不同影响因素对水牛原始生殖细胞分离培养的影响     

黄奔  李童  石德顺  王晓丽  杨素芳  农微  汪博 《中国兽医学报》2008,28(5):592-595

探讨了不同影响因素(性别、胎龄、分离方法)对水牛原始生殖细胞(PGCs)分离培养的影响.结果显示:PGCs多层堆积生长形成克隆,该克隆具有明显的边界与饲养层区分;PGCs表达AKP和OCT-4;公胎牛组的克隆总数和克隆直径都显著高于母胎牛组,(179和32,(227.76±83.84)μm和(102.34±40.59)μm),P<0.05;在原代克隆数目上,80～90 d组只有16个克隆,显著低于其他各组(P<0.05),在克隆直径上,80～90 d组为(190.63±65.11)μm,也显著低于除70～80 d组外的其他各组(P<0.05),并且在最高传代数上,80～90 d组仅为3代,而其他各组都达到或超过了6代;机械分离组在克隆总数和直径上都显著高于胰酶消化组,(186和30,(216.95±77.41)μm和(140:t=38.76)μm),P<0.05,并且机械分离组的最高传代数为8代,而酶消化组仅为3代.结果表明,本试验分离培养出的水牛PGCs具有与已经分离培养出来的其他物种PGCs相似的生物学特性;公胎牛、胎龄小于80 d以及使用机械分离方法更利于水牛PGCs的分离培养.  相似文献   

猪胚胎体外培养影响因素的研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

吴正三  朱云干  杨素芳  陆凤花  石德顺 《畜牧与兽医》2010,42(7)

以孤雌激活胚胎为研究对象,对猪胚胎体外培养过程中的相关影响因素进行了探讨。体外成熟的猪卵母细胞经孤雌激活后,用添加0.5%牛血清蛋白(BSA)的NCSU-23(北卡罗来纳州立大学-23)培养基培养的囊胚率(36.7%)极显著高于添加5%、10%和15%胎牛血清(FCS)的NCSU-23(11.8%,18.5%和10.3%,P0.01)。在NCSU-23中添加一定比例的TCM-199(10%,25%和50%),虽然对猪卵母细胞孤雌激活后的分裂率无显著影响(89.6%vs87.0%,83.4%和82.6%,P0.05),但囊胚发育率随着TCM-199比例的增加而显著下降(30.1%vs25.0%,11.1%和1.1%,P0.05)。结果表明:培养液中添加BSA的猪胚胎体外培养效果优于添加FCS;猪胚胎的体外培养不需要成分复杂的培养液。  相似文献   

本土扦插育苗专用土壤处理剂开发及应用试验     

曾建明  杨素娟  虞富莲 《中国茶叶》2001,23(4):6-8

短穗扦插是一种应用最广泛的茶树良种繁育方法,其重要技术之一是苗床铺设不含或含有少量有机质和微生物的红壤或黄壤心土,为插穗发根提供良好的根际环境.但由于心土需求量大,铺心土用工多且劳动强度高,因此心土资源短缺和用工成本高已成为短穗扦插中迫切需要解决的实际问题.近年来,笔者模拟传统育苗方法中心土的功能研制了4种具有对土壤消毒、促进插穗生根和抑制杂草滋生三重功效的土壤处理剂配方,进行本土扦插育苗试验,并从中筛选出一种具有广泛适用性的配方(暂名为"旺苗")应用于多个茶树品种的本土扦插育苗.现将有关试验结果介绍如下.  相似文献   

液相微萃取技术在农药残留分析中的应用研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

王素利  杨素萍  刘丰茂  薛佳莹  尤祥伟 《农药学学报》2012,14(5):461-474

液相微萃取技术(LPME)是一种新型的样品前处理方法,具有快速、简单、廉价、选择性强、准确度高、溶剂消耗量少、环境污染小等优点,方便与各种分析仪器联用。其具有多种模式:单滴液相微萃取(SDME)、中空纤维液相微萃取(HF-LPME)、分散液相微萃取(DLLME)、悬浮固化液微萃取(SFODME)、连续流动微萃取(CFME)、直接悬挂液滴微萃取(DSDME)等,具有很好的研究潜力和应用前景。对液相微萃取技术在农药残留分析中的应用研究进展进行了综述。  相似文献   

中西结合治疗牛子宫脱和阴道脱     

汪一平  杨素娟  颜红军  胡前进 《河南畜牧兽医(综合版)》2005,26(8):25-26

笔者自1998年3月份以来,按照西医“调节神经功能”采用“补糖、补钙、补充维生素”的方法和中医“劳者温之,损者益之”的治疗原则以及“脏腑辨症、八纲辨证”的道理,根据具体情况采用“补中益气”的方法,共试治各种类型的子宫脱和阴道脱病牛88例,治愈率达95%以上,取得了满意的治疗效果。1治疗原则的制定1.1根据直接原因:胎儿过大,胎水过多,多胎怀孕,产前截瘫、骨软症或努责过度或难产助产时强拉硬拽等皆可使阴道及子宫周围组织弛缓,引起该病。治疗宜促进子宫收缩,尽快促使子宫复旧(即恢复到空怀时的状态)。1.2根据临床症状:病牛横卧、努责不…  相似文献   

