非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A羧基端在PRRSV感染Marc-145细胞中的作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘宁宁  张璐  吕军华  高继明  吴海珍  肖一红  周恩民 《中国预防兽医学报》2011,33(8)

为研究非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A(NMHCⅡ-A)羧基端在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染Marc-145细胞中的作用,本实验通过提取Marc-145细胞总RNA,RT-PCR方法扩增NMHCⅡ-A羧基端930 bp基因PRA,并进行核苷酸序列测定。将该基因连接到pEGFP-N1载体中,采用双酶切和PCR方法对重组质粒pEGFP-N1-PRA进行鉴定。将pEGFP-N1-PRA转染至Marc-145细胞后感染PRRSV,测定TCID50值及间接免疫荧光(IFA)检测PRA对PRRSV感染Marc-145细胞的影响。TCID50及IFA结果显示,与未转染的Marc-145细胞相比,转染pEGFP-N1-PRA的Marc-145细胞的PRRSV感染能力降低50%。本研究初步证明了PRA编码蛋白在PRRSV感染细胞中的作用,为PRRSV感染机制的研究提供了一定的依据。  相似文献   

PRRSV GP5蛋白抗独特型单链抗体的构建表达及鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

于颖  王刚  宋腾飞  孔宁  马晓春  姚永红  肖一红  周恩民 《中国预防兽医学报》2011,33(6)

为制备只包含抗体可变区片段(Fv)的MAb2-5G2单链抗体(scFv),本研究从分泌MAb2-5G2的杂交瘤细胞中提取总RNA,反转录制备cDNA作为模板扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因.以VH-1inker-VL的形式通过重叠PCR制备scFv基因,构建重组表达质粒pEasy-scFv,并在大肠杆菌中获得正确表达.通过western blot和间接免疫荧光鉴定表明scFv蛋白能够被兔抗MAb2-5G2的抗体(Ab3)识别,复性后的scFv蛋白能够特异性结合Marc-145细胞.该研究结果为进一步明确MAb2-5G2结合Marc-145细胞功能区域奠定了物质基础.  相似文献   

1株猪源H9N2亚型流感病毒的分子特征     

赵玉仲  丁国飞  刘家琪  李莉  李英超  王彬  邵清源  冯剑  郭丽红  刘思当  肖一红 《畜牧兽医学报》2020,51(9):2312-2318

旨在进一步了解山东省猪流感的流行情况及其病原特征,笔者于2019年春季,在山东省泰安某屠宰场采集130份猪鼻拭子,进行病毒分离鉴定;并对分离病毒进行全基因组测序和分子特征分析;用禽H9N2亚型标准抗原联合血凝抑制方法检测2018—2019年从山东省8个地区猪场采集的1 527份猪血清样品中的猪流感病毒抗体。结果显示：分离到1株H9N2亚型流感病毒,命名为A/swine/Shandong/TA009/2019（H9N2）。分离病毒与A/environment-air/Kunshan/NIOSH-BL20/2018（H9N2）和A/environment-air/Kunshan/NIOSH-BL25/2018（H9N2）遗传关系最近,其基因片段的核苷酸相似性均在99.5%以上。分离病毒的HA和NA基因属于Y280-like分支,PB2和M基因属于G1-like分支,PB1、PA、NP和NS基因属于SH/F98-like分支。分离病毒HA蛋白裂解位点处的氨基酸序列为“PSRSSR/GL”,符合低致病性禽流感病毒的分子生物学特性。HA蛋白的216位为L,具有结合人源唾液酸α 2,6-Gal的能力。血清学分析结果显示,9份血清中H9N2抗体呈阳性,其总阳性率为0.59%。综上：本研究分离到1株猪源H9N2亚型流感病毒,并在猪血清中检测到H9N2抗体,提示应加强对猪流感的流行情况及其病原特征的持续监测。  相似文献   

鸡常用药物中毒及其防治措施     

肖一红丁宝君  刘思当 《中国禽业导刊》2002,19(18):12-12,13

今年3月5日农业部公布了禁用兽药清单，包括呋喃唑酮、部分磺胺类药物等。选用药物时一定不要选用禁用清单上的药品。  相似文献   

猪附红细胞体病的诊疗   总被引：2，自引：0，他引：2  

肖一红  丁宝君  刘思当 《河南畜牧兽医(综合版)》2002,23(9):13-13

附红细胞体病是由附红细胞体寄生于家畜血液中的红细胞表面或血浆中而引起的一种寄生虫病。以贫血、黄疸、高热为特征。猪附红细胞体病的病原体主要有两种：一种是附红细胞体，另一种是小附红细胞体。后一种对猪不发生致病作用，前一种引起猪发病。１流行病学本病一年四季均可发生，但以夏、秋两季发病较多，一般认为附红细胞体病多发生于夏季，尤其是雨后湿度大的时候。各种年龄、性别、品种的猪均能感染，但以架子猪为多见。一般发病率和死亡率较低，猪多呈隐性感染，仔猪的死亡率较高。猪通过摄食血液或带血的物质，如舔食断尾的伤口、互…  相似文献   

