应用多重反转录—聚合酶链反应检测鸡新城疫病毒和传染？…     

谢芝勋  庞耀珊 《中国预防兽医学报》2000,22(2):126-130

本文建立了一种同时检测ＮＤＶ和ＩＢＶ二种病原体的多重ＰＣＲ。根据ＮＤＶ和ＩＢＶ的基因文库，设计了两对分别与ＮＤＶ与ＩＢＶ某段基因序列互补的引物，用这两对引物对同一样品ＮＤＶ和ＩＢＶＲＮＡ模板进行多重ＲＴ－ＣＰＲ扩增，结果均得到了两条特异性大步与实验设计相符的３１０ｂｐ和１７２０ｂｐ多重的ＲＴ－ＣＰＲ扩增带，而对其他６种禽病病原的ＰＣＲ扩增结果均为阴性，敏感性测定结果表明，该多重ＲＴ－ＰＣＲ技术能同  相似文献   

RT-PCR检测猪瘟病毒方法的建立与应用   总被引：7，自引：1，他引：6  

谢志勤  谢芝勋  廖敏  邓显文  庞耀珊  刘加波  唐小飞  何竞铭  唐翠英 《畜牧与兽医》2002,34(11):11-14

建立RT PCR检测猪瘟病毒的方法。根据已发表的猪瘟病毒E2基因 (囊膜糖蛋白gP55基因 )序列 ,设计合成了一对特异性引物 ,扩增片段的大小为 50 7bp ,用RT PCR技术对石门系标准株和 1 0株分离株进行检测。结果这对引物对标准株和 1 0株分离株均能扩增出与预期大小相符 50 7bpRT PCR产物 ,而对其他 6种猪病病原核酸的扩增结果为阴性。该RT PCR可检出 1 0 0pg的猪瘟病毒RNA模板 ,对人工感染猪不同组织样品进行检测 ,结果对白细胞抽提的核酸样品检出率最高为 1 0 0 % (2 4 / 2 4 ) ,其次为扁桃体、脾、肾 ,检出率为 83 3 % (2 0 / 2 4 ) ,再者为淋巴结 ,检出率为66 7% (1 6/ 2 4 )。对送检的 1 9份疑似猪瘟的病死猪病料组织进行RT PCR检测 ,结果有 1 6份样品为猪瘟病毒阳性。兔体交叉反应试验结果RT PCR阳性的 1 6份病料中 ,有 1 4份样品被判为含有猪瘟病毒 ,其他病料兔体交叉反应试验结果全为阴性  相似文献   

禽巴氏杆菌病B_(26)-T_(1200)弱毒疫苗保存期试验     

谢芝勋  刘加波  莫照兰  庞耀珊  谢志勤  许镇凤 《中国预防兽医学报》1993,(6)

禽巴氏杆菌病 B_(26)-T_(1200)弱毒疫苗在4～8℃温度环境下保存一年的10批苗,菌存率为76.7～93.3%,平均菌存率为86.4%;按瓶签头份稀释后免疫鸡,10批苗的保护率为75%～100%,总保护率为87.5%(37/40).本文就巴氏杆菌病 B_(26)-T_(1200)弱毒冻干苗在4℃～8℃的保存性能及免疫效力进行了试验,现将结果报告如下。  相似文献   

禽巴氏杆菌病B_(26)-T_(1200)弱毒疫苗对鸡的免疫产生期和免疫期试验     

谢芝勋  刘加波  莫照兰  庞耀珊  谢志勤  许镇凤 《中国预防兽医学报》1993,(6)

以禽巴氏杆菌病 B_(26)-T_(1200)弱毒疫苗免疫后8小时即能产生免疫力(1/5鸡得到保护);2～3天有3/5鸡获得保护;4～5天后能产生坚强免疫力(4/5～5/5保护).免疫后2、3、4和5个月的总保护率为83.3%(80/96);免疫后5个月,6批苗的平均保护率为75%(18/24).  相似文献   