气相色谱法测定硅烷中的杂质氢     

张伟  杨素萍  刘海平 《河北北方学院学报(自然科学版)》1999,(1)

本文提出了用气相色谱法采用反吹系统测定硅烷中杂质氢的一种新方法,克服了硅烷对检测器的污染,方法快速、简单,检出限为2.4ppm。  相似文献   

动物蛋白饲料中动物源性成分的鉴别1.同一PCR鉴别动物蛋白饲料中牛羊成分   总被引：5，自引：1，他引：4  

朱绍智  黄新民  薄清如  周志江  杨素  高彦生  赵君  徐海聂  潘文波  陈德镁  兰乃洪  冯家望  陈静静 《中国兽医学报》2003,23(3):289-291

为了防止牛海绵状脑病(俗称疯牛病)和羊痒病传入我国,对来自疫区国家的动物源性饲料进行动物种类鉴别非常必要.本研究根据牛羊特异性卫星DNA建立了同一PCR体系同时检测羊、牛源性物质的方法.应用DNA提取液制备模板,不但有效地缩短了试验时间,还大大降低了成本,有利于在生产实际中推广应用.  相似文献   

口蹄疫病毒群特异性荧光PCR检测方法研究   总被引：9，自引：3，他引：6  

杨素  吴小伦  花群义  徐自忠  周晓黎  贾建军  薄清如  潘文波 《中国畜牧兽医》2004,31(11):44-46

应用荧光PCR技术,利用O型口蹄疫病毒(FMDV)的5′端UTR区的IRES片段设计和合成了可检测7个血清型FMDV群特异性引物和Taqman探针,建立了1种敏感性高、特异性强、快速的检测方法,耗时仅为4 h,克服了传统的病毒分离鉴定方法耗时长,敏感性和准确性较差,而且容易造成病毒扩散及环境污染的缺点,可广泛应用于动物的大批量、快速检疫.  相似文献   

6－二甲氨基嘌呤对牛卵母细胞孤雌发育的影响   总被引：8，自引：1，他引：8  

石德顺  杨素芳  谭世俭 《广西农业生物科学》2001,20(1):1-5

本研究系统探讨了 6-二甲氨基嘌呤 ( DMAP)对牛卵母细胞孤雌发育的影响。牛卵母细胞体外成熟 2 4 ,2 6,2 8或 30 h后 ,先用含 7%乙醇的培养液激活处理 5min,然后在含 2 mmol/L DMAP的培养液中培养 3h,或直接在培养液中进行培养。结果发现 ,经 2 mmol/L DMAP培养处理 3h的卵母细胞的激活分裂率和囊胚发育率均明显高于未处理的卵母细胞 ,特别是对于体外成熟 2 4 h和 2 6h的卵母细胞差异更为显著。如若在 DMAP处理的基础上同时加入 5μg/m L的细胞松驰素 ( CB) ,卵母细胞激活后的囊胚发育率则得到进一步提高 ( 48.7%比 37.5% )。研究结果表明 ,DMAP和 CB对卵母细胞激活后的孤雌发育有促进作用 ,并能降低卵龄所引起的激活效果差异  相似文献   

实时荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌方法的建立     

罗宝正  薄清如  陈竞帆  徐海聂  杨素  杨建允  沙才华  廖秀云 《农业生物技术学报》2006,14(5):783-787

建立了一种检测Ⅱ型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2)的实时荧光PCR(real-time fluorescence polymerase chain reaction)方法。用Primer Express2.0和Oligo6.0设计针对Ⅱ型猪链球菌荚膜抗原基因簇中cps2I基因的引物和Taqman荧光探针。通过常规PCR方法扩增得到81 bp DNA片段，克隆到pMD18-T载体，测序表明得到的序列为目的基因片段。在Lightcycler荧光PCR仪上对Ⅱ型猪链球菌的扩增曲线表明，该实时荧光PCR具有良好的特异性，可成功地扩增Ⅱ型猪链球菌，而参考猪链球菌(S.suis)、大肠杆菌(Escherichia coli )、沙门氏菌(Salmonella)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureu)、志贺氏菌(Shigella)、单增李斯特氏菌(Listeria monocytoge)和空白对照都是阴性；该检测方法可达到检测10个细菌的灵敏度，反应过程仅需30 min完成；在两个不同时间检测同一浓度的菌液，每次做20个重复，2次检测所得的Ct (threshold，阈循环)值之间无统计学差异(P > 0.05)，方法稳定性好。该实时荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌的方法可用于出入境检疫和动物防疫监督部门的疫情监测。  相似文献