嗜水气单胞菌重组Aer毒素的纯化和抗原性分析     

李莲瑞 卢强刘明远  付宝权孙树民郭恒  崔国祯 《云南农业大学学报(自然科学版)》2005,20(5):710-713,719

对原核表达的重组嗜水气单胞菌Aer毒素进行初步纯化,比较了它与天然Aer毒素的抗原性,为建立检测该毒素的免疫学方法奠定了基础。将原核表达的重组Aer毒素经SDS-PAGE后,切下目的蛋白,利用电洗脱法将蛋白洗脱出来,后经透析、PEG8000浓缩、定量,对獭兔进行免疫,采集血清,提纯IgG,在W estern b lotting试验中可与天然Aer毒素起反应,说明,体外表达的重组Aer毒素保留了天然Aer毒素所具有的抗原性。同时,将嗜水气单胞菌AHCS02菌接种于兔鲜血平板,30℃、培养15 h后,将具有β-溶血的单菌落于LB液体培养基中培养后,用饱和硫酸铵法提取上清液中的天然Aer毒素,用甲醛脱毒后,以同样免疫方法免疫獭兔,免疫结束后,采集血清提取IgG,在W estern b lotting试验中,可以检测到重组Aer毒素。试验说明:原核表达的重组Aer毒素和天然Aer毒素诱导獭兔产生的血清IgG抗体可以互相识别重组Aer毒素和天然Aer毒素,重组Aer毒素和天然Aer毒素有相似的抗原性。  相似文献   

印度的牛肉生产     

付太银  方雨彬  薛凌壮  齐树河  周磊  谭鹏飞  孙树民 《中国畜牧业》2019,(3)

正对于印度而言,牛肉生产是个特殊的话题。很多人会认为,牛在印度被尊为"神",是不能屠宰的,这种看法并不全面。实际上,印度大多数邦(省)禁止屠宰的是奶牛(cattle),而水牛(buffalo)是不被禁止的。一、印度有关政策规定在印度,包括奶牛屠宰在内的所有的农业政策,都是由各邦(联邦属地)、首都辖区自行制定。《印度宪法》第48条建议各邦(联邦属地)应考虑防止屠宰奶牛,但没有就这一问题制定具体可执行的法律或指示,因此不同邦(联邦属地)关于禁止屠宰奶牛的法制管理不完全相同。  相似文献   

旋毛虫新生幼虫期特异性基因N10的表达及鉴定     

高长玲  刘明远  郭恒  孙树民  付宝权  崔国祯  卢强  陈启军  P.Boireau 《中国兽医学报》2006,26(3):284-287

根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK—CMV—N10序列设计引物，利用PCR技术将基因N10的信号肤去除后，用T／A法克隆到pMD-18T载体，转化至大肠杆菌NovaBlue，经鉴定及序列测定，结果显示成功克隆到N10基因。将重组质粒pMD-18T—N10进行酶切后连接到原核表述载体pET-28a中，重组质粒经鉴定后转化大肠杆菌BL21star（DES），用IPTG诱导表达出与理论相符的融合蛋白，相对分子质量为38700，诱导4h的表达量占菌体总蛋白量的15％。从N10重组蛋白提取可溶性融合蛋白，对其生物学特性初步鉴定结果表明，具有类似脱氧核糖核酸酶Ⅱ的活性。  相似文献   

电针治疗犬脊髓损伤引起的瘫痪     

孟国才  孙树民 《中国动物保健》2008,(6):56-56

引起犬后肢瘫痪的原因多种多样，主要由暴力损伤骨髓而导致瘫痪或内科疾病的营养代谢病如缺乏VB1等病引起的。笔者共收治52例病犬。从病因分析可看出，49例是外伤性造成脊髓受损引起的瘫痪，占瘫痪总数的94．2％。采用电针治疗2疗程（6天为1疗程）后判定结果。  相似文献   

强电流电针治疗犬腰部脊髓损伤引起的截瘫     

孙树民  李迎军  包永梅  屈国卿 《养殖技术顾问》2008,(1):42-43

引起犬后肢截瘫的原因多种多样,主要由暴力损伤腰部脊髓而导致截瘫或内科疾病的营养代谢病如缺乏维生素B_1等病引起的。笔者在动物医院宠物门诊从事临床多年,共收治36例病犬。从病因分析可看出,34例是外伤性造成  相似文献   

