小麦亚硝酸还原酶基因及调控序列克隆、定位和表达分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

佘茂云  陈朵朵  冯晨  杜丽璞  叶兴国 《作物学报》2011,37(1):28-39

利用in silico及反向PCR技术, 从小麦中克隆了亚硝酸还原酶编码基因及其调控序列, 进一步利用原核诱导表达、半定量RT-PCR、AS-PCR及生物信息学手段对克隆的新基因进行鉴定及染色体定位分析。开放阅读框预测结合测序结果表明, 该基因gDNA长2 881 bp, 包含4个外显子和3个内含子, cDNA长1 830 bp, GenBank登录号分别为FJ555239和FJ527909, 预测编码产物大小约为65.7 kD, 与NCBI已公布的亚硝酸还原酶基因编码产物同源性达60%以上, 其中与其他单子叶谷类作物同源性达80%以上。IPCR技术延伸该基因5′端侧翼序列至-2 924 bp (以ATG起始计算), 经1 mmol L^-1 IPTG诱导后可表达大小约为70 kD的蛋白(含约3.8 kD的组氨酸标签)。RT-PCR结果显示, 30 mmol L^-1 KNO₃处理小麦幼苗1 h, 亚硝酸还原酶基因表达量最高。酶活性测定表明, 随着KNO₃处理时间延长亚硝酸还原酶活性增强。AS-PCR检测发现, 该基因在普通小麦6A及6B染色体上至少各存在1个拷贝。  相似文献   

中间偃麦草SGT1基因的克隆及其抗病功能的分析     

王凯  杜丽璞  张增艳  廖勇  徐惠君  姚乌兰  黄璜  杨昆  辛志勇 《作物学报》2008,34(3):520-525

为了探索中间偃麦草SGT1基因在小麦抗病反应中的应用潜力,采用RT-PCR和RACE方法克隆出中间偃麦草SGT1基因,命名为TiSGT1。该基因编码蛋白具有SGT1蛋白典型的功能域结构,与大麦SGT1序列高度同源。通过基因重组技术构建了TiSGT1的高效组成型表达载体,通过基因枪法将该载体转化到小麦品种扬麦12基因组中。对转基因植株PCR、Southern杂交与RT-PCR分析表明,TiSGT1基因可在T0、T1和T2代转基因小麦中遗传和表达。黄矮病、白粉病抗性鉴定结果表明,SGT1的超量表达可以提高小麦对黄矮病、白粉病的抗性,TiSGT1可以作为小麦广谱抗病性改良的潜在基因资源。  相似文献   

农杆菌敏感小麦基因型的筛选研究   总被引：9，自引：3，他引：6  

王艳丽叶兴国  刘艳鹏杜丽璞 徐惠君 《麦类作物学报》2005,25(6):6-10

基因型是影响农杆菌转化植物的主要因素之一,筛选对农杆菌敏感的小麦基因型对于进一步提高小麦转化效率具有重要意义.利用c58C1农杆菌菌系（含GUS基因）感染不同小麦品种的幼穗和幼胚,共培养后进行X-Gluc组织化学染色检测,以筛选对农杆菌敏感的小麦基因型.结果表明,83个小麦基因型的幼穗经农杆菌感染后,GUS基因表达率66.7%～82.8%,CA9924、北农49、西农2611、京冬11等基因型对农杆菌感染比较敏感,多数基因型对农杆菌感染不敏感.80个小麦基因型的幼胚经农杆菌感染后,GUS基因表达率在10.0%以上的基因型仅占3.8%,没有GUS基因表达的基因型多达71.3%,绝大多数基因型对农杆菌感染不敏感;当幼胚与农杆菌的共培养在滤纸上进行时,97H2169、轮选208、兰考906、扬麦6号等基因型对农杆菌感染非常敏感,GUS基因表达率达到50.0%～93.3%,没有GUS基因表达的基因型下降到36.8%.表明不同小麦基因型以及相同基因型的不同外植体对农杆菌的敏感性存在着显著差异,兰考906、扬麦6号、西农2611、京冬11等基因型是农杆菌转化小麦较为理想的受体材料;滤纸上共培养方式更有利于农杆菌对小麦外植体的侵染,GUS基因表达率平均比固体培养基共培养方式高16.6个百分点.  相似文献   

