穴位接种IBD双价细胞苗鸡的抗原定位及免疫活性细胞监测     

曲连东  褚桂芳  王笑梅  王继科  刘洪  蔡虹  尹训南  孟宪松 《中国预防兽医学报》1997,(5)

１５日龄滨白鸡后海穴接种鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）双价细胞苗，采用免疫荧光组化跟踪抗原定位和免疫活性细胞的免疫形态学监测，以评价其免疫效果。同时与口服和肌肉免疫途径进行了对比试验。结果表明，后海穴穴位免疫优于口服免疫和肌肉免疫。本文对穴位免疫机制进行了探讨  相似文献   

家兔外周免疫器官β—内腓肽的免疫组织化学研究     

曲连东  褚桂芳 《中国畜禽传染病》1994,(6):22-24

采用荧光免疫组织化学方法，对家兔外周免疫器官β－内腓肽（β－Ｅｐ）进行定位研究。β－Ｅｐ阳性反应细胞存在于Ｔ淋巴细胞区，而Ｂ淋巴细胞区不存在。推测β－Ｅｐ对外周免疫器官调节作用是通过Ｔ淋巴细胞完成的。在Ｔ淋巴细胞区即有细胞膜上的β－Ｅｐ阳性细胞反应，又有细胞浆内β－Ｅｐ阳性细胞反应，说明β－Ｅｐ对免疫器官的调节作用可能存在反馈调节机制。  相似文献   

1型鸭疫里氏杆菌OmpA蛋白间接ELISA方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

孙  郭东春  刘家森  姜骞  司昌德  林欢  崔玉东  曲连东 《中国预防兽医学报》2011,33(8)

为建立检测1型鸭疫里氏杆菌(R.anatipestifer)的间接ELISA方法,本研究根据已发表的R.anatipestifer外膜蛋白A(ompA)基因序列(AF104937)设计引物,扩增1型R.anatipestifer HLG1株的ompA基因,构建重组质粒pHtb-ompA,转化大肠杆菌BL21(DE3),并利用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和western blot结果表明,表达蛋白约为55 ku,具有良好的抗原活性。以纯化的OmpA为包被抗原建立间接ELISA并对条件进行优化。建立的ELISA具有良好的特异性、敏感性;与HLG1株菌体裂解蛋白为抗原的间接ELISA比较,符合率为91.3%。本研究建立的ELISA方法为R.anatipestifer的流行病学调查和SPF鸭的监测提供了快速、特异的血清学诊断方法。  相似文献   

多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备     

张爱芹  郭东春  刘家森  原冬伟  姜骞  林欢  崔玉东  曲连东 《动物医学进展》2013,34(1):6-10

为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体,通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51-17株purF基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,构建重组表达质粒pHT-PurF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,获得重组蛋白分子质量约56.5ku,主要以包涵体形式存在;Western blot检测表明,表达的蛋白可与多杀性巴氏杆菌制备的高免血清发生特异性反应。将制备的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测血清抗体效价,结果显示制备的多克隆抗体滴度达到1∶128 000,Western blot表明可与多杀性巴氏杆菌PurF蛋白发生反应。本研究制备了多杀性巴氏杆菌的PurF蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究PurF蛋白在多杀性巴氏杆菌致病中的作用奠定了基础。  相似文献   

鸭疫里默氏菌的分离鉴定及其对SPF鸭的致病性研究     

帕提古丽·吾马尔  郭东春  张爱芹  刘家森  原冬伟  姜骞  林欢  曲连东 《中国预防兽医学报》2013,(2):117-120

为研究鸭疫里默氏菌(RA)对SPF鸭的致病性,本实验室从不同省份疑似RA感染鸭场分离到4株细菌,经菌落形态观察、染色镜检、生化鉴定确定为RA。药敏试验表明这4个分离株对嗯诺沙星、氧氟沙星和先锋霉素V相对敏感,但对卡那霉素和庆大霉素均耐药。外膜蛋白A(OmpA)基因的克隆测序结果显示,4个RA分离株的ompA基因全长均为1 164 bp,编码387个氨基酸;核苷酸同源性为89%～100%。将5×108cfu的HLG1分离株经颈部皮下接种SPF鸭,病死SPF鸭的心、肝、脾、肺、脑和肾具有典型的病变。RA的分离鉴定技术为SPF鸭群RA的检测和监测以及为培育和净化SPF鸭作为RA的致病机理和疫苗研究中的实验动物模型奠定了基础。  相似文献   

