二温式PCR检测对虾白斑综合征病毒   总被引：18，自引：0，他引：18  

庞耀珊  谢芝勋  谢志勤  廖敏  邓显文  刘加波  唐小飞  何竞铭  梁海明 《中国兽医杂志》2003,39(4):43-45

本研究设计了一对能扩增大小为306bp对虾白斑综合征病毒(WSSV)某段基因的特异性引物，优化建立了能快速检测WSSV的二温式PCR，在对包括105份临床样品、10份SPF南美白对虾组织样品和其他对虾病害病原在内的样品检测结果中，有65份临床样品呈现WSSV阳性，而10份SPF南美白对虾组织样品和其他对虾病害病原的PCR结果为阴性。该二温式PCR最低能检测到1pg的WSSV感染对虾组织样品总DNA。这些结果表明，该PCR具有高度的特异性和敏染性。  相似文献   

广西奶牛临床型乳房炎的病原分离及药敏试验报告   总被引：2，自引：0，他引：2  

朱贤龙  谢芝勋  刘加波  邓显文  庞耀珊  唐小飞  李志源 《中国奶牛》2004,(5):43-44

奶牛乳房炎可由多种病原菌共同或单独引起，是一种病因复杂并影响奶牛业健康发展的重要疾病之一。目前全世界的2．2亿头奶牛中，约有1／3患各种类型的乳房炎。奶牛一旦患了乳房炎，采用抗菌素进行治疗在治疗期间和休药期内，所产的牛奶不但不能食用，而且长期治疗的患病奶牛，其乳腺组织产生不可恢  相似文献   

森林的使用价值及其特征     

唐小飞 《农业现代化研究》1987,(3)

森林的使用价值包括森林生物产品生产使用价值和森林生态使用价值。前者的表现特征是:使用价值的实现与生物产品实体的消耗同步,且生物产品可以控制、计量;而森林生态使用价值具有独特的表现特征:其使用价值非有形的实体,实现的方式也非直接,且难以计量和控制;但二者之间又有着不可分割的密切联系。正确认识二者的辨证关系,采取必要和适当的措施或政策,促进森林生物产品生产使用价值和森林生态使用价值全面增长。  相似文献   

腐植酸配方肥在蔬菜上应用效果初探     

邱海军  唐小飞 《上海农业科技》2007,(2):119-119

2006年我们在二门荡村7组保护地蔬菜生产基地进行了腐植酸配方肥（18—8—9—5）试验。现将试验报道如下。  相似文献   

病料保存条件及抗菌药物治疗对鸡毒支原体PCR试剂盒检测结果的影响     

唐小飞  邓显文  谢芝勋  谢志勤  庞耀珊  廖敏  刘加波  何竟铭 《广西畜牧兽医》2003,19(6):244-247

应用鸡毒支原体(MG)S6毒株人工感染SPF鸡，对采集咽喉棉拭子在不同条件下保存及药物治疗感染鸡后，对MG的分离培养和PCR检测结果的影响进行了探索。结果表明将咽喉棉拭子置于甘油PBS中于-20℃冷藏或将干咽喉棉拭子放入-20℃中保存，是最有效的保存方法。抗菌药物治疗感染鸡不仅影响MG的分离效果，同时也会降低RCR的检出率，从而影响MG临床诊断。  相似文献   

二温式PCR检测对虾传染性皮下和造血器官坏死病毒的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

庞耀珊  谢芝勋  邓显文  唐小飞  刘加波 《水利渔业》2007,27(1):94-95

根据对虾传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)基因序列,设计了1对可以扩增356 bp IHH-NV某段基因序列的特异性引物,优化建立了能快速检测IHHNV的二温式PCR。特异性试验和敏感性试验结果表明,该技术只对IHHNV DNA模板进行扩增,得到356 bp的DNA扩增片段,而对SPF南美白对虾组织DNA和其它对虾病原DNA/RNA的扩增结果为阴性;该技术最低能检测到10 pg的IHHNV感染对虾组织样品总DNA。应用该技术对400份对虾临床样品进行检测,结果有96份样品呈现阳性,表明该病在我国南方的养殖对虾中广泛存在,二温式PCR技术可以直接用于该病的临床快速检测和流行病学调查。  相似文献   

