口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白αvβ6的细胞定位及组织分布     

赵建勇  常惠芸  独军政  高闪电  宋帅  伏小平  谢庆阁 《畜牧兽医学报》2009,40(4)

利用pcDNA3.1（＋）-β6p真核表达载体稳定转染CHOK1细胞,间接免疫荧光法（IFA）检测整联蛋白αvβ6在转染细胞中的表达分布。以间接免疫组化法（IHA）检测整联蛋白αvβ6在健康猪舌、唇、气管等组织的表达分布。采用抗猪源整联蛋白β6亚基的单克隆抗体作为一抗,FITC标记山羊抗小鼠IgG、辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG分别作为二抗。结果表明,pcDNA3.1（＋）-β6p真核表达载体稳定转染的CHOK1细胞的细胞膜及细胞质内可见致密的绿色荧光（IFA）,猪舌、唇、气管等组织细胞的细胞膜及细胞质内均出现了棕黄色的特异阳性反应物,表明整联蛋白αvβ6受体广泛分布于猪体的器官组织细胞中,为深入研究整联蛋白αvβ6在口蹄疫病毒感染过程中的作用奠定了基础。  相似文献   

抗原表位研究方法进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

宋帅  李春玲  贾爱卿  杨冬霞  李淼 《动物医学进展》2010,31(12)

抗原表位是抗原分子中的主要功能单位,能有效刺激机体的细胞免疫和体液免疫。随着免疫学和生物信息学技术的不断发展,用于研究T细胞表位和B细胞表位的方法得到了很大的提高。论文中概述了近几年用于研究T细胞表位的预测方法和鉴定方法,以及在B细胞表位研究中所用的表位肽扫描技术、蛋白质"切割"法、噬菌体展示技术、X-衍射与核磁共振、表位预测方法等技术,并对每种研究方法进行了比较,为从事抗原表位研究的人员提供参考,从而更有利于表位肽疫苗的研制和诊断方法的建立。  相似文献   

非洲猪瘟病毒LNA引物PCR检测方法的建立及优化     

李艳  张煜轩  楚品品  蒋智勇  席振军  蔡汝健  勾红潮  张昆丽  宋帅  卞志标  李春玲 《中国农学通报》2021,37(29):107-113

为了建立一种便捷、快速且精准的非洲猪瘟病毒的检测方法,本研究根据GenBank中公布的ASFV p72基因序列,设计了一对特异性引物,并对引物中的适当碱基进行锁核酸修饰,通过优化退火温度、引物浓度,建立了非洲猪瘟病毒的锁核酸修饰引物PCR检测方法。结果表明,该方法具有良好的敏感性和特异性,检测灵敏度可以达到3×10¹ copies/uL,比常规引物PCR方法的灵敏度提高了100倍,比real-time PCR方法的灵敏度提高了10倍,对猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒等病原基因组均无扩增,特异性良好。72份临床样品的检测结果与OIE推荐的qPCR方法检测结果一致,符合率为100%。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒的LNA引物PCR检测方法,方法的特异性强、敏感性高,操作简单,为非洲猪瘟病毒的检测提供了一种新的、更加敏感的检测技术。  相似文献   

广东地区发病猪群猪链球菌感染监测及药敏试验     

臧莹安  卢 《中国兽医杂志》2011,47(12)

本试验通过对广东部分地区发病猪群猪链球菌可疑菌进行分离细菌的形态观察、生化试验、PCR检测、动物试验等,综合判定:此20株分离菌均为猪链球菌.攻毒试验显示,攻毒后的小鼠,剖检病变明显.药敏试验结果表明,85％菌株对阿莫西林等药敏感,45％菌株对先锋霉素V、先锋霉素Ⅵ等中度敏感.85％以上的菌株对大环内酯类、磺胺类、氯霉素类、喹诺酮类、林可胺类和四环素类等不敏感.  相似文献   