几种猪病的鉴别诊断     

丁宝君  肖一红等 《吉林畜牧兽医》2002,(9):20-21

当今猪病多种多样,诊断相当复杂,本文就猪的布氏杆菌病、伪狂犬病、日本乙型脑炎、细小病毒病以及蓝耳病等在临床上主要引起猪流产的几种类似病的临床症状、病理变化及诊断要点进行论述。  相似文献   

近斯流行猪病的鉴别诊治     

丁宝君  肖一红等 《畜牧与兽医》2003,35(4):27-29

  相似文献   

猪波形蛋白对PRRSV感染Marc-145细胞的抑制作用     

马晓春  孔宁  高继明  王彤彤  黄柏成  赵钦  肖一红  周恩民 《山东农业科学》2012,44(10):1-6,10

为了研究波形蛋白在介导猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染细胞过程中的作用,利用RT-PCR方法从PRRSV非易感细胞系猪肾细胞系PK-15细胞中扩增目的基因,克隆入pET-28a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。表达的重组猪波形蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定和纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。利用病毒抑制试验检测重组猪波形蛋白及多克隆抗体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的作用。结果表明,成功扩增猪波形蛋白基因并克隆入pET-28a载体,经诱导后得到高效表达,纯化后免疫兔子产生高价血清抗体(105)。病毒阻断结果表明,猪波形蛋白及多克隆抗体均能阻断PRRSV感染Marc-145细胞。这为以波形蛋白为基础的PRRSV受体阻断抑制剂的研究提供了实验依据。  相似文献   

非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A羧基端蛋白的真核表达及在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染Marc-145细胞中的作用     

吕军华  刘宁宁  赵钦  马玉萍  张冲  王向鹏  胡守彬  赵菲菲  吴海珍  肖一红  周恩民 《畜牧兽医学报》2012,(9):1455-1462

前期研究结果证明抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的抗独特型抗体特异性结合Marc-145细胞上的非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A(Nonmuscle myosin heavy chainⅡ-A,NMHCⅡ-A)蛋白,其结合位点位于NMHCⅡ-A的羧基端。本研究通过真核表达NMHCⅡ-A的羧基端(PRA)蛋白,验证其对PRRSV感染Marc-145细胞的作用。通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达PRA蛋白。Western blot和间接免疫荧光鉴定PRA蛋白的表达及其与Marc-145细胞的结合。通过病毒中和试验、荧光聚焦中和试验和荧光定量PCR检测PRA蛋白对PRRSV感染Marc-145细胞的作用。Western blot和间接免疫荧光结果表明,PRA蛋白在真核细胞中得到成功表达,其最高表达量为接种1个MOI杆状病毒后96h时。PRA蛋白特异性结合Marc-145细胞,使PRRSV感染Marc-145细胞延迟24h并且感染效率降低60%。真核表达的NMHCⅡ-A羧基端蛋白能特异性结合Marc-145细胞并有效降低PRRSV的感染。这些结果为进一步阐明NMHCⅡ-A在PRRSV感染细胞过程中的作用提供了新的依据。  相似文献   

鸡常用药物中毒的诊治及其原因浅析     

肖一红  丁宝君  刘思当 《水禽世界》2003,(1):28-30

随着养禽业的发展，疾病的发展也在不断地变化。为防止各种疾病的发生，投药是不可避免的。但如果投药的方法不当（如剂量过大或用药时间过长），则会引起药物中毒，严重影响鸡的健康和生产性能，甚至造成大批死亡，给养鸡业造成不应有的损失。现就鸡常用药物中毒的原因及其预防措施简述如下。１中毒诊治１．１喹乙醇中毒１．１．１临床症状一般中毒情况下，常是强壮鸡突然抽搐或角弓反张，倒地死亡。有时可见冠髯发绀，扭颈转圈，口流粘液，脚软甚至瘫痪。鸡群时有拉稀，重者下痢，偶有发呆。死亡时间不集中，常呈散发型式，几乎每天死亡由…  相似文献