猫泛白细胞减少症病毒XJl-05株的分离及鉴定     

苏洁  姜骞  李慕瑶  王静  刘家森  司昌德  刘倪虹  曲连东 《黑龙江畜牧兽医》2008,(4)

猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia uirus,FPLV)属细小病毒科牛犬细小病毒属病毒,能够引起猫、狸、狐以及猫科多种珍贵野生保护动物发病,是猫科动物高度接触性、急性传染病.  相似文献   

靶向PB2基因的特异性siRNA抑制禽流感病毒(AIV)复制   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘丹  亓文宝  孟庆文  秦红刚  李文超  司昌德  刘家森  曲连东 《中国预防兽医学报》2008,30(4):245-249

根据siRNA设计原则,设计并合成5对靶向禽流感病毒（AIV）PB2基因的siRNA（PB2374,PB2665．PB2936,PB21031和PB21233）,将其转染MDCK细胞,分别于转染前和转染后感染H5N1禽流感病毒A／Goose／Guang dongl／96株;在转染后24h、48h和72h分别收集上清液;通过血凝试验（HA）和Real-timePCR检测siRNA抑制A1V增殖的效果。血凝试验结果表明：所设计的5对siRNA中,PB2374抑制AIV增殖的效率为68％～71％,PB2963抑制AIV增殖效率为78％～81％;Real-timePCR检测到PB2374转染组PB2基因的转录水平与对照组比较降低3～3．3倍,PB2963转染组PB2基因的转录水平降低3．9～4．2倍。无论siRNA是先于还是迟于AIV感染,这两对siRNA都能明显地抑制AIV的增殖;本研究结果为开发抗AIV治疗制剂和动物机体抗AIV研究奠定了基础。  相似文献   

Ⅰ型鸭肝炎病毒的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

张宇辉  甘一迪  刘家森  姜骞  司昌德  曲连东  黄鹤 《畜牧兽医科技信息》2008,(9)

鸭病毒性肝炎是鸭的五大传染病之一,由于近年鸭肝炎(Ⅰ型)发病率的不断上升,以及变异株的不断出现,养鸭比较集中的地区都遭受了巨大的经济损失和严重的威胁。随着病毒基因组的测序的完成,为该病毒的研究有了一些新的认识和思路。本文从病毒的流行病学、基因组结构和功能以及病毒的检测方法等方面,阐述了DHV-I的最新研究进展,为该病的防治提供理论基础。  相似文献   

猪、鸡与貂源肠外致病性大肠杆菌群型、耐药性与致病性分析     

许腾林  邢桂玲  姜成刚  刘家森  刘大飞  姜骞  李志杰  康洪涛  郭东春  曲连东 《中国预防兽医学报》2018,(5)

为检测不同动物源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的耐药及致病性差异,本研究从132份鸡、猪和水貂等动物肠道外组织中分离鉴定大肠杆菌,并对分离菌株进行了16S rRNA基因测序、毒力基因检测、药敏试验、O抗原鉴定、系统进化群分析及动物致病性试验。实验结果显示:分离出53株ExPEC,且至少携带特异性毒力基因pap、sfa/foc、afa/dra、iutA、kpsMTII中的两种基因,并携带fimH、ibeA、hlyA、malX、iss、iroN等其它相关毒力基因。53株ExPEC分离株对氯霉素、卡那霉素、头孢噻吩、四环素、多粘菌素B、氨苄青霉素等呈现不同程度的多重耐药性;O抗原主要分布于O1、O2、O8、O11、O38、O78、O120血清型;系统进化群分析结果显示:28株属于A群,19株属于B1群,1株为B2群,5株属于D群。选取20株ExPEC分离菌株按照6×10~6cfu/只对小鼠进行腹腔注射,验证其致病性;并测定ExPEC6、ExPEC42、ExPEC52、ExPEC53菌株对BALB/c小鼠的LD_(50),其结果分别为3.49×10~6cfu/mL、9.49×10~5cfu/mL、9.48×10~6cfu/mL、2.38×10~7cfu/mL。本研究为动物源性ExPEC的预防诊断提供依据,并为下一步研究其致病机理等奠定基础。  相似文献   

