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本试验旨在建立一种快速、灵敏的诊断小反刍兽疫的方法。本研究通过RT-PCR方法扩增小反刍兽疫病毒N基因,连接到pMD19-T克隆载体上,构建质粒标准品。根据GenBank中中国流行毒株及Nigeria 75/1疫苗株N基因保守序列设计引物,利用SYBR Green Ⅰ法进行实时荧光定量PCR,建立标准曲线,并进行特异性试验、敏感性试验和重复性试验。结果表明,在2.82×100~2.82×107拷贝/μL范围内,Ct值与质粒拷贝数对数值呈良好的线性关系,标准曲线线性关系R2值为0.992;其他病毒无特异性扩增曲线,特异性良好;批内变异系数为0.27%~2.77%,批间变异系数为0.41%~3.39%,重复性较好;检测灵敏度可达2.82拷贝/μL,是普通PCR的1 000倍。用该方法对12份cDNA样品进行检测,9份为阳性,3份为阴性,而普通PCR检测,7份为阳性,5份为阴性,说明本方法比普通PCR灵敏度高。本检测方法的建立对快速、灵敏诊断小反刍兽疫,防止疫情的扩散具有重要意义。 相似文献
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我国养猪业一直面临对抗多种传染病的压力,自2018年我国发生非洲猪瘟以来,国内多地先后出现疫情,导致生猪存栏量明显下降,严重影响了人民生活,对生猪产业造成了巨大的经济损失,目前亟待恢复正常的生猪生产经营秩序。在进行防控非洲猪瘟的同时,也不能忽视其他猪场常见传染病的防控,为此文章对恢复养猪生产过程中,猪场常见传染病的防控提出了一些建议,以便供养殖户和管理者参考。 相似文献
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高量“6107”脱毒菜籽粕饲养黄羽肉鸡的效果梁琳,潘穗华,刘汉林,莫棣华,何霆(广东省农科院畜牧研究所广州五山510640)近年,随着畜牧业和饲料工业的高速发展,蛋白质饲料需要量不断增加,致使鱼粉、豆粕严重短缺,价格日益上涨,因此一种新开发的蛋白饲料... 相似文献
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[目的] 了解北京地区流行的鸽圆环病毒(Pigeon circovirus,PiCV)的基因组特征及变异规律。[方法] 以3只发病鸽的肝脏和脾脏组织为模板,采用PCR技术检测病原。以检测阳性的肝脏组织DNA为模板,应用PCR技术分段扩增PiCV的全基因序列。应用DNAStar和Mega 7.0软件对扩增得到的全序列进行拼接和核苷酸序列比对,并构建系统进化树,对病毒基因组的2个开放阅读框分别进行核苷酸和氨基酸序列比对,并构建系统进化树。[结果] 经PCR检测,3只病鸽中有1只病鸽的组织中检测到PiCV阳性,并未检出其他病毒。采用PCR分段扩增成功获得了1株PiCV的全基因组序列,命名为PiCV BJ,该病毒基因组大小为2 034 bp,包含有2个主要的开放阅读框(ORFs),ORF-V1编码Rep蛋白,ORF-C1编码Cap蛋白。相似性比对结果显示,PiCV BJ株基因组序列与GenBank上登录的其他参考序列的核苷酸相似性在86.0%~97.0%之间,与2011年分离自波兰的PL53相似性为97.0%。遗传进化结果显示,PiCV BJ株与2014年分离自波兰的PL124在同一分支,亲缘关系较近;与其他禽源圆环病毒不在同一分支,亲缘关系较远。PiCV BJ株Cap基因的起始密码子为ATG,与2011年分离自比利时的11-08304株核苷酸、氨基酸序列相似性高达95.8%和85.2%;Rep基因与2011年分离自波兰的PL53相似性最高,核苷酸和氨基酸相似性分别高达94.6%和96.2%;Cap和Rep基因的进化树分析结果也显示,PiCV BJ株均与PL53和11-08304株在同一分支,亲缘关系较近,这与相似性分析的结果一致。[结论] PiCV BJ株来自国外,可能由赛鸽引种传入中国,提示在外部引种时要做好病毒监测。本研究丰富了PiCV的遗传学研究资料,为进一步探究PiCV的遗传变异及传播机制提供了参考依据,也为PiCV的防控提供了重要的理论基础。 相似文献
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黄羽肉鸡对矿物元素需要量大都沿用肉用仔鸡的需要量,而我国沿海大量养殖黄羽肉鸡的地区出现的跛脚及弯趾现象越来越多,这可能与矿物元素、维生素以及钙、磷添加量不符合黄羽肉鸡需要量有关。为了掌握黄羽肉鸡不同生长阶段的矿物元素日粮需要量和饲料添加需要量,以及分析不同矿物元素组成与跛脚及弯趾的相互关系,特设计本试验。1 试验方法11 试验动物 1日龄“江村黄鸡”健康母雏3000只。12 试验设计 本试验以10种不同的矿物元素预混料进行研究,矿物元素预混料包含铁、铜、锌、锰、碘、硒、钴7种元素。在基础日粮(处理Ⅰ)的基础上提高铁… 相似文献
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肉用仔鸡中、后期日粮的配制技术广东省农科院畜牧研究所梁琳,莫棣华,何霆,苏基双,刘汉林肉用仔鸡(又称快大鸡),由于其生长速度快,故需要较高的营养水平进行饲养。目前我国各地肉用仔鸡的饲养标准各不相同,一般界于国家标准和NRC标准之间,因国家标准偏低、N... 相似文献