鸡传染性喉气管炎病毒的分离与鉴定     

陈红英  张书松  崔保安  李新生  金钺  陈文 《中国兽医杂志》2007,43(12):36-37

鸡传染性喉气管炎(ILT)是由传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起鸡的一种急性上呼吸道传染病。主要危害成年鸡,常表现呼吸困难、气喘、咳出血样渗出物,产蛋鸡产蛋下降,发病率极高和较高的死亡率,给养鸡业带来严重的经济损失。该病自1925年由May等首次在美国罗德岛发现以来,已在世界上广泛流行。20世纪90年代在国内相继发生该病[1-2]。2005年3-4月河南省长葛、荥阳等地蛋鸡群相继突发以呼吸困难为主要症状的疾病,数日内发病率高达85%以上,死亡率近17%,产蛋率下降15%。剖检可见上呼吸道有多量黏性分泌物,有的含有血丝或血液,产蛋量下降27%,蛋形…  相似文献   

伪狂犬病病毒Min—A株gE基因的克隆及序列分析     

胡涛崔保安  王学斌杨明凡  张素梅王岩 《中国兽医科技》2003,33(8):15-19

参考GenBank中伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的序列设计了1对引物，对PRVMin—A株进行了PCR扩增，扩增产物克隆于pGEM—TEasy载体。对重组质粒进行限制性内切酶分析和基因测序，证实了克隆片段的可靠性。测序结果表明，目的片段包含1个1740bp的开放性阅读框(ORF)，编码由579个氨基酸组成的多肽。同源性分析表明，PRVMin—A株与PRVEa株、SH株PE基因的核菩酸同源性分别为99．2％、98．7％；推导氨基酸的同源性分别为98．6％、97．2％。  相似文献   

制菌灵KC931的研制与应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

崔保安  佗文举 《中国兽医科技》1994,24(7):29-31

  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征和猪流感复合RT-PCR方法的建立及应用     

柴春霞  夏平安  崔保安  张红英 《中国畜牧兽医》2008,35(3):97-99

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲型标准株（ATCC VR-2332）的部分ORF7保守序列、猪流感（SIV）A/Swine/HeNan/703/2001(H₃N₂)株的NP基因保守序列,设计合成了2对特异引物,分别扩增出大小为300和457 bp的特异性基因片段,通过优化RT PCR条件,最终建立了可同时检测PRRSV和SIV的复合RT-PCR诊断方法,该方法能检出约10 pg总RNA病毒。应用该方法分别对河南省不同地区送检的26头份病死猪的鼻腔分泌物、气管、血液、肺组织等进行检测,结果9头份PRRSV阳性,4头份SIV阳性,其中4头份SIV和PRRSV同时为阳性,其余猪为阴性,健康猪对照样品全部阴性。结果表明,PRRSV和SIV复合RT-PCR诊断方法具有高度特异性和敏感性,为在分子水平上对PRRSV、SIV的混合感染进行早期快速诊断提供了科学依据。  相似文献   

鸡白细胞介素-6的原核表达及其对疫苗免疫增强效果的研究   总被引：4，自引：1，他引：3  

谢彩华  闫若潜  崔保安  赵雪丽  吴志明  张志凌  张健 《中国预防兽医学报》2008,30(7)

本研究采用PCR技术,扩增、克隆了鸡白细胞介素-6（ChIL-6）成熟肽基因并进行原核表达,对表达的鸡白细胞介素-6组蛋白（rChIL-6）通过尿素变性、复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,经测定rChIL-6的促小鼠脾脏淋巴母细胞的增殖能力来评估重组蛋白的生物学活性;用4个不同浓度的rChIL-6在不同部位与NDV活疫苗、AIVH5N1灭活疫苗同时肌肉注射来评价其免疫增强作用。研究结果表明,表达rChIL-6为25ku左右,经纯化后的蛋白纯度在95%以上;100pg/mLrChIL-6注射组具有较高的促小鼠脾淋巴母细胞增殖活性;不同浓度的rChIL-6注射组对NDV和AIVH5N1疫苗都具有较好的免疫增强作用,但对其免疫抗体产生时间及抗体滴度峰值出现和维持时间均没有明显的影响,其中0.03μg/mLrChIL-6浓度注射组的对鸡疫苗的免疫增强作用最明显,过高或过低浓度的rChIL-6对疫苗免疫增强作用不显著。这些研究为新型免疫增强佐剂开发以及鸡免疫失败性疫病的预防和治疗奠定了基础。  相似文献   