家兔穴位接种猪TGE苗后β-Ep与免疫动态形态学研究     

曲连东  褚桂芳  蔡虹  王继科  刘洪  孟宪松 《中国农业科学》1995,28(4):80-87

本试验用酶标组化法对穴位接种猪传染性胃肠炎（TGE）苗家兔外周血、脾、淋巴结的β-内啡肽（β-Ep）进行了动态定量和定位研究。外周血在穴位注苗后30分钟有一峰值,迅速下降后缓慢升高,第五天达第二个峰值,然后缓慢下降;脾和淋巴结仅在穴位注苗后第五天出现一个峰值。首次发现活化T细胞存在β-Ep阳性反应颗粒,而浆细胞不存在。同时对外周血、脾、淋巴结的T细胞,浆细胞进行了免疫形态学监测,活化T细胞和未成熟型浆细胞在穴位注苗后缓慢升高,第八天达高峰,后维持在峰值左右。本文还对穴位免疫机理进行了探讨。  相似文献   

增强型猫ω干扰素的筛选及抗病毒活性分析     

李茵  潘玉迪  田进  曲连东 《中国预防兽医学报》2022,(2):195-201,213

为获得增强型猫ω干扰素(FeIFN-ω),本研究通过分子对接方法预测和参考相关位点研究,设计3组定点突变引物.以pJET-FeIFN-ω为模板分别扩增FeIFN-ω基因及其3个突变基因(FeIFN-ω-R35L、FeIFN-ω-A156R、FeIFN-ω-T188R),并连接慢病毒载体pLVX-IRSE,构建重组质粒p...  相似文献   

经蓝舌病病毒云南株攻击绵羊的颊部超微病理学观察   总被引：1，自引：0，他引：1  

曲连东  褚桂芳 《中国畜禽传染病》1995,(5):50-52

用蓝舌病病毒云南株强毒攻击绵羊，对其颊部进行了超微病理学研究。结果表明，颊粘膜棘细胞层严重损伤，表现为棘细胞核浓缩，崩解，线粒体肿胀变圆，乃至破裂，粗面内质网扩张，脱颗粒，间桥断裂，形成大量空泡；固有层血管内皮细胞翘起，脱离基膜，内皮细胞内也可见大量空泡；在攻毒后期，固有层有嗜中性粒细胞，巨噬细胞和淋巴细胞浸润，成纤维细胞增生，胶原原纤维增多且排列紊乱。上述病理学变化说明，蓝舌病病毒云南株主要危害  相似文献   

鸭肝炎病毒Ⅰ型结构基因vp1的原核表达及其抗原性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

甘一迪  刘家森  姜骞  孟庆文  韩凌霞  司昌德  曲连东 《中国预防兽医学报》2008,30(8)

通过RT-PCR方法克隆出DHV-1：161／79／V结构蛋白vp1基因片段,将其克隆到pMD18-T载体中,测序结果为714bp。vp1经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,亚克隆到原核表达载体pET-32a（＋）,获得重组质粒pET—VP1,转入E．coli Rosetta-gami（DE3）pLysS,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果表明在大肠杆菌中表达了1个相对分子量约为47ku的融合蛋白（Trx-His—VP1）,将此融合蛋白用His-Ni^＋亲和层析法进行纯化。Westernblot分析表明,Trx-His-VP1能与DHV-1阳性血清发生特异性反应,说明表达的结构蛋白VP1具有良好的抗原性。  相似文献   

汉坦病毒L基因的分段克隆及原核表达     

李茂中  刘家森  郭东春  姜骞  林欢  曲连东 《中国预防兽医学报》2012,34(2):143-145

为原核表达汉坦病毒(HV)L蛋白,本研究根据HV 76-118株全长L基因序列分段设计合成了6对引物.通过RT-PCR方法分段扩增L基因的6个片段,分别克隆于原核表达载体pET-30a中,并转化到大肠杆菌BL21 (DE3)中进行表达.SDS-PAGE分析表明,获得与预期分子量一致的特异的目的蛋白.Western blot检测表明,重组蛋白与小鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应.  相似文献   

仙台病毒P基因的原核表达及抗原性分析     

蒋良丰  刘家森  司昌德  郭东春  姜骞  曲连东 《中国预防兽医学报》2009,31(3)

根据GenBank公布的仙台病毒(SeV)磷蛋白(P)基因序列,设计合成一对特异性引物,PCR扩增P基因,并将其克隆至原核表达载体pET-32a中;重组质粒经酶切、PCR及测序鉴定正确后.转化感受态细胞BL21(DE3)PlysS,经IPTG诱导表达,获得相对分子量为99.6 ku的融合蛋白.经western blot及ELISA分析表明表达的融合蛋白具有良好的抗原性.  相似文献