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31.
动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
将E.coli O157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活、超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP2/0骨髓瘤细胞融合后,获得7株分泌抗E.coli O157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMλ、IgMκ和IgG2aκ.用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×103,腹水效价均为1×1011;C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10~2×102,腹水效价均为1×103.相加ELISA结果显示,F1、G9和G11 3株mAbs对应相同的抗原表位,而其它4株对应不同的抗原表位.用间接ELISA分析特异性,7株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应.Western blotting表明,C3、E7和F1 3株mAbs在蛋白分子量28×103处有特异性条带,而其它4株mAbs则未显示蛋白带. 相似文献
32.
选择6株(鹅DC01、鸡WJ10001、鸽DZ01、鸽DZ02、鸭NJ10、鸭SD09)分离自鸡、番鸭、鹅、鸽的新城疫病毒,接种于10日龄无特定病原体(SPF)鸡胚中,通过测定鸡胚平均死亡时间(MDT)、雏鸡脑内致病指数(ICPI)及融合蛋白(F)裂解位点氨基酸序列,研究其生物学特性和分子流行病学特征.结果显示,6个分离毒株均为新城疫病毒(NDV)强毒株.对F基因的序列测定和遗传关系分析表明,2株鸭源NDV强毒株(鸭NJ10、鸭SD09)与1株鸭源NDV山东流行毒株(鸭SDWF2005)高度同源;2株鸽源NDV强毒株(鸽DZ01、鸽DZ02)与1株鸽源DNA强毒株(鸽JS2000)高度同源.6株不同宿主源毒株的基因型分别为Ⅵ型和Ⅶ型,是中国目前流行的NDV毒株型. 相似文献
33.
34.
35.
嵌合O型口蹄疫病毒多表位基因猪细小病毒VLPs载体疫苗的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
综合运用生物信息学和分子生物学技术,模拟PPV VP2蛋白表面不同Loop区插入O型FMDV VP1蛋白上多表位基因(VP1:21~40、141~160和200~213残基)空间构象,并在VP2 N端引入通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE),人工合成嵌合基因并克隆到杆状病毒转移载体pFastBac HTA中,转化E.coli DH10Bac感受态细胞,经三抗筛选,获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDV VP1∶PPV VP2,用脂质体法转染Sf9细胞。对rBac-FMDVVP1∶PPV VP2感染的Sf9细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;用Western-blotting分析,在64 000处出现一条特异蛋白条带;电镜观察,重组VP2蛋白能够自主组装成病毒样颗粒。红细胞凝集试验证实,表达的嵌合蛋白PPV∶VP2-FMDV∶VP1具有与全病毒类似的血凝活性。 相似文献
36.
棉铃虫一直是苏北沿海地区棉花上的主要害虫,20世纪90年代在全国范围内暴发为害,给我国棉花生产造成了巨大损失.近年来,通过棉铃虫综防技术的推广应用,棉铃虫在苏北沿海地区发生程度均明显回落,尤其是转Bt基因抗虫棉的推广应用,有效压低了棉铃虫的发生基数,并控制在轻至偏轻发生水平;但2005年2~3代棉铃虫却在苏北沿海局部地区暴发,百株虫量高的田块达50多头,发生量为历史罕见,引起了棉农对转基因抗虫棉抗虫性的质疑.为此,结合历年棉铃虫发生特点,经过仔细调查分析认为,2005年2~3代棉铃虫局部暴发原因应该是多种因素的偶合造成的. 相似文献
37.
棉花脱叶剂50%噻苯隆WP效果研究 总被引:3,自引:0,他引:3
50 %噻苯隆系江苏安邦农化有限公司研制开发的棉花脱叶剂。为了探明该产品在大丰地区棉田的应用效果及对棉花的安全性 ,于 2 0 0 2年进行了田间小区药效试验 ,取得了较好的效果。1试验材料试验田选择在大丰市大中镇棉田中进行 ,种植方式为育苗移栽。前茬为小麦。棉花品种为鲁棉研1 5。试验田地势平坦 ,肥力均匀。砂壤土 ,肥力中等。土壤有机质含量 1 .43% ,p H值 7.5。2气象条件试验期间 ( 1 0月 1 4日 - 1 0月 2 6日 )平均气温1 5 .79℃ ,最高气温 2 7.9℃ ,最低气温 6.0℃。药后2 4小时内未降雨。整个试验期间雨日 3天 ,其中 1 0月 1 8日… 相似文献
38.
DIG—标记鸡传染性法氏囊病病毒cDNA探针的制备 总被引:7,自引:1,他引:6
用IBDV特异引物对IBDV RNA进行逆转录和PCR扩增。以低融点琼脂糖凝胶电泳法回收PCR扩增带,经酚-氯仿纯化后,用DIG标记制备IBDV cDNA核酸探针。斑点杂交试验证明,该探针能与IBDV不同毒株发生阳性杂交反应,敏感度为1pg。本实验制备的IBDV cDNA核酸探针不仅为IBDV的流行病学研究和分子生物学鉴定提供了敏感可靠的手段,而且也是核酸探针制备方法的一次探索。 相似文献
39.
江苏沿海地区甜菜夜蛾发生特点及综合治理技术 总被引:9,自引:0,他引:9
甜菜夜蛾在江苏沿海地区为间隙暴发性害虫 ,近年来重发频率增加。 2 0 0 1年甜菜夜蛾在江苏省大丰市秋季多种蔬菜上重发 ,尤其在秋白菜和菠菜上百株虫量高达 10 0 0多头 ,有的田块造成毁种绝收 ,损失惨重 ;2 0 0 2年甜菜夜蛾再度在该市局部地区暴发。该虫已成为沿海地区秋季蔬菜、特种经济作物上的重要害虫 ,对蔬菜、大豆等多种作物的生产已构成极大的威胁。为此 ,笔者近两年来对该虫进行了仔细调查 ,并开展了综合治理技术研究。1 江苏沿海地区甜菜夜蛾发生情况1.1 发生特点甜菜夜蛾在江苏一年发生 4~ 5代 ,其中 3、4、5代世代重叠现象… 相似文献
40.
本研究将人工合成的犬干扰素α2成熟区序列插入原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-28a-Ca IFN-α2;然后将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,分子量约为23 k Da的目的蛋白表达,表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量约占菌体总蛋白的52.5%。包涵体蛋白经变性、复性和纯化处理后,获得的重组Ca IFN-α2纯度为92%;用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性为3.16×106/m L。本研究结果为进一步研制新型犬用干扰素制品奠定了物质基础。 相似文献