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猪链球菌通用型和2型双重荧光定量PCR快速检测技术的建立和应用 总被引:2,自引:0,他引:2
为快速区分检测猪链球菌血清型2型和其他血清型,以猪链球菌的保守基因gdh和2型特异性基因cps2J为靶基因设计引物和TaqMan探针,建立猪链球菌通用型和2型特异性的双重荧光定量PCR检测方法,并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示:本方法在1.5h内可完成猪链球菌和2型猪链球菌同时检测,与其他细菌无交叉反应;检测灵敏度可达5拷贝数,标准曲线相关系数大于0.999,批内和批间CV均小于1.25%。对67份临床样品检测显示猪链球菌和2型猪链球菌检出率分别为79.1%和35.8%,与常规PCR检测结果的符合率为92.5%和89.6%,kappa值为0.800和0.757,具有极好的一致性。成功建立了灵敏、特异和稳定的双重荧光定量PCR方法,实现了猪链球菌和2型猪链球菌同时及快速诊断。 相似文献
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6株副猪嗜血杆菌基因组DNA的PCR指纹图谱研究 总被引:1,自引:0,他引:1
根据肠道菌基因闻重复一致序列,设计了一对特异性引物,采用ERIC-PCR和RAPD技术,研究了副猪嗜血杆菌6个分离菌株的指纹图谱和DNA多态性。结果表明,6个分离株的PCR指纹图谱与15个标准血清型指纹图谱相比较可分辨出4种血清型;6个分离株的RAPD研究结果均表现出多态性。有意义的是,6个菌株的多态性DNA片段也能明显将其分为4种类型的副猪嗜血杆菌,与特异性引物PCR结果相一致。该研究可作为流行病学调查和该菌的分子分型快速诊断方法的基础。 相似文献
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对猪丹毒丝菌SpaA蛋白进行生物信息学分析,并对比了猪丹毒丝菌弱毒菌株和野生强毒菌株间的差异。结果显示,由于猪丹毒丝菌GC42的SpaA蛋白缺少一段含有80个氨基酸的序列,使得该菌株的蛋白质相对分子质量、氨基酸组成、二级和三级结构与强毒株的SpaA蛋白质相比均有所差异,导致这2株菌株引发机体产生的免疫原性和抗原性强弱有所不同,推测这2株菌株中,SG7菌株的免疫原性相对GC42较强;GC42菌株的抗原性相对SG7菌株的抗原性来说较弱,而猪丹毒丝菌GC42菌株的毒力相对猪丹毒丝菌SG7菌株较弱,因此呈现弱毒菌株特性;推测2株菌株的氨基酸序列均在193~206、217~231、290~309、313~327、328~376、386~457区段具有较高的形成B细胞表位的可能性。 相似文献
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本试验以红平菇粉、低筋面粉为主要原料,探索了红平菇粉蛋糕的生产工艺和品质。通过单因素和正交试验确定了面粉、白砂糖、鸡蛋、红平菇粉4个主要因素的用量,并对蛋糕生产过程中的搅蛋时间,蛋糊温度,加水量,烘烤温度等条件进行筛选。最终得出红平菇蛋糕的配方:面粉100%、红平菇4%、鸡蛋80%、水30%;蛋黄粉20%;蔗糖60%、蛋白糖0.05%~0.10%、木糖醇10%;疏松剂4.0%、柠檬酸0.9%、奶油0.35%、香兰素、0.15%。其工艺参数为:蛋糊温度40℃,搅蛋时间15~20min,烘烤温度185~205℃,烘烤时间23~19min。 相似文献