蛋鸡J亚群禽白血病病毒HLJ09MDJ-1株的分离鉴定     

潘伟  高玉龙  秦立廷  祁小乐  高宏雷  孙芬芬  王永强  王笑梅 《动物医学进展》2010,31(11)

为了解蛋鸡中禽白血病当前流行毒株类型及其gp85基因分子特征,在临床症状和病理组织学观察的基础上,采用ELISA抗原检测、特异性PCR以及亚群特异性免疫荧光试验(IFA),证实从黑龙江省某鸡场送检蛋鸡中分离到1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为HLJ09 MDJ-1;克隆了其gp85基因,并进行了序列分析比较。结果表明,该分离株的gp85基因与国内外其他ALV-J毒株的核苷酸同源性为88.2%～98.2%。其中,HLJ09 MDJ-1与英国原型株HPRS-103的同源性最高(98.2%),与美国株ADOL-7501的同源性最低(88.2%),表明HLJ09 MDJ-1的gp85基因与HPRS-103有较近的亲缘关系。本研究从蛋鸡中分离到ALV-J毒株,为研究ALV-J宿主嗜性改变和ALV-J对蛋鸡致病机制提供了素材。  相似文献   

宁安县爆发马梨形虫病(焦虫病)调查报告     

程兴文  句常瑞  葛永昌  赵玉顺  刘惠兰  刘风鸣  王笑梅 《黑龙江畜牧兽医》1984,(11)

马梨形虫病是由硬蜱传播的马属动物的血液原虫病。寄生于马属动物的红细胞内。发病后,患畜主要表现高热、贫血、黄疸和呼吸困难,若诊治不及时,死亡率很高,危害严重。本病分布和活动具有一定的地区性和季节性。我省1959年春在肇东、肇州、肇源、杜蒙、泰来和林甸等县首次揭发出  相似文献   

牛血清中非特异性抑制因子对几种病毒的抑制作用     

王笑梅  陈冠春  于大海 《中国预防兽医学报》1988,(6)

犊牛和成牛血清对鸡传染性法氏囊炎病毒 D_(78)株(IBDV D_(78))的蚀斑形成抑制率在80%以上;对猪细小病毒的血凝抑制(HI)效价在32倍以上;对禽流感抗原的 HI 效价在64倍以上。胎牛血清对 IBDV D_(78)的蚀斑形成平均抑制率只有18.5%;对猪细小病毒及禽流感病毒的 HI 效价与成牛血清相同。成牛二血情(86-6号)经60℃30分钟、肝素·氯化镁、高碘酸钾处理后,对 IBDV D_(78)的蚀斑形成平均抑制率与处理前相比差异不显著;经65℃30分钟、丙酮、乙醚、受体破坏酶(RDE),高岭土处理后,对 IBDV D_(78)蚀斑形成抑制率较处理前显著降低,成牛血清经高岭土和胰酶处理后,对禽流感和猪细小病毒的 HI 效价消失;经乙醚、丙酮和 RDE 处理后,对禽流感病毒的 HI 效价降到32倍,对猪细小病毒的分别降到16倍和24倍;经65℃30分钟处理后,对猪细小病毒的 HI 效价仍为32倍,对禽流感病毒则升高到85.3倍.  相似文献   

肉鸡疾病控制的主推技术     

王笑梅 《中国禽业导刊》2014,(2):48-49

一肉鸡疾病控制室主推技术 肉鸡疾病控制室主推技术，主要是禽流感综合防控技术以及禽白血病净化技术。 1禽流感综合防控技术 （1）肉鸡禽流感参考免疫程序  相似文献   

鸡传染性法氏囊病病毒细胞嗜性及受体研究现状     

张礼洲  祁小乐  王笑梅 《中国家禽》2014,36(20)

鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)强、弱毒株在侵染宿主细胞上存在着明显的细胞嗜性差异,普遍认为,这种细胞嗜性差异主要由宿主细胞的不同受体所介导.迄今为止,已报道4种IBDV受体相关分子:SIgM免疫球蛋白、热休克蛋白90(cHsp90)、整合素α4β1、Toll样受体(TLR).本文对IBDV细胞嗜性及细胞受体相关研究进行了综述.  相似文献   