过表达香樟CcCBFb的烟草非生物胁迫抗性增强     

张佳佳  朱逢玲  焦晓琳  李勇鹏  王建格  周婵  杜丽 《园艺学报》2017,44(7):1397-1404

为探究香樟Cc CBFb基因增强植株非生物胁迫抗性的功能,通过农杆菌介导法将该基因转入烟草中,经PCR和半定量RT-PCR技术鉴定阳性转基因株系后,对获得的T1代转基因无性系(T2和T4株系)以及野生型(WT)进行干旱(0、150、300和450 mmol·L~(-1)的甘露醇)、高盐(0、100、200和300 mmol·L~(-1)的Na Cl)、4℃低温、–4℃冰冻胁迫处理,结果显示:转基因烟草在干旱和高盐胁迫下,幼苗的存活率均高于野生型;经4℃低温处理后,转基因烟草植株的脯氨酸和可溶性糖含量均显著高于野生型植株,而丙二醛(MDA)含量均低于野生型植株;经–4℃的冰冻处理6 h后,野生型和转基因T4株系植株叶片均出现不同程度的萎蔫,而转基因T2株系植株未出现不良现象。由此可见,过表达CcCBFb基因不但能够增强烟草的抗旱和抗盐性,而且能够显著增强抗寒性。  相似文献   

森林资源保护和森林防火工作的思考     

杜丽 《现代农业科技》2020,(11)

随着社会经济的不断发展,森林资源在今天的需求量越来越大,这也让林区的管理工作变得更加重要。森林资源不仅能够为社会提供经济效益,还能够对环境起到生态调节的作用。因此,无论从哪一个方向上考量,森林资源的保护和利用都是十分重要的事情。同时,林区最易发生的灾害就是火灾,因此,想要利用好、保护好森林资源,森林防火的工作也必不可少。本文中,笔者就自身的工作经验来谈一谈森林资源的保护以及森林防火工作的相关问题。  相似文献   

哈溪自然保护站森林保护和经营措施探讨     

杜丽 《农业与技术》2019,(17)

本文通过对哈溪自然保护站地理位置、土壤、气候、水文和森林资源起源、树种、龄组等资源现状的分析,提出了森林保护和经营措施。  相似文献   

大数据背景下经济学类专业大学生创新创业五位融合模式探究     

赵青  刘伟  杜丽  周鹏  刘战合 《南方农机》2021,(3)

在大数据高等学校创新创业教育改革背景下,高校更加关注培养现代大学生的创新精神和创新能力。本文从创新创业"五位融合"(指创业正能量培育、创业指导服务、创业政策扶持、创新创业教育、创业基地建设)教学理念视角下,以郑州航空工业管理学院(以下简称郑州航院)为例,分析郑州航院经济学类专业目前专业人才情况,建设"创新创业五位融合"实践教学体系,构建虚拟仿真实践平台及宏观经济学省级精品课程。通过实践分析,在该教育体系下,更充分调动了学生的主动性,鼓励学生大胆探索,敢于思考,将理论课程与实践课程的知识理论和方法内化为学生的知识体系和创新思维过程,提升人才培养质量。文章从经济学类专业嵌入创新创业理念的模式与路径、行业特色"双创"教育培养体系构建与达成度评价等方面,对郑州航院进一步打造"创新创业五位融合"实践教学体系提出相应建议,以期为郑州航院进一步培养创新创业型人才提供助力。  相似文献   

专业图书馆资产清查工作的组织与实践     

朱昱  温瑞智  代志勇  杜丽萍  杨青 《农业图书情报学刊》2014,(1):94-96

结合专业图书馆资产清查工作的实践,探讨了在图书资料资产清查工作中,通过精心组织、严格要求,采取科学的方法使资产清查工作顺利完成的做法和措施。  相似文献   

羊源雷氏普罗威斯登菌的分离鉴定     

曹瑞勇  聂鑫  李国华  杜丽  王凤阳 《现代畜牧兽医》2018,(6)

为了分离鉴定海南某养殖场黑山羊流鼻液、打喷嚏这一临床症状可能的致病菌,试验通过对病羊鼻拭子的无菌采集、病原菌分离培养后,利用革兰氏染色、细菌生化反应、细菌16S r RNA通用引物进行PCR反应等方法对分离得到的菌株进行鉴定。结果表明:对病羊鼻拭子培养后,得到的菌落形态一致;通过染色发现该菌为短杆状革兰氏阴性菌,进一步鉴定该菌为雷氏普罗威登斯菌。可引起海南黑山羊呼吸道疾病,为相应疾病的诊断和治疗奠基了一定的基础。  相似文献   

盐胁迫对三樱椒种子萌发及幼苗生长的影响     

杨建伟  刘征  杜丽  庞发虎  武彩琴 《江苏农业科学》2012,(2):120-122

三樱椒是河南省南阳市主要经济作物之一。对三樱椒种子进行30～300 mmol/L NaCl溶液处理,测定其种子萌发率、生长及光合速率变化。结果表明,在30～60 mmol/L NaCl轻度胁迫下,有利于三樱椒种子萌发。随着NaCl胁迫浓度提高,三樱椒种子萌发率显著下降,萌发时间推迟;在0～90 mmol/L NaCl浓度范围内,三樱椒生长、生物量积累及净光合速率差异不显著。综合各项指标显示,在90 mmol/L NaCl浓度以下,三樱椒的生长及生存受影响不大,NaCl浓度超过180 mmol/L时,三樱椒种子发芽率和幼苗的生长均受到显著抑制。  相似文献