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为了建立适用于临床诊断的H1N1亚型猪流感病毒快速检测方法,本研究根据GenBank已登录的H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因序列设计RT-PCR扩增引物,以H1N1亚型猪流感病毒、H3N2亚型猪流感病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒为试验对照,通过优化RT-PCR反应条件和反应体系,建立了H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法。同时,运用H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法和本研究建立的方法对165份猪病料样品进行了对比验证。结果表明,本研究建立的H1N1亚型猪流感病毒双重RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、重复性,所扩增的目的基因片段大小分别为428 bp和678 bp左右,可检出最小基因组RNA浓度为2.9×10-5μg/μL。本研究建立的方法和H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法均从同一份猪肺脏样品中检测出H1N1亚型猪流感病毒,其余样品中均未检出H1N1亚型猪流感病毒,两种方法符合率为100%。本研究建立的方法适用于H1N1亚型猪流感病毒双基因定型检测,可在H1N1亚型猪流感病毒流行病学调查和临床诊断中应用。 相似文献
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【目的】建立一种特异性强、敏感度高、操作简捷、高通量的非洲猪瘟病毒(African swine fever, ASFV)抗体化学发光检测方法,用于早期监测ASFV的流行情况。【方法】本研究以羧基磁珠作为固相载体偶联ASFV重组p72蛋白,用适量的牛血清白蛋白(BSA)进行封闭,加入检测样品进行反应,以兔抗猪IgG-AP抗体作为酶标抗体,加入相应底物进行显色,优化各项反应条件,建立ASFV抗体化学发光检测方法,并对该方法的特异性、敏感度、重复性和检出率进行验证。【结果】建立的ASFV抗体化学发光检测方法蛋白与羧基磁珠偶联最适pH为7.0,最佳蛋白偶联浓度为5μg/mL,使用10%BSA溶液封闭效果最佳,反应磁珠终浓度为1.00 mg/mL,酶标二抗最佳工作稀释度为1∶40 000。同时该方法反应时间为30 min,血清稀释度为1∶512,敏感度高于商品化ASFV抗体ELISA检测试剂盒,与猪瘟病毒、A型口蹄疫病毒、O型口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒gE、猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性标准血清均无交叉反应。重复性试验中,批内变异系数为4.41%～8.70%,... 相似文献
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以驻芝11号为试验材料，对中早熟芝麻品种就地加代所需热量进行了全面分析，结果表明：芝麻全生育期长短，与温度呈正相关；播种至出苗日平均气温持续低于15℃时，不能正常出苗；18—26℃随着温度升高出苗速度加快，时间缩短；出苗至初花需要1000-1130℃积温，播期提前相应初花提前；5月下旬至8月下旬的日平均气温大于25℃最有利于芝麻生长发育；开花18d后种子发芽率可达90％以上，可以大田种植；加代繁殖措施是：4月20日播种，6月30日摘蒴；第二代7月5日播种，8月底打顶，促使种子充分成熟。 相似文献
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贾春玲 《畜牧兽医科技信息》2012,(12):58
随着冬季来临,气温不断降低,奶牛将转入舍内饲养,环境条件产生巨大变化,在适应新的环境条件的过程中,会引起奶牛的不适应.从而导致奶牛产奶量降低,转入全年最低的时期.同时,由于奶牛基础代谢消耗增加,加上奶牛冬季青绿草饲料缺乏,粗饲料干枯,营养低下,这时如果饲养管理不当极易造成奶产量下滑,影响奶牛的正常发育,甚至诱发各种疾病.因此,加强奶牛冬季饲养管理,显得尤为重要. 相似文献
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