聚合酶链反应检测鉴别鸡毒霉形体强毒株和弱毒疫苗株的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

邓显文谢芝勋  唐小飞谢志勤  庞耀珊廖敏刘加波  何竟铭 《中国兽医科技》2003,33(9):7-11

根据鸡毒霉形体(MG)强毒株和弱毒疫苗株基因组结构特点，分别设计合成2对引物XZ1、XZ2和XZ45、XZ16，建立了可检测MG强、弱毒株的PCR方法。以引物XZ1、XZ2对MG强毒株和弱毒株进行的PCR，均可扩增出732bp的特异性片段；而以另1对引物XZ45、XZ46对MG弱毒株进行PCR，可扩增出524bp的特异性片段，但对鸡毒霉形体标准强毒株和野毒株的PCR，则扩增不出任何条带。特异性试验表明，这2对引物对其他种类鸡毒霉形体及其他对照禽病病原核酸模板的扩增均为阴性。敏感性试验结果显示，2对引物PCR均能检出100fg的MGDNA。研究结果表明，通过上述2对引物的2次PCR扩增，在数小时内即可鉴别出MG毒株是强毒株还是弱毒疫苗株。  相似文献   

11株新城疫病毒广西分离株P基因的克隆和序列分析     

刘加波  谢芝勋  唐小飞  庞耀珊  邓显文  谢志勤 《畜牧与兽医》2007,39(8):16-19

根据基因库的新城疫病毒(NDV)的磷蛋白(P)基因序列设计了1对特异性引物,应用RT-PCR技术对11个NDV广西分离株的P基因进行RT-PCR扩增和序列测定,P基因阅读框的核苷酸序列全长均为1188bp,编码395个氨基酸。核苷酸及氨基酸全序列比较分析,结果表明:11个NDV广西分离株与10个参考株的核苷酸序列同源性为81.2%～97.8%,氨基酸同源性为78.8%～97.0%。  相似文献   

禽呼肠孤病毒σ2基因的克隆和表达   总被引：3，自引：1，他引：3  

邓显文  谢芝勋  刘加波  庞耀珊  唐小飞 《中国兽医学报》2006,26(2):133-135

采用RT—PCR技术扩增禽呼肠孤病毒（ARV）S1133毒株和广西分离株R1的σ2基因。将σ2基因克隆至PGEX-4T-1载体上。测序结果表明，插入的片段为σ2目的基因。切下目的基因σ2重组到含有谷胱甘肽（GST）的融合蛋白质原核表达载体PGEX-4T-1，获得重组质粒。经PCR、酶切以及序列分析鉴定。表达σ2基因插入的位置、大小和读码框架均正确．表明成功构建了融合表达载体PGEX—S1133—σ2和PGEX—R1—σ2。构建好的重组质粒．在大肠杆菌JM109。中经1mmol／L IPTG诱导得到了表达。融合蛋白GST—σ2和GSTR1—σ2的相对分子质量为65100，以包涵体形式存在。Western—blot分析表明，融合蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应．表明该重组蛋白具有良好的反应原性。  相似文献   

多重PCR快速检测奶牛乳房炎3种主要病原体   总被引：10，自引：0，他引：10  

谢志勤  谢芝勋  唐小飞  刘加波  庞耀珊  邓显文  朱贤龙 《畜牧与兽医》2006,38(7):4-7

奶牛乳房炎是引起奶牛业经济损失的一种重要疫病,目前还没有快速、特异检测奶牛乳房炎主要致病原的方法。本试验根据金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌各自保守的16S或23S rRNA基因序列,合成了3对特异性引物,建立了三重PCR检测方法。特异性试验表明,该方法对所有参与测试的金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌都能扩增出各自的阳性条带,而对所有参与测试的对照菌株则不能扩增出任何条带。敏感性试验表明该方法能检测到4个菌的金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和2个菌的大肠杆菌。对送检的乳房炎奶样36份直接进行PCR检测,金黄色葡萄球菌阳性7份,无乳链球菌阳性2份,大肠杆菌阳性6份。  相似文献