猪环曲病毒N基因的克隆及生物信息学分析     

周桐枫  周璐  周远成  刘小琬  徐志文  朱玲  郭万柱 《中国兽医学报》2015,35(6):845-850

为研究猪环曲病毒(PToV)N蛋白的生物信息学特征,运用RT-PCR技术扩增猪环曲病毒N基因,测序并对其进行生物信息学分析。结果成功获得了492bp的PToV N基因(GenBank登录号为KM036209)。经生物信息学分析,此序列编码163个氨基酸,理论等电点(pI)为12.14,理论分子质量为18 695.5u,不稳定系数为77.47;不同密码子对同一氨基酸选择上呈现一定的偏嗜性;最大疏水指数为1.589,最小疏水指数为-3.533;无信号肽和跨膜区;抗原表位主要位于N末端和C末端。预测其可能包含4个N-糖基化作用位点,2个蛋白激酶C磷酸化作用位点、1个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点、1个N-豆蔻酰化位点。进化树分析结果显示,KM036209与韩国株和上海株亲缘关系很接近,与荷兰及西班牙株不属于同一分支。  相似文献   

基因重组猪生长激素对不同杂交肥育猪组织中IGF-ImRNA和IGF-I影响的研究     

熊文中  杨凤  郭万柱  周安国 《动物营养学报》2000,(3)

选用长雅和长约去势公猪各12头 ,按2×2因子设计 ,每头每天分别注射基因重组猪生长激素4mg或0mg28天 ,测定生长激素对组织中IGF -ImRNA和IGF -I的影响。结果表明 ,基因重组猪生长激素分别提高长雅和长约去势公猪血浆和半腱肌中IGF -ImRNA含量53.38 %～97.50 %和40.47 %～106.79 % ;分别提高血浆和半腱肌中IGF -I含量44.21 %～72.04 %和56.03 %～58.32 %。血浆与肌肉中IGF -ImRNA、IGF -I具有显著的正相关关系。外源生长激素对肌肉中IGF -ImRNA和IGF -I的影响 ,具有显著的杂交类型效应  相似文献   

伪狂犬病病毒Fa株gE基因的克隆与序列的比较分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

王勤  郭万柱  徐志文  汪铭书  王小玉 《畜牧兽医学报》2003,34(4):389-393

根据已发表的伪狂犬病病毒（PRV）的基因序列,设计合成一对引物PCL1和PCL2,以PRV Fa株的DNA为模板成功地扩增得到预期的长约1.7kb的特异片段,经本科切鉴定,初步确定为gE基因。将扩增产物经Kpn Ⅰ、EcoRⅠ消化形成粘末端克隆到pUC18质粒,得到了明显大于载体的重组质粒PpgE。重组质粒PpgE经本科切鉴定为含有PRV的gE基因,测序PpgE得到完整的gE基因片段,并与4株不同来源的毒株进行了比较分析。5毒株的gE同源性比较分析发现毒株间同源性最低也高达97%,这体现了gE基因的保守性。分析还表明Fa与TNL同源。同时99%的高同源性也显示Fa、Ea、SH可能是同一毒株。gE序列在1040-1410碱基的高同源性区域作为PRV的PCR检测或作为PRV的PCR检测或作为核酸探针是非常重要的。  相似文献   

猪伪狂犬病基因缺失活疫苗(SA215)免疫母猪后仔猪母源抗体消长规律及首免日龄   总被引：4，自引：0，他引：4  

朱玲  郭万柱  徐志文 《中国兽医学报》2004,24(4):320-322

在研究猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 (SA 2 15 )免疫接种母猪所产仔猪母源抗体消长规律 ,并绘制其消长曲线的基础上 ,确定了仔猪首免日龄。对免疫母猪所产仔猪于不同日龄进行抗体检测结果表明 ,全部仔猪均获得了高水平母源抗体 ,7日龄高达 2 8.56 ,6 0日龄降至 2 2 .56 ;随着日龄增长 ,抗体水平呈逐渐降低趋势 ,2次大幅下降出现在 14～ 2 1日龄、30～ 6 0日龄。对免疫母猪所产仔猪分别于不同日龄免疫接种 1头份剂量疫苗 (SA2 15 ) ,7d后采血进行抗体检测 ,结果表明 ,7日龄、14日龄、2 1日龄免疫接种仔猪均未引起明显抗体水平升高 ,反而较同期仔猪略有降低 ,30日龄和 6 0日龄免疫接种仔猪则出现了抗体水平的升高 ,其中以 6 0日龄仔猪升高幅度为大。结合母源抗体消长规律 ,确定猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 (SA2 15 )免疫母猪所产仔猪的首免日龄为 30日龄  相似文献   

疥螨与疥螨病研究进展   总被引：8，自引：1，他引：8  

曾智勇  杨光友  梁海英 《中国兽医杂志》2004,40(11):36-39

疥螨病通常是指由疥螨科、疥螨属的疥螨(Sarcoptes scabiei)寄生于人和其他哺乳动物皮肤表皮内，引起称为疥疮(又称疥癣、癞病)的一种顽固、接触性、传染性皮肤病，其以剧痒、结痂、脱毛和皮肤增厚为特征。1698年意大利的两位学者首次对疥螨病进行了说明和描述；然而，直到200年后疥螨  相似文献   

