旋毛虫属分类的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

崔国祯  王学林  刘明远  夏慧卿  邓洪宽  杨志东  孙磊  谭业平 《动物医学进展》2006,27(8):32-35

近年来,随着遗传学、生物学和生物化学的发展,已将旋毛虫属分为8个种和3个分类地位尚未定的基因型。文章就不同种和基因型的旋毛虫,分别具有的不同宿主、环境选择因素和世界性分布区域做一综述。  相似文献   

牛场布氏杆菌病的净化     

崔国祯  黄旭东  潘志忠  张英波 《吉林畜牧兽医》2005,(10):56-56

奶牛布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的一种人畜共患传染病，属于我国规定的二类动物疫病。布氏杆菌病严重危害着奶牛业的发展，其中奶牛是布氏杆菌病最易感动物，一旦在牛群中发生常引起奶牛场毁灭性打击。近年来随着奶牛业在全国各地的迅猛发展以及奶牛流通的增加，原在牧区流行的布氏杆菌病在内地也悄然上升。由于该病直接影响奶牛生产效益并危害人类健康，所以，有效地对该病进行防治和净化极为必要。现将奶牛场进行布氏杆菌病的防治与净化关键性措施概括如下，供广大同行参考。  相似文献   

鲤鱼IL8的克隆及序列分析^*     

李莲瑞  卢强  刘明远  崔国祯  韩文瑜 《云南农业大学学报(自然科学版)》2008,23(1):68-72

 利用DD-RTPCR（正常鲤鱼外周血白细胞和经有丝分裂源刺激后白细胞的总RNA）获得的差异显示片段B₁₀克隆（编码IL8的一段序列）,对该基因进行DIG标记,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从0.8×10⁴个重组噬菌体中,经过2轮筛选最终获得阳性克隆,挑选了3个分别命名为IL8-1,IL8-2,IL8-3。测序后经NCBI Blast分析表明,阳性克隆具有完整阅读框架,均为编码鲤鱼IL8的全长cDNA,编码的多肽由98个氨基酸残基组成,其相对分子质量理论推导值为 10 848.9 Da,等电点为8.68。且与2003年12月Dev Comp Immunol.杂志报道的荷兰鲤鱼氨基酸的同源性达84%。  相似文献   

奶牛皱胃变位发病机理研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

潘志忠  周昌芳  谢光洪  崔国祯  张英波 《动物医学进展》2005,26(11):42-45

近20年来,我国奶牛集约化饲养的规模在大中城市近郊地区迅速扩大,其皱胃变位的发病率也有明显增加。调查发现,平均有3.3%的奶牛会发生皱胃变位,产前3周到产后4周的围产期是发生此病的危险期。其中有85%表现为左方变位(left displace,LD),15%表现右方变位(right displace,RD)。文章从皱胃弛缓、机械性因素、胃壁损伤、某些营养物质缺乏、有毒物质慢性中毒、遗传因素及饲养管理等方面阐述了皱胃变位的可能发病原因及可能的发病机理,从而对该病的实验室检验指标进行描述和分析,以便建立系统的诊断思路。  相似文献   

嗜水气单胞菌重组Aer毒素的纯化和抗原性分析     

李莲瑞 卢强刘明远  付宝权孙树民郭恒  崔国祯 《云南农业大学学报(自然科学版)》2005,20(5):710-713,719

对原核表达的重组嗜水气单胞菌Aer毒素进行初步纯化,比较了它与天然Aer毒素的抗原性,为建立检测该毒素的免疫学方法奠定了基础。将原核表达的重组Aer毒素经SDS-PAGE后,切下目的蛋白,利用电洗脱法将蛋白洗脱出来,后经透析、PEG8000浓缩、定量,对獭兔进行免疫,采集血清,提纯IgG,在W estern b lotting试验中可与天然Aer毒素起反应,说明,体外表达的重组Aer毒素保留了天然Aer毒素所具有的抗原性。同时,将嗜水气单胞菌AHCS02菌接种于兔鲜血平板,30℃、培养15 h后,将具有β-溶血的单菌落于LB液体培养基中培养后,用饱和硫酸铵法提取上清液中的天然Aer毒素,用甲醛脱毒后,以同样免疫方法免疫獭兔,免疫结束后,采集血清提取IgG,在W estern b lotting试验中,可以检测到重组Aer毒素。试验说明:原核表达的重组Aer毒素和天然Aer毒素诱导獭兔产生的血清IgG抗体可以互相识别重组Aer毒素和天然Aer毒素,重组Aer毒素和天然Aer毒素有相似的抗原性。  相似文献   

