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通过对PRRSV贵州分离株(Guizhou-1)RNA的提取和RT-PCR方法扩增得到ORF5基因,成功构建原核表达载体pET-32a—ORF5,转化至宿主菌BL21(DE3)中,诱导蛋白表达,并对诱导表达蛋白的SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析,得到了约42.9ku左右的表达蛋白,与预期大小相符,表明猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因在大肠杆菌中能表达,并具有一定的生物学活性。动物免疫试验表明纯化蛋白和包涵体均可刺激小鼠产生抗体,纯化蛋白的效果优于包涵体。 相似文献
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猪口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的猪等偶蹄动物多发的一种急性、热性和传播极为迅速的接触性传染病。该病毒还可引起牛、羊等偶蹄动物发病,人也可感染。世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物传染病,我国规定为一类动物传染病。本病传染途径多、传染性强、为多种动物共患该病早在14、15世纪就已经记载了类似口蹄疫的疾病。而在1514年,意大利学者比较详细的记述了口蹄疫。在17、18世纪,德国、法国和意大利等国暴发口蹄疫。直到现在,仍相续在世界各国都暴发了该病。目前,只有新西兰在历史上是唯一未发生过口蹄疫的国家。澳大利亚、日本、美国、加拿大等国相续在20世纪初宣布消灭了口蹄疫。但当今国际贸易日趋频繁、物资交流更加广泛的情况下,许多国家都有可能再度暴发口蹄疫病的袭击。因此,各国对该病的防范意识不容忽视。本文针对猪口蹄疫的临床流行特点及流行的现状等方面进行综述,为猪口蹄疫病的防制提供参考。 相似文献
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根据GenBank登录的猪细小病毒NADL-2株和China株序列,利用Oligo 6.0软件设计1对扩增NS1全基因的特异性引物,对从贵州省安顺地区检测到的PPV的NS1基因进行扩增、克隆、测序、序列分析和蛋白质结构预测分析。测序结果表明,扩增的目的基因长度为1986 bp,共编码659个氨基酸,其中NS1基因的1287、1288和1298位碱基发生了缺失,导致429、430和433位氨基酸发生缺失。系统发生树结果表明,本试验测序的NS1基因与NADL-2弱毒株处在同一进化分支;氨基酸同源性与NADL-2弱毒株和Kresse毒株最高,均为98.6%。蛋白质结构预测分析结果表明,非结构蛋白NS1的分子质量为75269.76 u,理论等电点pI为7.25,不稳定系数为41.57,推测其为不稳定蛋白质;脂肪指数为73.58,总体平均亲水性为-0.565,推测该蛋白质是一种亲水性蛋白质;该蛋白质含有丰富的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,柔性区域较多,呈连续分布;非结构蛋白NS1无跨膜区和信号肽;预测非结构蛋白NS1含有3个N-糖基化位点、3个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、5个蛋白激酶C磷酸化位点、22个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点、8个N-肉豆蔻酰化位点、1个酰胺化位点及1个ATP/GTP结合位点基序A(P-环);该蛋白质抗原表位较多,存在10个主要的抗原表位。 相似文献