幼驹红球菌性肺炎     

白丽鸽  司昌德  薛飞  曲连东 《畜牧兽医科技信息》2006,(2):8-10

幼驹红球菌性肺炎是由马红球菌引起幼驹的一种以化脓性支气管肺炎为特征的传染病。过去曾长时间称其为马棒状杆菌感染(Corynebacterium equi infection)或幼驹化脓性肺炎(Suppurative pneum onia in young foal)。由于1984年《伯杰氏系统细菌学手册》已将本菌改称为马红球菌,而且这种感染主要表现为化脓性支气管肺炎及其有关淋巴结严重化脓浸润,故今已改称为幼驹红球菌性肺炎。1923年M agnusson首次从一例患脓毒症的马驹分离出本菌,后来印度、澳大利亚和美国也先后报道了这种病菌所致的感染。自从马体分离出本菌后,已从多种陆栖和水栖动物…  相似文献   

犬瘟热病毒A株核衣壳蛋白基因的克隆、表达及特性分析   总被引：8，自引：3，他引：8  

周洁  李昌文  张洪英  陈洪岩  李建伟  曲连东 《中国预防兽医学报》2006,28(4):485-488

根据GenBank中A75／14株犬瘟热病毒（CDV）核衣壳蛋白（N）基因的核苷酸序列设计合成一对引物，经RT-PCRgA病毒总RNA中扩增出1600bp的N基因，将其克隆于pMD18-T载体对其进行序列分析。结果表明A株CDV与其它毒株N基因序列的同源性较高。将N基因定向克隆于原核表达栽体pPROEXX^TM HT，用重组质粒pPROEX^TM HT-N转化感受态E．coli DH5a细胞，用IPTG于37℃诱导表达了分子量约63Ku的重组N蛋白，占菌体总蛋白18％。经Western blot分析证实所表达的重组N蛋白具反应活性，将表达产物用ProBond^TM纯化试剂盒进行了纯化。用所获得的重组蛋白免疫家兔制备的多克隆抗体可与CDV全病毒发生特异性反应，经琼扩试验测定其效价为1：16。本实验为下一步用重组N蛋白作为诊断用抗原，建立特异的CDV抗体检测方法奠定了基础。  相似文献   

无特定病原体京白鸡的G带和C带研究     

高鹏飞  曲连东  关云涛  韩凌霞 《中国畜牧兽医》2006,33(8):43-45

作者以无特定病原体京白鸡为研究对象,采用骨髓法制备染色体标本,进行了G-带和C-带分析。G-带结果表明,前8对大型染色体可分为29个区、61条深带,共139条带。C-带结果表明,整条W染色体深染,而大型染色体的带型随细胞周期不同而不同。  相似文献   

猫泛白细胞减少症病毒XJI-05株的分离及鉴定     

苏洁  姜骞  李慕瑶  王静  刘家森  司昌德  刘倪虹  曲连东 《黑龙江畜牧兽医》2008,(4):65-67

猫泛白细胞减少症病毒（Feline panleukopenia vi-rus,FPLV）属细小病毒科牛犬细小病毒属病毒,能够引起猫、狸、狐以及猫科多种珍贵野生保护动物发病,是猫科动物高度接触性、急性传染病。FPLV是目前本属病毒中感染范围较宽、致病性较强的一种,感染幼猫后致死率达90％以上。  相似文献   

猫泛白细胞减少症病毒的遗传变异   总被引：1，自引：0，他引：1  

苏洁  姜骞  刘家森  曲连东 《黑龙江畜牧兽医》2008,(7)

猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV)是细小病毒科细小病毒亚科牛犬细小病毒属成员.19世纪初首次发现FPIV,但感染对象只限于猫和小鼠,且病毒对感染动物的致死率不高.  相似文献