旋毛虫新生幼虫期特异性基因N10的表达及鉴定     

高长玲  刘明远  郭恒  孙树民  付宝权  崔国祯  卢强  陈启军  P.Boireau 《中国兽医学报》2006,26(3):284-287

根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK—CMV—N10序列设计引物，利用PCR技术将基因N10的信号肤去除后，用T／A法克隆到pMD-18T载体，转化至大肠杆菌NovaBlue，经鉴定及序列测定，结果显示成功克隆到N10基因。将重组质粒pMD-18T—N10进行酶切后连接到原核表述载体pET-28a中，重组质粒经鉴定后转化大肠杆菌BL21star（DES），用IPTG诱导表达出与理论相符的融合蛋白，相对分子质量为38700，诱导4h的表达量占菌体总蛋白量的15％。从N10重组蛋白提取可溶性融合蛋白，对其生物学特性初步鉴定结果表明，具有类似脱氧核糖核酸酶Ⅱ的活性。  相似文献   

嗜水气单胞菌重组Aer毒素的纯化和抗原性分析^*     

李莲瑞  卢强  刘明远  付宝权  韩文瑜  孙树民  郭恒  崔国祯 《云南农业大学学报(自然科学版)》2005,20(5):710-713

 对原核表达的重组嗜水气单胞菌Aer毒素进行初步纯化,比较了它与天然Aer毒素的抗原性,为建立检测该毒素的免疫学方法奠定了基础。将原核表达的重组Aer毒素经SDS-PAGE后,切下目的蛋白,利用电洗脱法将蛋白洗脱出来,后经透析、PEG8000浓缩、定量,对獭兔进行免疫,采集血清,提纯IgG,在Western blotting试验中可与天然Aer毒素起反应,说明,体外表达的重组Aer毒素保留了天然Aer毒素所具有的抗原性。同时,将嗜水气单胞菌AHCS02菌接种于兔鲜血平板,30 ℃、培养 15 h 后,将具有β-溶血的单菌落于LB液体培养基中培养后,用饱和硫酸铵法提取上清液中的天然Aer毒素,用甲醛脱毒后,以同样免疫方法免疫獭兔,免疫结束后,采集血清提取IgG,在Western blotting试验中,可以检测到重组Aer毒素。试验说明：原核表达的重组Aer毒素和天然Aer毒素诱导獭兔产生的血清IgG抗体可以互相识别重组Aer毒素和天然Aer毒素,重组Aer毒素和天然Aer毒素有相似的抗原性。  相似文献   

鲤鱼外周血白细胞蛋白酶体激活因子PA28全长cDNA的克隆与差异表达分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

李莲瑞  卢强  付宝权  谭业平  邓洪宽  崔国祯  夏慧卿  刘明远  韩文瑜 《中国兽医学报》2006,26(5):544-547

对DD-RTPCR获得的差异显示片段C15进行地高辛标记后作为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从0.8×104个重组噬菌体中,经过2轮筛选获得阳性克隆DM7。测序分析表明,该阳性克隆长1 097 bp,具有完整的开放阅读框架,为编码鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28的全长cDNA,编码249个氨基酸,含有PA28的α和β亚单位功能结构域,与已报道的斑马鱼的蛋白酶体激活因子PA28的同源性达93%。分离鲤鱼外周血白细胞,经有丝分裂原在不同条件下刺激后,利用Trizol提取总RNA,根据得到的PA28全长cDNA序列和鲤鱼β-actin的序列,设计引物,采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定白细胞中PA28基因mRNA表达量的变化。结果表明,白细胞经LPS、ConA刺激后,PA28基因的mRNA表达量有所增加,但并不随时间的延长而持续增加。  相似文献