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为了对转基因抗虫玉米转育株 Bt 蛋白的表达特性进行分析,用Cry1Ab/Cry1Ac 平板试剂盒定量检测了3种含 Bt 基因的玉米回交后代品系 BC1F1 ( HZ3152、HZ3342、HC0142 ) 在相同生长时期不同组织和不同生长时期相同组织中 Bt 蛋白的表达量。结果表明,在乳熟期 BC1F1 不同组织中 Bt 蛋白表达含量的高低顺序为: 叶片 >胚乳>花丝>种子苞叶;在BC1F1不同的生长发育阶段 ( 苗期、抽丝期和乳熟期 ),叶片中 Bt 蛋白的含量随生育期的推移呈明显先上升后下降趋势, Bt 蛋白含量在抽丝期达到最大,之后又开始下降;苗期 ( HC0142、HZ3152、HZ3342) Bt 蛋白的含量 (4.16、3.75和3.72 μg·g-1 ) 和乳熟期 (5.56、4.58和4.79 μg·g-1 ) 的含量分别是抽丝期 (6.05、5.36和5.50 μg·g-1) 的 68%、69%、67% 和91%、85%、87%。一般在玉米生长后期 Bt 蛋白的浓度有所下降,但幅度不大,对其抗性不会造成太大影响。该研究表明 Bt 蛋白在玉米回交后代中可以稳定表达,对 Bt 的相关研究为转基因育种等提供了参考依据。 相似文献
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本研究建立了鸡肉组织中氯丙嗪残留检测的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)定量确证方法。建立的方法所用样品用酸化乙腈和乙腈饱和正己烷提取后,采用C18柱色谱分离,正离子扫描模式,分别以乙腈和5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)、乙腈和水为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离,多反应监测模式检测,内标法定量。该方法检测限为0.008μg/kg,定量限为0.025μg/kg,在0.025~2.5μg/kg的添加范围内,回收率为71.5%~86.7%,日内、日间变异系数均小于7.6%。 相似文献
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<正>蚕桑业是泗洪县农村的一项传统副业,曾为泗洪地方经济、工业发展、现代农业和致富农民作出了较大贡献。近年来,随着农业产业结构的进一步调整,蚕桑生产布局得到优化,生产水平不断提高,栽桑、养蚕在部分地区已具一定规模,成为农民增收和农业增效的特色产业。目前,农村城镇化不断推进,土地经营权的流转,对蚕桑产业来说,既是挑战,又是机遇。要抓住蚕桑生产具有投资小、见效快、收益高、提高森林覆盖率等优点,重视蚕桑产业发展,将 相似文献
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通过甲基磺酸乙酯诱变得到玉米叶早衰突变体les1(leaf early senescence 1),突变体les1从7叶期开始叶片由下往上失绿黄化,生长后期叶片黄化干枯面积逐渐增大,且突变体les1地下部分生物量及子粒变小、子粒千粒重显著降低。与叶片黄化表型一致,研究发现,突变体les1叶片中光合色素含量以及净光合速率显著降低,且突变体les1中活性氧及丙二醛大量积累,可能与叶绿素的降解及叶片早衰相关。遗传分析表明,les1的叶片早衰表型由单基因隐性突变所致,进一步通过混池建库和全基因重测序将les1的突变位点初步定位在2号染色体。 相似文献
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建立了能同时提取净化鸡肌肉组织中多残留的前处理并使用高效液相色谱分别检测的方法。样品经McIlvaine缓冲液、McIlvaine缓冲液-甲醇混合液提取后,过Oasis HLB固相萃取柱,5%甲醇(φ)淋洗,甲醇洗脱,40℃氮气吹干,磷酸-三乙胺缓冲液/乙腈复溶。样品四环素类药物用紫外检测器检测,波长365 nm,氟喹诺酮类药物用荧光检测器检测:激发波长280 nm,发射波长为480 nm。结果显示:鸡肌肉组织中4种四环素类药物OTC、TC的检测限是5μg/kg,CTC、DOXY的检测限是16μg/kg,回收率范围60.6%~89.1%,变异系数范围1.9%~14.3%;4种氟喹诺酮类药物的检测限均为2μg/kg,回收率范围77.5%~86.3%,变异系数范围2.8%~7.4%。说明该方法灵敏度高、适应性强,适用于鸡肌肉组织中上述4种四环素类药物和4种氟喹诺酮类药物残留的一次性检出。 相似文献
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同时检测牛奶中喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法研究 总被引:3,自引:1,他引:2
【目的】喹诺酮类药物和庆大霉素均为高效、广谱抗菌药物,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有显著的抗菌效果,是中国畜牧业和水产业中常用的两类兽药。由于这两类药物在动物源性食品中的残留可能导致对人类健康的危害,因此,为了保护消费者的健康,研究和制定动物源性食品中同时检测这两类药物的残留检测方法对完善中国的食品安全监测体系具有重要意义。【方法】建立了同时检测牛奶中13种喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并对喹诺酮类和庆大霉素单克隆抗体按比例进行混合标记。同时,采用方阵法系统研究了胶体金标记这两类抗体时的pH值和抗体用量对灵敏度的影响,并对这两类药物抗原的包被条件进行选择确定。在此基础上研发出可同时检测牛奶中13种喹诺酮类药物和庆大霉素的胶体金快速检测试纸条,试纸条采用直接竞争法原理。【结果】该方法可同时检测恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氟甲喹、培氟沙星、氧氟沙星、依诺沙星、噁喹酸、麻保沙星、氟罗沙星、奥比沙星、达氟沙星和洛美沙星这13种喹诺酮类药物和庆大霉素,对其他喹诺酮类药物如:沙拉沙星、二氟沙星、司帕沙星、帕珠沙星等无交叉反应,同时对其他氨基糖苷类药物如:链霉素、新霉素、卡那霉素等也无交叉反应。该试纸条对牛奶中这13种喹诺酮类药物和庆大霉素的检测限均为20 ng·mL-1,完全满足国家对这两类药物的残留限量要求。牛奶样本直接检测,无需处理,整个检测过程5 min内完成。【结论】采用该方法和HPLC-MS/MS对60份牛奶盲样进行比对试验,阳性样品全部检出,同时筛选方法未出现假阳性和假阴性现象,二者的测定结果基本相符,表明该方法准确可靠,适用于现场大批量样本的快速检测和筛选。实际操作过程中,可以采用胶体金免疫层析对样品进行现场快速初筛;筛选的疑似阳性样品,可以采用HPLC-MS/MS方法对样品中QNS和GEN的含量进一步确认。 相似文献
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为探讨酶联免疫法(ELISA)检测饲料中沙丁胺醇(salbutamol,SAL)的前处理方法,试验对提取液的pH、离子强度、有机溶剂浓度及样品稀释倍数等条件进行了考察,选取最适宜的提取液条件对2种不同类型的饲料样本进行提取,用ELISA测定样品中沙丁胺醇的残留量。结果表明,沙丁胺醇标准曲线的IC50值为0.606 ng/mL,线性范围为0.221~1.658 ng/mL,R2=0.9998,提取液的pH为7.5,PBS缓冲液最优浓度为0.06 mol/L,稀释倍数为10倍,2种不同类型的饲料样本的检测限(LOD)为5.0 ng/mL。当沙丁胺醇的添加浓度为5、10 μg/kg时,该方法的添加回收率为77%~110%,变异系数<8%。 相似文献