松狮犬发生犬瘟热的临床治疗体会     

孙树民  ;李迎军  ;包永梅  ;屈国卿 《动物保健》2008,(1):50-50

犬瘟热是由犬瘟热病毒（CDV）引起的犬科、鼬科和熊科动物的一种高度接触性传染病，病死率30％～80％。犬瘟热病毒为副粘病毒科麻疹病毒属，呈圆形或不整形。直径为100～300nm，含有直径为15～17nm的螺旋状核衣壳，外覆一层双轮膜，膜上长1．3nm的纤突。发病率高，几乎可以达到100％，且临床症状多样，容易继发其他细菌、病毒的混合感染和二次感染，死亡率高，  相似文献   

B型超声波在犬常见疾病诊断中的应用     

王丽  姜鹏  孙树民 《动物保健》2009,(12):60-61

随着人民生活水平的不断提高和宠物饲养热潮的兴起，犬等宠物疾病也变得日益多样化和复杂化。而对于犬的一些疾病的诊断，长期以来缺乏较为直观、有效的手段，给犬疾病的诊断带来了很大的网准。20世纪60年代中期，开始应用的是A型和D型超声波。随着电子技术和电子丁业的发展，在20世纪70年代中期，随B型超声断层扫描仪的诞生．使得超声在动物医学界的应用得到了迅速的发展。  相似文献   

牛肉中阿苯达唑及其代谢产物残留的检测   总被引：2，自引：0，他引：2  

李慧萍  毕文岩  郭恒  刘娟  王学林  孙树民  刘明远 《中国奶牛》2011,(8):62-64

阿苯达唑是一种广谱抗蠕虫药,但是由于用药不当等原因,其在动物可食性组织中的残留可能刺激神经系统及消化系统、触发过敏反应甚至出现肝功能异常。本试验基于5μg/kg的检验限建立牛肉中的阿苯达唑及其代谢产物的检测方法——高效液相色谱法。样品中残留的阿苯达唑及其主要代谢产物阿苯达唑砜和阿苯达唑亚砜,经乙醚提取,乙腈和己烷萃取,由高效液相色谱（配紫外检测器）测定得到阿苯达唑及其亚砜与砜的平均回收率分别为71.8%～88.6%、78.1%～85.6%和83.1%～91.9%,变异系数分别为2.8%～9.2%、0.9%～4.9%和1.4%～4.8%。  相似文献   

嗜水气单胞菌重组Aer毒素的纯化和抗原性分析^*     

李莲瑞  卢强  刘明远  付宝权  韩文瑜  孙树民  郭恒  崔国祯 《云南农业大学学报(自然科学版)》2005,20(5):710-713

 对原核表达的重组嗜水气单胞菌Aer毒素进行初步纯化,比较了它与天然Aer毒素的抗原性,为建立检测该毒素的免疫学方法奠定了基础。将原核表达的重组Aer毒素经SDS-PAGE后,切下目的蛋白,利用电洗脱法将蛋白洗脱出来,后经透析、PEG8000浓缩、定量,对獭兔进行免疫,采集血清,提纯IgG,在Western blotting试验中可与天然Aer毒素起反应,说明,体外表达的重组Aer毒素保留了天然Aer毒素所具有的抗原性。同时,将嗜水气单胞菌AHCS02菌接种于兔鲜血平板,30 ℃、培养 15 h 后,将具有β-溶血的单菌落于LB液体培养基中培养后,用饱和硫酸铵法提取上清液中的天然Aer毒素,用甲醛脱毒后,以同样免疫方法免疫獭兔,免疫结束后,采集血清提取IgG,在Western blotting试验中,可以检测到重组Aer毒素。试验说明：原核表达的重组Aer毒素和天然Aer毒素诱导獭兔产生的血清IgG抗体可以互相识别重组Aer毒素和天然Aer毒素,重组Aer毒素和天然Aer毒素有相似的抗原性。  相似文献   

犬PD-1单克隆抗体的筛选与鉴定     

王卓  徐司雨  夏兴霞  李志敏  毕振威  钱晶  莫菲  诸玉梅  王永山  孙树民  谭业平 《中国兽药杂志》2024,58(5):10-16

为筛选犬程序性死亡受体1(cPD-1)单克隆抗体,以原核表达并纯化复性的cPD-1胞外区蛋白为靶抗原免疫BALB/c小鼠,应用单克隆抗体杂交瘤细胞技术和间接ELISA方法,经3轮轮筛选和克隆化,获得1株能稳定分泌抗cPD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F9。间接ELISA检测显示1F9杂交瘤细胞株连续传代培养能稳定分泌单克隆抗体,效价达到1∶2048,亚型鉴定重链为IgG1,轻链为κ;以HEK293细胞表达cPD-1胞外区蛋白为检测抗原,Western-blot和间接免疫荧光试验进行鉴定,结果显示1F9单克隆抗体能特异性结合cPD-1胞外区蛋白。本研究通过小鼠杂交瘤技术成功筛选到1株鼠源cPD-1单克隆抗体。  相似文献