猪细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ作为免疫增强剂和新型基因工程疫苗的研究     

王洪光  汤德元  李春燕  曾智勇  罗险峰  甘振磊  刘建  郝飞 《猪业科学》2014,(1):99-101

通过综述猪IL-2、IL-4和IFN-γ的基因结构、作为免疫佐剂和作为构建新型基因工程疫苗方面研究进展,以了解细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ的相关研究成果,为细胞因子进行更深入的研究提供参考。  相似文献   

贵州白香猪白细胞介素4全基因的克隆与序列分析     

梁海英  曾智勇  王伟丞  汤德元  刘钊 《猪业科学》2014,(12):125-127

为获得贵州白香猪白细胞介素4的基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,应用RT-PCR技术扩增全长猪白细胞介素4(Interleukin-4,IL-4)基因,并克隆到pM D18-T Simple Vector载体后测序。测序结果表明:IL-4基因的ORF为402 bp,可编码133个氨基酸,其中前24个为信号肽序列,后109个氨基酸为成熟肽,具有3个潜在的N-糖基化位点;贵州白香猪除与AF493991(99.4%),L12991(98.1%)氨基酸一致性相对较低外,与其他猪源IL-4基因氨基酸一致性均为100%,而与其他种属动物的IL-4基因氨基酸一致性则较低,为37.2%~82.7%。  相似文献   

中草药添加剂对关岭黄牛生长及免疫功能的影响     

李达  汤德元  李春燕  曾智勇  刘建  郝飞  王洪光 《贵州农业科学》2014,(10)

为探明中草药添加剂对牛增重及免疫功能的影响,选取贵州关岭黄牛15头,随机分为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组和试验Ⅳ组,每组3头,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ～Ⅳ组分别在基础日粮中添加首乌、黄芪等12味中草药添加剂3％、4％、5％和6％,试验期29 d;试验前和试验后分别空腹称重,计算日增重、料肉比,并采集血样检测血常规指标、免疫球蛋白（IgG、IgA 和 IgM）含量变化。结果表明：在基础日粮中添加不同比例的中草药添加剂对关岭黄牛的增重均有促进作用,能提高大未染色细胞数和单核细胞百分率以及 IgG、IgM 和 IgA 的水平,降低中性粒细胞百分率和血小板平均体积。中药添加剂具有促进关岭黄牛增重、增强免疫功能的作用,其中以添加5％的比例最佳。  相似文献   

猪细小病毒VLPs供外源蛋白插入的候选位点发现及其重组PCV2-ORF2的病毒样颗粒构建   总被引：2，自引：0，他引：2  

朱玲  郭万柱  蒋清蓉  徐志文  熊丁杰  张博  王印  赵玲 《农业生物技术学报》2010,18(3):431-436

先将猪细小病毒(PPV)SC-1株VP2基因扩增产物克隆到pMD18-T载体构建质粒pMD-VP2;设计两对引物(分别引入Hind Ⅲ和Sac Ⅰ两个酶切位点)扩增猪圆环病毒二型(PCV2)SC株ORF2基因,构建了pMD-ORF2.A和pMD-ORF2.B两质粒;经相应内切酶酶切后回收目的片段,插入PPV SC-1株VP2基因的Hind Ⅲ和Sac Ⅰ两个特异限制酶切位点处(分别对应于PPV VP2蛋白N端和C端1/3处),得到重组质粒pPVP2-ORF2.A和pPVP2-ORF2.B.经鉴定后的质粒pPVP2-ORF2.A和pPVP2-ORF2.B用Kpn Ⅰ、BamH Ⅰ和ApaL Ⅰ三酶切,回收含VP2和ORF2基因的目的片段克隆至真核表达载体(pEGFP-C1),得到重组质粒pEGFP.VO.A和pEGFP.VO.B.脂质体法转染重组质粒于Cos7细胞后,采用荧光显微镜和电镜观察基因表达情况,结果仅在转染pEGFP.VO.A的样品中观察到了病毒样颗粒(VLPs).纯化VLPs免疫小鼠,结果显不能产生较好的细胞免疫和针对PPV和PCV2的特异性体液免疫,该结果表明研究中获得了PCV VP1-PCV2ORF2重组VLPs,同时也揭示PPV VPLs的N端1/3适于外源蛋白插入构建重组VLPs  相似文献   

应用ABC－ELISA和SPA－ELISA检测狂犬病疫苗免疫犬后血清中的抗体水平     

郭万柱  曹军  孔树全  冯炳芳  蒋文灿 《四川农业大学学报》1994,(2)

本文报道应用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ和ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测狂犬病疫苗免疫犬后血清中抗体的效价，比较研究了两种方法的特异性，敏感性和重复性，结果显示两种方法均适用于检测狂犬病血清抗体水平。ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ较ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ敏感性高４倍，前者的阳性检出率（１００％）高于后者（９２．８％）。  相似文献   