鸡传染性法氏囊病病毒实时荧光定量RT—PCR检测方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

王永强  祁小乐  高宏雷  高玉龙  宇文延青  林欢  秦立廷  宋修庆  王笑梅 《中国预防兽医学报》2009,31(1)

本试验根据GenBank中鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组设计一对针对病毒vp5基因的引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种快速检测IBDV核酸载量的Taq Man荧光定量RT-PCR方法.通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在108拷贝/μL～101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系.能够灵敏地检测初始模板中30个拷贝的病毒核酸,其灵敏度是常规RT-PCR检测方法的100倍.该方法不与其它的禽源病毒发生非特异性反应,并且具有良好的重复性,为IBDV的定性定量检测提供了有效的工具.  相似文献   

鸡贫血病毒Taq Man探针荧光定量PCR检测方法的建立   总被引：4，自引：0，他引：4  

宋修庆  高宏雷  王晓艳  林欢  宇文延青  王永强  王笑梅 《中国预防兽医学报》2009,31(1)

根据鸡贫血病毒(CAV)基因序列,选取一段高度保守的基因序列作为目的片段设计引物与探针,将该目的片段克隆到pMD18-T载体中,作为阳性标准品.通过优化荧光定量PCR反应条件,建立了CAV的荧光定量PCR检测方法.结果表明,该检测方法的敏感性达到10个病毒拷贝/μL,与其他禽病病毒无交叉反应,批间与批内重复试验相关系数都小于5%.实验数据证明该检测方法敏感性高,特异性好,重复性佳.  相似文献   

鸡传染性贫血病灭活苗的实验评价     

王笑梅 《国外兽医学(畜禽传染病)》1998,18(3):49-51

  相似文献   

鸡法氏囊B淋巴细胞三框cDNA表达文库的构建     

高玉龙  刘伟  高宏雷  邓小芸  李铁强  王笑梅  沈荣显 《中国预防兽医学报》2008,30(1):10-13

分离纯化3周龄SPF鸡法氏囊B淋巴细胞的mRNA,以5'端生物素标记的Oligo(dT)primer为引物反转录后连接3种读码框的Adapter,层析柱分级纯化,通过BP重组反应分别构建3种读码框的cDNA入门文库,平均滴度分别为1×105 CFU/mL、1×105CFU/mL、1.2×105CFU/mL,文库总容量分别为1.2×106CFU、1.2×106CFU、1.5×106CFU,平均插入片段分别为1 270 bp、1 190 bp和1 120 bp,阳性重组率均为100%.将3种读码框的cDNA入门文库扩增后提取质粒,取等量的质粒通过LR重组反应将入门文库转换为三框表达文库,经测定平均滴度为1×105CFU/mL,文库总容量为1.2×106CFU,平均插入片段为1 017 bp,阳性重组率为100%.结果表明所构建的三框cDNA表达文库具有较高的重组率和较大的库容量,为进一步筛选鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)在法氏囊B淋巴细胞中的受体及研究细胞嗜性奠定了基础.  相似文献   

鸡传染性法氏囊病三价治疗苗的研究     

王笑梅  邱冬  王秀荣  陈冠春 《中国预防兽医学报》2000,22(1):15-17

将鸡传染性法氏囊病病毒HBD、HS和HD78 毒株分别适应于鸡胚成纤维细胞,病毒滴度均高达1.0 ×108PFU/ml 以上,以适当比例混合制成鸡传染性法氏囊三价细胞苗。以1.0 ×107PFU/ 只的剂量,经滴鼻、口服途径,分别免疫5 日龄、10 日龄SPF雏鸡,观察一周,无IBD临床症状,迫检可见,法氏囊组织无异常变化。以5.0×105PEU/ 只的剂量,滴鼻、口服免疫10 ～15 日龄雏鸡,7 天后检出琼扩抗体,15 天后血清抗体阳转率达80% 以上,15 天后攻强毒,保护率为100% 。不同疫苗的免疫保护效率比较试验证明,三价细胞苗免疫后的血清抗体阳转率、对强毒的保护率都明显优于双价苗、2512( 国产) 、B2( 美国)、D78(荷兰)、CT(国产)等IBD疫苗,现地应用已逾3000 万羽份,获得良好的效果  相似文献