的发生及防制对策非典型猪瘟     

徐志文  郭万柱  石谦  阳爱国 《四川畜牧兽医》2005,(2)

1发病特点非典型猪瘟或温和型猪瘟的临床症状均不典型,病理剖检无特征性,发病随时间和地点的不同,其症状及发病特点亦不同。1.1流行特点流行形式以散发为主,有时有地方性流行,同窝仔猪只是个别发病而不是整窝发病,流行速度缓慢。发病幼龄化,虽然各年龄猪均有发病但30～40日龄仔猪多发,临床上哺乳仔猪发病的病例较多。发病率不高,潜伏期和病程较长,死亡率较低。1.2临床症状典型性猪瘟常表现为急性经过、高热稽留、死亡率高,小血管壁变性引起全身广泛性出血、梗死,皮肤黏膜发绀,先期便秘后期下痢。而非典型猪瘟则缺乏典型临床症状,极少见到皮…  相似文献   

含绿色荧光蛋白基因的猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒的构建   总被引：6，自引：2，他引：6  

罗燕  郭万柱  徐志文  刘艳丽  殷华平  王新  王小玉  苟琳 《畜牧兽医学报》2005,36(10):1064-1068

将扩增得到的PPV SC-1株VP2基因产物插入转移载体质粒pPI-2．EGFP中，构建了含PPV VP2基因及其EGFP报告基因的PRV基因缺失表达载体质粒pPI-2．EGFP．VP2。采用磷酸钙转染系统，将pPI-2．EGFP．VP2 DNA和PRV DNA共转染Vero细胞后通过直接荧光观察、Dot-blot核酸杂交筛选得到几株重组病毒，将其中一株（命名为SA215-B）DNA用BamHI酶切和Southern转印杂交进一步验证重组病毒构建成功，并通过SDS-PAGE电泳和Western免疫印迹检测表明PPV VP2基因在重组病毒内获得表达，产生大小约93ku的融合蛋白，同时融合蛋白中的PPV VP2结构蛋白仍然保持了原有的反应原性，表明成功构建了含绿色荧光蛋白基因的猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒。  相似文献   

日本脑炎病毒及其疫苗的研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

汤德元  郭万柱 《中国兽医学报》2005,25(2):217-221

乙型脑炎病毒又称日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV)，简称乙脑病毒，属于黄病毒科(Flaviridae)黄病毒属。由乙脑病毒引起的疾病乙型脑炎(简称乙脑)是严重威胁人畜健康的一种中枢神经系统的急性传染病。以蚊为媒介而传播，以高热和狂暴或沉郁等神经症状为特征。具有明显的季节性和一定的地理分布区，多发生于蚊虫较多的夏秋季节，属于自然疫源性疾病，病毒通常在蚊-猪-蚊等动物间循环。猪被认为是JEV最重要的自然增殖动物。怀孕母猪感染后导致流产和死胎，公猪感染后睾丸有急性炎症反应。  相似文献   

伪狂犬病病毒免疫及免疫逃逸的几种策略     

岳玉红  郭万柱  韩国全  林华 《黑龙江畜牧兽医》2008,(9)

伪狂犬病(pseudorabies,PR)又称aujeszky,是由疱疹病毒科(herpesviridae)α-疱疹病毒亚科伪狂犬病病毒(PRV)引起的多种家畜、家禽和野生动物的以发热、奇痒(除猪外)、繁殖障碍及脑脊髓炎为主要症状的一种急性传染病.猪是本病的原发感染宿主,又是病毒的长期储存和排毒者.PRV-旦感染猪将在其体内处于长期潜伏状态.为了很好地根除PRV的感染,国内外针对PRV的免疫及免疫逃逸策略进行了深人研究,为PRV疫苗的研制和防疫提供有力的理论依据.  相似文献   

ORF3基因缺失对猪圆环病毒Ⅱ型感染复制能力的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨晓农  郭万柱  徐志文  王新  殷华平  王小玉  龙虎 《中国兽医学报》2008,28(9)

设计1对特异性引物AF-P1/AF-P2,从疑似PCV2感染的病料中扩增获得1 767 bp的PCV2全基因组(命名为PCV2-CD),克隆至pMD18-T Simple载体构建重组质粒pTS-PCV2-CD.序列分析表明:PCV2-CD与GenBank中公布的12个PCV2毒株间的同源性高达95.0%～100%.用Nco Ⅰ酶切pTS-PCV2-CD获得4 459 bp线性目的DNA片段,补平CATG 4个碱基、连接环化构建ORF3基因插入缺失重组质粒pTS-PCV2-CD-C并测序.用Sac Ⅱ酶切pTS-PCV2-CD-C.回收1 771 bp线性目的片段,体外连接环化构建了ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C.PCR-RFLP检测表明,在脂质体转染法转染mPCV2-C、培养并盲传4代的IBRS-2细胞中(PCVl阴性),特异性检测到mPCV2-C的DNA;电镜观察发现,在盲传6代的IBRS-2细胞胞核内观察到突变毒株的病毒颗粒.试验结果表明:ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C具有感染性,能够在IBRS-2细胞中复制增殖,证实ORF3基因不是PCV2复制的必需基因.  相似文献