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PRV闽A株Bam HI片段克隆及其第7片段的鉴定 总被引:4,自引:2,他引:2
用鸟枪法将PRV闽A株的BamHI酶切片断克隆到pBR322质粒中,再经抗性筛选、酶切鉴定和菌落原位杂交,证实已克隆了PRV闽A株14个BamHI酶切片段中的12个,从而构建了其基因文库,通过Southern转印杂交和酶切图谱分析鉴定了重组质粒pPR128,其插入片段含量包含了PRV闽A株糖蛋白gp50基因在内的BamHI-7片段,核酸长约6.8kb。 相似文献
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猪瘟是危害养猪业的烈性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为16种A类法定动物传染病之一。随着分子生物学研究的不断发展,人们对猪瘟病毒的基因结构、基因功能、检测手段、野毒和疫苗毒的鉴别以及疫苗预防方法有了更深入的认识。文章就猪瘟基因的结构特点、E0和E2基因的功能和变异的研究等方面进行了综述,以期对我国猪瘟病毒基因及其基因变异的研究提供一定依据,同时结合本实验室建立的对猪瘟病毒野毒和疫苗毒建立的二重PCR鉴别诊断和猪瘟净化方案的研究进行了综述,以期为猪瘟防治及净化方案的制定提供一定的参考。 相似文献
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该研究通过RT-PCR扩增乙型脑炎病毒分离株PrM/E基因测序后,将测序结果与GenBanK发表的JEV SA14基因序列和SA14-14-2进行比较分析,结果发现分离株与JEV SA14强毒株的同源性为98.1%,与SA1-14-2株的同源性为97.1%;在477-2477长为2 000 nt决定JEV抗源性的PrM/E区中.分离株与SA14株仅有40个碱基不同,其中12个碱基为错义突变,导致E基因2个氨基酸序列(E135和E232)与SA14的E区两个氨基酸的不同;而分离株与SA14-14-2株有48个碱基不同,导致E基因12个氨基酸序列与SA14-14-2不同.由于确定JEV毒性的10个关键性基酸的位置均在E蛋白上,分离株与SA14强毒株这10个氨基酸的位置完全一致,因此序列的比较结果表明;乙脑病毒分离株为强毒株.由此可以看出基因分析对于病毒毒力的判断具有重要参考意义. 相似文献
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为了查明贵州省遵义市某猪场保育猪发生腹泻、咳喘、消瘦死亡的原因,试验采用PCR/RTPCR技术对送检样品分别进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪圆环病毒3型(PCV-3)的检测,并对PCR产物进行了测序分析。结果表明:送检的发病保育猪为PCV-3和PCV-2双重感染,序列分析显示该PCV-2毒株全长1 767 bp,属于PCV-2d型,且PCV-2 ORF2编码的氨基酸与疫苗株DBN-SX07-2同源性最高(94.2%)、与LG株同源性最低(91.8%);获得的PCV-3序列大小为649 bp,属PCV-3c型,与PCV-3/KU-1609毒株核苷酸同源性最高(99.2%),与PCV-3-China/GD2016毒株核苷酸同源性最低(96.4%),遗传进化关系相对复杂;抗原表位分析发现,PCV-3毒株有多个核苷酸位点突变,但变异位点均不在预测的抗原表位中。说明在贵州省不仅有PCV-3的流行,还有PCV-3和PCV-2混合感染现象的存在。 相似文献
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