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒河南分离株ORF3～7基因克隆与序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

尹彦涛  夏平安  崔保安  王建举  党占国  柴春霞  陈红英  李新生 《中国兽医学报》2008,28(5):496-500

参照GenBank中公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株ATCC VR2332的ORF3～7基因序列,利用Pri mer软件分别设计合成了针对PRRSV ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株分别扩增得到了大小约964、675、718、566和501 bp的片段,并将扩增的片段插入PGEM-T-easy载体进行测序。利用DNAStar软件进行序列分析表明,河南分离株Hn-1/06株属于美洲型,同时将Hn-1/06株ORF3～7基因的核苷酸序列和推导氨基酸序列与ATCC VR2332、LV、Resp、CH-1a、BJ-4、S1、CC-1、HB-1、JX0612、HUB1等分离株进行了同源性分析。  相似文献   

实时荧光定量PCR检测猪细小病毒     

李小康  崔保安  陈红英  魏战勇  郑兰兰  赵丽  吕晓丽 《中国兽医学报》2008,28(10)

根据已报道的猪细小病毒基因组序列,设计并合成了引物和探针,从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中提取DNA,经PCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌JM109,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行PCR和测序鉴定,表明目的片段已经成功克隆.将104～108拷贝反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,系统自动分析软件显示Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系.动力学曲线分析表明,在该反应体系和反应条件下,标准曲线的灵敏度为102拷贝.本方法的建立为猪细小病毒感染的早期诊断奠定了基础.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR诊断与防制     

郭显坡  吕晓丽  崔保安  陈红英  魏战勇  贾艳艳  王东方 《畜牧与兽医》2008,40(10)

2007年7月,周口市某猪场发生了一种以初产猪流产、死产为特征的疾病。根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR-2332ORF7基因序列设计1对特异性引物,提取流产胎儿的肺、肝等组织中的RNA,经RT-PCR扩增,检测PRRSV为阳性,结合病史和临床症状,诊断为猪繁殖与呼吸综合征。对该猪场采取综合防制措施,取得了较好的效果。  相似文献   

4种多糖对免疫雏鸡抗体效价和T淋巴细胞的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

邱妍  崔保安  胡元亮  张红英  王远阁 《南京农业大学学报》2008,31(1):77-81

450羽14日龄蛋公鸡随机均分成9组,用鸡新城疫-传染性支气管炎二联（NDV-IBV）弱毒苗首次免疫的同时,8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖、板蓝根多糖、牛膝多糖和山药多糖溶液,对照组注射生理盐水,每天1次,连续3d。28日龄用NDV-IBV灭活油乳苗再次免疫。各组分别于首次免疫后第7、14、21、28、35、42和49天随机抽取8羽翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制（HI）抗体效价;于首次免疫后第10、20、30、40和50天每组随机抽取5羽心脏采血,分离淋巴细胞,分别用MTT法和流式细胞仪双染色法测定淋巴细胞增殖和CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞含量的动态变化。结果表明,4种多糖均能显著提高新城疫HI抗体效价,促进外周血T淋巴细胞增殖,提高CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞含量和CD4^＋／CD8^＋值,低剂量的黄芪多糖和板蓝根多糖的效果最好。  相似文献   

海兰鸡白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵丽  崔保安  陈红英  宋凌云  方忠意  郑兰兰 《华南农业大学学报》2008,29(1):88-91

通过RT-PCR方法从用植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾脏淋巴细胞中扩增出海兰鸡白细胞介素18(IL-18)成熟蛋白基因的cDNA,并将其克隆到pGEM-T Easy Vector载体上, DNA序列测定表明, 克隆得到的海兰鸡ChIL-18 cDNA基因全序列包括终止密码子在内其编码区大小为510 bp,编码169个氨基酸多肽. 将该基因片段克隆到原核表达载体pQE30构建重组质粒pQE30-ChIL-18,转化大肠杆菌M15,并用IPTG 诱导. 重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子质量为19 000的重组蛋白.  相似文献