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依据牛1.709卫星DNA序列设计了1对引物,建立了PCR鉴定生、熟牛肉的方法。应用本方法特异地扩增出预期的牛218bpDNA片段,其检测敏感度对生牛肉达33.6fgDNA,对熟牛肉和高压牛肉为0.32pg。运用该引物均可扩增出水牛、牦牛、奶牛、黄牛肉单一的相同大小的DNA条带,而对马、山羊、绵羊、骆驼、鹿、猪等15种动物肉的DNA扩增则呈阴性。扩增片段经HaeⅢ酶切分析确认,所得129、79、10bp片段与微机分析结果一致。利用本法对103份生、熟牛肉及其制品进行鉴定,检出率为100%。对各种样品检测,均可在6h内完成。 相似文献
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重组表达载体pET28a/DAB389(Gly4Ser)2-αMSH在BL21(DE3)中以可溶形式表达重组蛋白,依次通过硫酸铵盐析、离子交换层析、亲和层析纯化、脱盐得93.26%重组蛋白纯品;细胞活性测试结果表明,该重组毒素只对SP2/0、HeLa、A549、A375等4种癌细胞有杀伤作用,对DK、BHK正常细胞没有杀伤力;重组蛋白对SP2/0、HeLa、A549、A375细胞的IC50分别为:3.138、2.736、7.243、4.672 mg/L。 相似文献
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苏联1987~1988年共有8个李子新品种投入生产。科斯钦那纪念,又名十月李,系摩尔达维亚果树研究所以突雷·格拉斯与科罗列娃·维多利亚杂交育成的早实品种。根据格洛金斯克国家品种试验 相似文献
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抗隐孢子虫子孢子表膜单链抗体基因的克隆和核苷酸序列分析 总被引:5,自引:2,他引:3
应用RT-PCR技术,从分泌具有抗隐孢子虫子孢子表膜单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞3D6中扩增出抗体VH和VL基因,用linker(Gly4Ser)3基因,将VH和VL基因连接成ScFv基因,并将其克隆至pMD-18T载体中。经核苷酸序列分析证实,VH、VL基因和linker基因拼接正确,基因全长为720bp。经计算机分析,VH和VL基因均为新发现的基因序列,符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征。VH和VL基因分别属于鼠免疫球蛋白重链Ⅱ(A)和轻链κⅢ家族。 相似文献
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白银地区天然草地组成及其退化特征的调查分析 总被引:1,自引:0,他引:1
对白银地区天然草地植物区系组成、草地类型结构以及退化草地物种数、生活型构成、盖度、生物量等植被特征进行了系统调查与分析,研究了不同退化演替时期草地群落结构特征的空间变化规律.总结出该区有草地种子植物29科80属175种,天然草地7类;草地构成较单一,多为寡属(种)的科,且科分布集中,属、种分布分散.随草地退化程度的加剧,从初期到后期,高位芽植物最先消失,草地植物群落物种数和优势种密度急剧下降,群落盖度、豆/禾(生物量)比、鲜草产量与可食草产量百分数均呈逐渐下降趋势. 相似文献
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利用含有白喉毒素N端序列的基因作上游引物、含有αMSH全序列和(Gly4Ser)2互补序列的基因作下游引物,以pET28a/DAB389(Gly4Set)2EFG为模板,PCR扩增DAB389(Gly4Ser)2αMSH基因片段,用限制性内切酶EcoR Ⅰ和NcoⅠ酶切,并插入原核表达载体pET28a的相应位点,构建了重组表达载体pET28a/DABm(Gly4Ser)2αMSH,在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389(Gly4Ser)2αMSH,转化菌经IPTG、30C诱导5h,用SDS—PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果表明扩增的片段与理论值一致。重组质粒的DNA序列分析正确。SDS—PAGE表明,重组蛋白相对分子质量为45870,且表达量达菌体总蛋白量的29.2%。Western blot分析显示,重组蛋白能特异地与抗白喉抗体结合。成功构建表达了重组DABm(Gly4Ser)2αMSH的工程菌株,表达产物具有生物学活性。 相似文献
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<正> 1988年苏联将如下一些葡萄新品种投入生产。现简介如下: (穆罗麦茨) 系中央米丘林遗传实验室以北方与胜利杂交育成的极早熟鲜食品种,已在罗斯托夫省进行区域化栽培。该品种果穗大,圆锥形,中等紧密。果粒大,稍椭圆形,深紫色,果粉厚, 相似文献
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以克隆表达的B型肉毒毒素轻链蛋白(Bo NT/BL)为抗原,从噬菌体抗体库Tomlinson I+J筛选出得到活性高和特异性高的全人源单链抗体(Sc Fv),结合能够携带外源蛋白有效通过生物膜的小片段跨膜肽(TAT)制备跨膜单链抗体(TAT-Sc Fv)。经PCR后酶切,克隆到原核表达载体(p ET-28a-TAT)中,构建含有跨膜肽(TAT)的抗B型肉毒毒素胞内抗体融合蛋白,并在大肠杆菌中诱导表达,进行纯化工艺,对产物进行浓度纯度、亲和常数测定及生物活性研究。成功构建TAT-Sc Fv表达载体,融合蛋白相对分子量为32.7 k Da,主要以可溶形式表达,纯度也达到95%以上,胞内抗体中和B型肉毒毒素致病轻链得到TAT-Sc Fv的亲和常数为(1.133±0.273)×106L/mol,小鼠神经细胞乙酰胆碱定量测定实验证明胞内抗体具有较好的抗毒素活性。此结果为B型肉毒毒素治疗性胞内抗体的研制和肉毒中毒治疗奠定了基础。 相似文献
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