科学种甜菜 高产高效益     

张凤林  王永山 《中国糖料》1988,(2)

黑龙江省桦川县梨丰乡南林村农民曲万昌1987年在市农委等单位联合组织的甜菜高产攻关组指导下,按统一制定的技术方案种植的14亩甜菜,总产达66080公斤,平均亩产4720公斤,比全市甜菜平均亩产增产3.72倍,创造了全市甜菜单产和亩效益的最高纪录。他采取的措施和具体做法是:1.选好茬 细整地。根据甜菜对地势和茬口的要求,选择了地势平坦、  相似文献   

饲喂不同寄主作物对甜菜夜蛾的影响   总被引：3，自引：1，他引：3  

徐文华  王瑞明  王永山  刘海南 《江西棉花》2006,28(3):17-19

2003～2004年,选择甜菜夜蛾几种寄主作物的器官在室内进行甜菜夜蛾幼虫饲养试验,观察结果,以青椒叶为食料处理,幼虫历期最长,花生叶处理次之;饲喂常规棉与抗虫棉比较,对幼虫的发育历期影响不明显,但取食常规棉幼虫处理的蛹重高于抗虫棉处理.试验结果表明,各试验处理对蛹历期的影响与幼虫历期趋势一致;在幼虫期饲喂不同寄主作物对甜菜夜蛾的产卵量没有明显影响.  相似文献   

鉴别犬瘟热病毒强弱毒株中和单克隆抗体的制备     

毕振威  徐立波  夏兴霞  梁霆  王永山 《江苏农业科学》2020,48(20):178-182

  相似文献   

大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制   总被引：4，自引：0，他引：4  

刘洁  夏兴霞  王永山  张雪寒  费荣梅  何孔旺 《中国预防兽医学报》2010,32(5)

为建立快速检测鼠感染大肠杆菌O157∶H7后的抗体,本研究采用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157∶H7抗原和抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157∶H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条。实验结果表明,该试纸条仅与O157∶H7阳性鼠血清发生特异性反应,用该试纸条与常规间接ELISA平行比较检测O157∶H7免疫鼠血清,抗体效价分别为1×106和1×105,两者的敏感度相当。该试纸条操作简便,10min可出结果,适用于调查与追溯鼠O157∶H7感染状况时的现场检测。  相似文献   

传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合基因的构建及其表达产物分析     

刘小娟  王永山  欧阳伟  张海彬  王忠灿  唐雨德 《中国预防兽医学报》2010,32(11)

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)的抗原表位嵌合体基因分子载体pET-mHBc。将编码IBDV多表位基因5epis定向插入到pET-mHBc的mHBc基因中,获得嵌合体基因mHBc-5epis表达重组质粒pET-mHBc-5epis,并在大肠杆菌中表达。经SDS-PAGE分析,重组嵌合体蛋白的分子量约29 ku,表达量约占菌体总蛋白的47.6%;Western blot结果表明,重组嵌合体蛋白可与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带;重组嵌合体蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约100 nm～120 nm;用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到1∶200。本实验成功构建了5epis与HBcAg嵌合体基因,并在大肠杆菌中高效表达,具有IBDV抗原反应性的重组病毒样颗粒嵌合体蛋白,为研究其表位型基因工程疫苗提供了新途径。  相似文献   

传染性法氏囊病病毒株VP2基因在重组腺病毒中的表达     

潘群兴  王永山  何孔旺  欧阳伟  王晓丽  王忠灿  唐雨德 《中国兽医学报》2010,30(3)

用RT-PCR方法从传染性法氏囊病(IBD)免疫预防失败的病鸡法氏囊组织AH1与AH2中扩增传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因。序列分析结果显示,AH1与AH2病毒VP2基因长度均为1350nt,编码450aa,核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为98.2%、99.3%,七肽基序均为SWSASGS,在222、253、256、279、284、294和299位上的氨基酸残基分别是A、Q、I、D、A、I和S,具有IBDV强毒的分子特征。进一步将VP2基因克隆入人5型腺病毒穿梭载体(pShuttle-CMV),与腺病毒骨架载体(pAdEasyTM)共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组并转染HEK-293A细胞,经多次亚克隆获得了重组腺病毒rAd-(IBDV)VP2。利用Western-blot、IFA等方法检测IBDVVP2蛋白的体外表达情况,结果证明VP2基因在腺病毒中获得了表达。  相似文献   

IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

周宇  王永山  范红结  欧阳伟  唐雨德  王忠灿 《中国兽医学报》2010,30(10)

运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBac HT中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac HT-VP2-5e,用脂质体法转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vBac HT-VP2-5e。对vBac HT-VP2-5e感染的Sf9细胞,以间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;电镜检查,重组VP2-5e蛋白能够自组装成病毒样颗粒(VLP);用免疫印迹分析(Western-blotting),在59 000处出现一条特异性蛋白条带。本试验为组合基因型重组IBD多价疫苗的研究奠定了基础。  相似文献   

5株乳酸菌的分离鉴定与生物学特性研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

王晓丽  王永山  诸玉梅  朱小翠  刘小娟  周宇  王冉 《江苏农业科学》2011,(1)

从泡菜和仔猪粪便中分离出5株乳酸菌,分别命名为RS、RB、RFT、RST、RO,结合细菌形态学、生理生化特性和16S rRNA序列同源性分析进行鉴定,并对其特性进行了研究.结果表明RS菌株为植物乳杆菌,RB、RO菌株为粪肠球菌,RVI、RST为屎肠球菌.其中RS菌株具有较好的耐酸性、一定的胆盐耐受力,对温度敏感;RB、RPT、RST、RO菌株对模拟肠液具有较强的耐受力,45-55℃处理30 min不影响其生长;5个菌株对大肠杆菌O<,157>和沙门氏菌的抑菌率均达到98%-100%,可作为优良的益生菌候选菌.  相似文献   

新型鹅黄病毒JS804毒株的分离与鉴定   总被引：7，自引：0，他引：7  

黄欣梅  李银  赵冬敏  刘宇卓  张敬峰  何孔旺  侯继波  钮慧敏  李彬  温立斌  王永山  邵国青  张康宁  朱江宁  吴东明  高磊 《江苏农业学报》2011,27(2)

2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病.对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子.对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验.在病毒核酸背景未知的情况下,应用非序列依赖性单引物扩增法结合DNA酶处理(DNase-sequence independent single primer amplificmion,DNase-SISPA)对病原基因进行扩增,并在此基础上设计了1对特异性引物对病毒基因进行PCR扩增.剖检结果发现病鹅的脑膜、肺脏、肝脏、心脏、卵巢等多器官出血,脾脏肿大坏死.含毒鸭胚尿囊膜超薄切片电镜观察显示:病毒粒子直径为50～60 nm.动物回归试验成功复制出该病并分离到病毒.应用DNase-SISPA方法发现了3个病毒相关基因片段,经序列比对分析,与黄病毒属(Flavivirus)坦布苏病毒(Tembusu virus)基因序列有很高的同源性,分别为96%、88%、93%.据此设计特异性引物扩增出一段985 bp基因片段,该片段与黄病毒属坦布苏病毒E基因的核苷酸同源性为91%,氨基酸同源性为97%.将分离的鹅黄病毒毒株命名为Goose/Jiangsu/804/2010(简称JS804).研究结果表明:此次鸭、鹅新发疫病的病原为一种新的黄病毒.  相似文献   

传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

欧阳伟  王永山  王永强  王笑梅  朱向东  毕振威  范红结 《中国兽医学报》2012,32(3):329-336

细胞内源性microRNA（miRNA）在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒（IBDV）的相互作用,用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞（CEF）和SPF鸡,24h后,取感染CEF和法氏囊组织,提取细胞总RNA,用Hy3/Hy5双色荧光标记,与miRNA芯片杂交,进行芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示：在IBDV弱毒感染的CEF中,有17个细胞内源性miRNA表达上调,17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中,有30个细胞内源性miRNA表达上调,18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物,用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果,2种方法的检测结果一致。结果表明,IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化,这些上调或下调的miRNA能调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常,引起细胞及组织器官发生病理学变化。  相似文献