应用PCR-RFLP分析鉴别广西鸡毒霉形体   总被引：1，自引：0，他引：1  

邓显文谢芝勋  谢志勤唐小飞  刘加波廖敏 庞耀珊 《中国兽医科技》2004,34(3):41-44

针对鸡毒霉形体(MG)16S和23SrRNA基因间的高变区序列设计合成了1对引物，对MG菌株进行了PCR扩增，获得了1条899bp的DNA片段，而其他禽病病原DNA无扩增。扩增产物经用限制性内切酶AfaⅠ和Dra Ⅰ进行酶切片段长度多态性分析，表明各MG菌株酶切图谱间均存在差异。  相似文献   

鸡毒支原体PCR检测试剂盒的研制与应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

谢芝勋  邓显文  唐小飞  谢志勤  庞耀珊  廖敏  刘加波  何竞铭 《畜牧与兽医》2004,36(1):3-5

根据基因库中鸡毒支原体 1 6SrRNA的序列研制PCR检测试剂盒 ,用于检测鸡毒支原体 (MG)。结果表明该MG PCR检测试剂盒对不同MG参考菌株和地方分离株均能特异性地扩增出 732bp条带 ,而对其他禽支原体和禽病病原体的扩增结果为阴性。该MG PCR试剂盒最低能检测出 1 0 0fg的MGDNA模板。保存期测定结果表明 ,该MG PCR试剂盒在 - 2 0℃条件下保存至 1 ,3 ,6和 9个月时 ,其敏感性无明显变化 ,仍能检测到 1 0 0fg至 1pg的MGDNA模板。保存至 1 2个月时其敏感度虽降低了 1个滴度 ,但仍能 1 0 0 %检出人工感染鸡的临床样品  相似文献   

鸡传染性贫血病毒广西株全基因组的克隆与序列分析     

邓显文  谢芝勋  谢丽基  刘加波  谢志勤  庞耀珊 《动物医学进展》2011,32(4):19-22

为了解鸡传染性贫血病毒(CIAV)广西分离株全基因变异情况,设计3对特异性引物,对CIAV广西分离株(GXC060821)的全基因进行PCR扩增、克隆和序列分析.结果显示,广西分离株的全基因为2 292个核苷酸,含有3个互相重叠的开放阅读框(ORF).序列分析表明,本CIAV分离株与国内外其他31个CIAV毒株比较核苷...  相似文献   

罗非鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定   总被引：16，自引：2，他引：16  

刘加波  谢芝勋  邓显文  唐小飞  庞耀珊  谢志勤 《水利渔业》2006,26(4):100-103

从广西某江网箱养鱼场的发病或濒死罗非鱼中分离到8株呈β溶血的革兰氏阴性杆菌,符合嗜水气单胞菌的特征,致病性试验结果显示8株分离菌均具有较强的致病性,均能致死小白鼠和罗非鱼,并都能产生较强的毒素致死小白鼠;8株分离菌对环丙沙星、氟哌酸、氯霉素、庆大霉素等高度敏感。  相似文献   

鸡滑液支原体LAMP快速可视化检测方法的建立简     

邓显文  谢芝勋  谢志勤  刘加波  庞耀珊  谢丽基  范晴  罗思思 《中国预防兽医学报》2014,(1):46-49

  相似文献   

H6亚型禽流感病毒套式 RT-PCR 检测方法的建立     

周辰瑜  谢芝勋  罗思思  刘加波  谢丽基  邓显文  谢志勤  范晴  庞耀珊 《动物医学进展》2014,(11)

为建立一种 H 6亚型禽流感病毒（AIV）的套式 RT-PCR检测方法,根据 GenBank 中 H 6亚型AIV HA 基因序列,设计了4条特异性引物,优化反应条件,并对所建立的方法进行特异性和敏感性的检验,用该法对154份活禽市场样品进行检测。结果表明,所建立的套式 RT-PCR 方法对其他常见禽病病原体无扩增;对 H6亚型 AIV 的最小检测限为1×102拷贝／μL,灵敏度比常规 RT-PCR 方法高100倍;154份样品的检测结果与病毒分离一致。所建立的 H6亚型 AIV 套式 RT-PCR 检测方法具有特异性强和灵敏度高的特点。  相似文献