献   

猪圆环病毒2型广西株的分离和全基因组序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

唐小飞  谢芝勋  刘加波  邓显文  庞耀珊  谢志勤  谢丽基 《动物医学进展》2007,28(10):12-16

从广西表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征的猪群中分离到1株猪圆环病毒2型(PCV-2),命名为GXB株.对GXB株的全基因组进行PCR扩增,扩增产物克隆至PMD18-T载体.测序结果表明,全基因组为1 767 bp,与GenBank上已知的8株PCV-2参考株序列的同源性在95.0%～99.6%之间.序列分析表明,GXB株基因组包含11个读码框(ORF),其中ORF1和ORF2是最主要的读码框,分别编码314个和233个氨基酸,与其他PCV-2毒株的ORF1、ORF2氨基酸的同源性分别为97.8%～100%、91.5%～98.7%.对GXB株ORF2编码的Cap蛋白基因进行功能分析,表明含有1个潜在的糖基化位点,3个明显的亲水区,有较强的抗原性和亲水性,为作为主要的免疫原性蛋白基因提供了依据.  相似文献   

罗非鱼嗜水气单胞菌气溶素毒素基因的克隆及功能分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

唐小飞  谢芝勋  邓显文  余晓丽  刘加波  庞耀珊  谢志勤  谢丽基 《水利渔业》2008,28(3):101-103

根据已发表的嗜水气单胞菌气溶素(Aer)毒素基因的序列,设计1对特异性引物,应用PCR技术,扩增GXL3、GXL5、GXL9共3株罗非鱼嗜水气单胞菌的气溶素成熟蛋白基因,克隆到pMD18-T载体上进行序列测定.测序结果表明,3个菌株Aer毒素成熟蛋白的核苷酸序列为1 335bp,编码445个氨基酸,其与分离株No.BAA83088的成熟蛋白基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性分别为90.9%、91.4%、91.4%和96.2%、96.6%、96.6%,具有很高的同源性.应用分子生物软件分析广西分离株GXL9 Aer成熟蛋白,该蛋白无跨膜区,拥有较多的疏水区和抗原位点,等电点为5.5.  相似文献   

禽呼肠孤病毒σNS蛋白的原核表达及纯化     

谢丽基  谢芝勋  刘加波  唐小飞  邓显文  庞耀珊  谢志勤 《中国兽医学报》2008,28(4):375-378

对重组表达质粒σNS-pGEX-4T-1 IPTG的诱导浓度、诱导时间和诱导温度等条件进行了试验。当细菌的D600值为0.55～0.65时,IPTG最佳诱导浓度为0.8mmol//L,最佳诱导时间为4h,最适诱导温度为28～37℃,表达的目的蛋白相对分子质量约为66200,约占菌体总量的31.5%～33.3%。37℃及32℃诱导时,目的蛋白σNS主要以包涵体的形式存在;28℃诱导时目的蛋白主要以可溶性的方式表达。利用28℃诱导表达目的蛋白,用谷胱苷肽活化的Sepharose 4B亲和层析柱纯化,测定纯化蛋白的纯度与浓度,并对纯化的蛋白进行Western-blot分析。结果显示,纯化后的目的蛋白纯度达93%,质量浓度为0.91g/L,并能与禽呼肠孤病毒阳性血清发生特异性反应。  相似文献   

鸡毒支原体PCR诊断试剂盒的研制及应用     

谢芝勋邓显文  唐小飞谢志勤  庞耀珊廖敏刘加波  何竞铭 《广西畜牧兽医》2003,19(2):56

鸡毒支原体 (ＭＧ)主要引起鸡的慢性呼吸道病 ,造成肉鸡胴体品质下降 ,种鸡产蛋率、受精率和孵化率下降等。当ＭＧ与其它病原合并感染时 ,还会引起严重的并发症 ,导致鸡群死亡率增高 ,给养鸡业带来严重危害。ＭＧ在我国鸡群中的感染相当普遍 ,据对全国 2 0个省市调查结果表明 ,该病的平均感染率高达 78% ,我们对广西调查结果显示 ,鸡群中该病平均感染率为 5 6 9% ,种鸡群中阳性率更高达89 5 % ,严重危害我国养鸡业的健康发展。快速准确诊断是有效防治ＭＧ的前提 ,由于ＭＧ所需培养条件苛刻 ,传统病原分离培养需要 2- 3周 ,甚至更长时间才得…  相似文献