非洲猪瘟病毒抗体化学发光检测方法的建立与应用     

向国庆  孙菁晗  宋帅  温肖会  吕殿红  贾春玲  牛瑞辉  顾有方  罗胜军 《中国畜牧兽医》2024,(4):1362-1371

【目的】建立一种特异性强、敏感度高、操作简捷、高通量的非洲猪瘟病毒(African swine fever, ASFV)抗体化学发光检测方法,用于早期监测ASFV的流行情况。【方法】本研究以羧基磁珠作为固相载体偶联ASFV重组p72蛋白,用适量的牛血清白蛋白(BSA)进行封闭,加入检测样品进行反应,以兔抗猪IgG-AP抗体作为酶标抗体,加入相应底物进行显色,优化各项反应条件,建立ASFV抗体化学发光检测方法,并对该方法的特异性、敏感度、重复性和检出率进行验证。【结果】建立的ASFV抗体化学发光检测方法蛋白与羧基磁珠偶联最适pH为7.0,最佳蛋白偶联浓度为5μg/mL,使用10%BSA溶液封闭效果最佳,反应磁珠终浓度为1.00 mg/mL,酶标二抗最佳工作稀释度为1∶40 000。同时该方法反应时间为30 min,血清稀释度为1∶512,敏感度高于商品化ASFV抗体ELISA检测试剂盒,与猪瘟病毒、A型口蹄疫病毒、O型口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒gE、猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性标准血清均无交叉反应。重复性试验中,批内变异系数为4.41%～8.70%,...  相似文献   

梁启超的新民思想再审视     

宋帅 《河北农机》2020,(3):91-93

梁启超的新民思想是中国近代哲学发展历程的重要贡献之一,也是梁启超为改变中国落后现状而采用的独具新颖的思想观念,无论是对中华民族的救亡图存还是中国的伟大复兴都有着不可磨灭的现实及借鉴意义.梁启超通过总结中国近代化进程中所遇到的问题,对中国国民劣根性进行了深刻的揭露与批判,从反思中寻求了新民的新途径.梁启超的新民思想内涵丰富,针对我国当前现状突出地强调了改造国民道德的必要性,这是对国家富强民族复兴之道的探索.  相似文献   

非洲猪瘟病毒锁核酸探针荧光定量PCR检测方法的建立     

李艳  郭怡德  勾红潮  卞志标  孙铭飞  蔡汝健  宋帅  蒋智勇  楚品品  徐民生  杨东霞  李春玲 《中国兽医学报》2021,(2):208-212,230

根据非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)P72基因核苷酸序列设计特异性引物和锁核酸(locked nucleic acid,LNA)-TaqMan探针,建立了基于P72基因的LNA-TaqMan探针的ASFV荧光定量PCR方法.结果显示,所建立的LNA-TaqMan探针荧光定量P...  相似文献   

一起黑山羊感染羊口疮和前后盘吸虫的诊断与防治     

黄元  八晓敏  宋帅  廖任如  王晓虎  陈晶  向华 《广东畜牧兽医科技》2021,46(1):30-32

羊口疮是由羊口疮病毒感染引起的一种急性接触性传染病,主要造成羊口唇、外阴、乳房等部位的水疱和溃疡.羊前后盘吸虫病是由于感染前后盘科吸虫而引发的一种寄生虫病,导致羊营养不良,贫血,甚至死亡.在广东某山羊养殖场发生羊口疮后,部分羊群发生顽固性下痢,颌下水肿,严重消瘦,粘膜苍白.对病羊痂皮研磨物提取总核酸进行PCR,结果表明...  相似文献   

螺旋式千斤顶的三维建模与分析     

杜明明  季雨停  刘琳丽  宋帅  许晚君 《南方农机》2017,(10)

文章运用SolidWorks对QLD10型螺旋式千斤顶各零件进行建模并装配,并利用Simulation对装配体进行了有限元分析,得到了千斤顶的应力、应变和位移云图,为千斤顶的三维建模设计与优化提供了参考。  相似文献   

青岛陆源排污口邻近海域异养细菌的组成与分布   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

刘霜  李永霞  刘旭东  崔正国  王亚楠  孙蓓蓓  宋帅 《渔业科学进展》2014,35(6):23-29

对青岛近海度假区、港口区、养殖区、工业区4类排污口邻近海域异养细菌的组成与分布进行了调查研究,采用海洋异养细菌平板涂布培养法分离细菌,基于16S rDNA的扩增性DNA限制性酶切片段分析(ARDRA)进行聚类筛选并测序鉴定。结果显示,青岛排污口邻近海域可异养培养的菌株分布于变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)4个细菌类群,变形菌门细菌数量占总测序数量的68%,其中γ-变形菌纲的数量在变形菌门中占88%;不同海域中细菌组成与分布有所不同,放线菌门和拟杆菌门的细菌种类较少且各海域分布有所不同,但γ-变形菌纲的弧菌属细菌(Vibrio sp.)在4类海域中均被发现,占总检测量的18.54%,其中溶藻胶弧菌(Vibrio alginolyticus)占弧菌总量的25%。不同海域也检测到V.parahaemolyticus、V.harveyi、V.campbellii、V.parahaemolyticus等水产养殖业的潜在致病菌。根据16S rDNA系统进化关系和细菌门类聚类分析得到的结论推断,工业区与养殖区海域的细菌组成和分布相似度较高,推断各海域的细菌组成与排污口类型有一定相关性。  相似文献