猪圆环病毒2型的致病机理和疫苗研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

陈杨  徐志文  郭万柱  陈弟诗 《安徽农业科学》2007,35(18):5439-5441

为了深入了解猪圆环病毒2型的致病机理和疫苗研究进展,介绍了猪圆环病毒2型感染引起猪免疫系统的损伤过程,其他病原对该过程的促进和诱导作用,刺激免疫系统影响病毒复制和临床病例发生,综述了有关疫苗研究情况。国内外在猪圆环病毒2型的致病机理和疫苗研究进展上有很多相关研究报道,可供借鉴。研究为探讨运用疫苗途径来预防控制该病的发生提供了依据。  相似文献   

狂犬病（HEP／BHK_（21））活疫苗免疫期试验     

郭万柱  陈代荣 《四川农业大学学报》1994,12(2):293-297

应用效价为１０（－４．５０）ＭＩＣＬＤ（５０）／０．０３ｍｌ的狂犬病ＨＥＰ／ＢＨＫ（２１）活毒疫苗免疫犬后，对免疫前和免疫后１、３、６、１２、３０个月血样进行了血清学评价和免疫原性分析。１５只犬免疫１月后，血清抗体全部阳转，６６％的犬在３０个月后抗体仍维持在一个较高水平。免疫１年后９０％以上的动物能够得到保护。统计表明，不同地区、不同性别、不同年龄的犬免疫反应无显著差异，但三月龄以下犬反应欠佳。  相似文献   

联合肌注猪IL2真核质粒对PPV VP2-PCV2 ORF2核酸疫苗免疫效果的影响     

朱玲  郭万柱  徐凯  王印  陈燕凌  唐玉香 《中国兽医学报》2011,31(2)

将猪IL2基因和PPV VP2基因、PCV2 ORF2截短基因克隆至真核表达载体pCI-neo,构建了重组质粒pCI-ORF2-VP2和pCI-IL2,用脂质体介导法将pCI-ORF2-VP2质粒转染PK15细胞,采用间接免疫荧光法检测在体外的表达情况。并以小鼠为动物模型,将pCI-IL2和pCI-ORF2-VP2质粒联合肌注免疫小鼠,相同剂量免疫2次,间隔2周,同时设立pCI-ORF2-VP2、pCI空载体、猪细小灭活苗、圆环亚单位苗对照,检测免疫小鼠脾脏淋巴细胞的转化功能,外周血T淋巴细胞亚群的动态变化及血清抗体的滴度。结果显示,pCI-ORF2-VP2在PK15细胞中能正常表达,联合免疫组在第28天能够检测到PPV和PCV2抗体,第21~42天诱导淋巴细胞转化和CD4+、CD8+细胞的数量高于或显著高于pCI-ORF2-VP2质粒组。结果表明,猪IL2质粒联合肌注可以提高VP2/ORF2核酸疫苗的免疫效果。  相似文献   

融合表达猪圆环病毒2型ORF1和ORF2基因真核质粒的构建及对小鼠的免疫原性   总被引：2，自引：0，他引：2  

史小红  徐志文  郭万柱  朱玲  年阳阳  古峰  李凤琴 《中国兽医学报》2011,31(9)

用PCR法扩增出猪圆环病毒2型的Rep蛋白基因（933bp）和Cap蛋白基因（705bp）,将其定向克隆于真核表达载体pcDNA3.1（＋）的多克隆位点上,构建真核表达质粒pcDNA-ORF1-ORF2。将构建好的重组质粒pcD-NA-ORF1-ORF2按100μg/只腿部肌肉注射BALB/c小白鼠,同时设pcDNA-ORF1、pcDNA-ORF2、pcDNA3.1-（＋）、PCV2全毒疫苗和PBS为对照,共免疫2次,间隔2周。分别于首免后第0、7、14、21、28、42天用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖效应,用ELISA法检测小鼠的抗体水平;并于首免后第0、7、14、21、28天测定脾淋巴细胞中各细胞亚群的比例,对该核酸疫苗的免疫原性进行初步评价。结果显示,重组质粒能诱导鼠体产生较强的细胞免疫和体液免疫,并从免疫后第7天起所测各组数据均显著高于（P〈0.05）或极显著高于（P〈0.01）其他试验组。结果表明,将ORF1和ORF2基因共同用于PCV2核酸疫苗的研发具有很好的前景,为研究新型猪圆环病毒疫苗奠定了基础。  相似文献   

猪口蹄疫疫苗的研究进展及其应用   总被引：2，自引：2，他引：0  

易悦  王利娜  徐志文  郭万柱  朱玲  韩国全 《猪业科学》2011,28(2):44-48

口蹄疫号称畜牧业的"头号杀手",传染性极强,传播途径广泛,给世界经济和社会发展带来巨大的危害.目前接种疫苗是预防口蹄疫的有效手段之一,安全有效的疫苗是成功预防、控制口蹄疫的首要条件.口蹄疫疫苗的研制经历了弱毒疫苗、灭活疫苗到新型疫苗的探索过程.就口蹄疫疫苗的研究现状及其应用做一综述,以期为疫苗的合理应用提供技术帮助.  相似文献