应用酶联免疫技术检测动物源性食品中四环素类抗生素残留的研究   总被引：16，自引：0，他引：16  

张子群  李维刚  金宁  梁建新 《黑龙江畜牧兽医》2003,(3):31-33

测定的基础是竞争性酶联免疫反应。四环素标准品或样品中游离的四环素与微孔板中的固相四环素（包被结合到蛋白上的四环素）竞争数量有限的四环素抗体，洗去没有连接的四环素抗体，加入酶标记物，酶标记物与四环素抗体结合的数量反比于游离的四环素的数量，以TMB-H2O2为底物，测量450nm波长的吸光值，按标准曲线计算样品中四环素的含量。此方法测定了线为150ng/kg，实验证明特异性，精密度及添加回收率符合目前国际上四环素类抗生素残留量检测的要求。  相似文献   

奶牛在夏季分娩后卵巢机能的恢复     

金宁一 《吉林畜牧兽医》1985,(4)

本文探讨了奶牛分娩后卵巢机能恢复状况及其与营养摄取状态间的关系。供试牛是1982年5月～6月间分娩的奶牛。分娩后70天内,每周采三次乳汁,测定其中的孕酮含量。另外,为了诊断是否有卵巢疾患,每周直检一次。检查给料情况,然后按照日本饲养标准计算出 TDN(可消化总养分)百分率。  相似文献   

禽流感疫苗的研究进展     

海洋  金宁一  陈晓月  李昌  邹伟 《今日畜牧兽医》2008,(1):39-40

禽流感(AI)是由禽流感病毒(AIV)引起的一种禽类传染病。根据AIV对易感鸡致病性的差异,可将AIV分为高病性AIV(HPAIV)和低致病性AIV(LPAIV)。  相似文献   

鸡痘病毒282E_4弱毒株基因组EcoRI酶切片段的克隆     

刘东海  金宁一  刘景华  殷震 《中国兽医学报》1991,(1)

鸡痘病毒含有动物病毒中最大的基因组.本研究以pUC18质粒作载体,对鸡痘病毒282E_4弱毒株基因组的EcoRI酶切片段进行了鸟枪法克隆及5.5kb EcoRI片段的定向克隆.根据β-半乳糖苷酶显色反应选择法的初步筛选和以[α-~(32)P-dATR]标记的鸡痘病毒DNA为探针进行的原位杂交、打点杂交以及Southem印迹杂交结果,证实已成功地克隆了鸡痘病毒的某些DNA片段.  相似文献   

痘苗病毒高效表达载体的构建研究   总被引：9，自引：4，他引：5  

金宁一  舟桥 《中国兽医学报》1994,14(1):5-13

构建了能使重组痘苗病毒在感染早期和晚期高效表达外源基因的痘苗病毒载体，表达效率高于迄今报道的任何一个痘苗病毒载体。应用这种新型痘苗病毒载体表达氯化乙酰转移酶（ＣＡＴ），１０６感染细胞中的最高表达量达６０μｇ左右，占细胞总蛋白的１８％。在病毒感染早期，突变型Ｐ７．５启动子表达ＣＡＴ的量比天然的Ｐ７．５启动子高７倍。  相似文献   

痘苗病毒在猪体上的驯化   总被引：2，自引：0，他引：2  

金宁一  武德丽 《中国兽医学报》1987,(3)

本实验应用猪体和猪胎皮肤细胞对痘苗病毒天坛株进行了复壮传代,使其适应在猪体上增殖。对细胞传代毒和疱皮毒分别作了感染力测定、猪体发疱试验和电镜检查,并对传代适应毒进行了空斑纯化,再将25个空斑克隆株分别复归猪体,结果均能明显发疱。证明痘苗病毒通过猪胎皮肤细胞反复传代,可以较快适应猪体增殖。  相似文献   

我国部分地区新城疫病毒分离株生物学特性的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

王兴龙  金宁一  丁壮  金扩世  米志强  雷连成 《动物医学进展》2001,22(3):65-68

从北京、昌黎、广州、长春、四平、青岛等地区采集疑似新城疫病鸡的病料，通过鸡胚接种分离出6株病毒，经血凝、血凝抑制试验和形态学观察，鉴定为新城疫病毒（NDV），分别命名为北京株、昌黎株、广州株、长春株、四平株、青岛株。测定了这6株NDV的致死鸡胚的平均时间（MDT）和脑内致病指数（ICPI），MDT分别为58．2，64．5，55．2，96。0．61．2和57．9h，ICPI分别为1．66，1．45，1．60，0．69，1．45和1．65。由这两项指标判定北京株、广州株、青岛株为强毒株，昌黎株和四平株为中强毒株，长春株为弱毒株。此外,还测定了6株NDV的血凝谱，各毒株均能凝集鸡和人（O型血）的红细胞，对猪、山羊、绵羊、牛和马的红细胞凝集作用有差异。  相似文献   

应用Bac to Bac 系统表达NDV长春株HN蛋白基因   总被引：2，自引：1，他引：1  

丁壮  金宁一  王兴龙  金扩世  王宏伟  米志强  殷震 《动物医学进展》2001,22(2):56-58,82

将质粒pKSHNC利用BamHI和XbaI双酶切后回收。将转座载体pFast BacI同样方法酶切、回收。将回收的HNC与pFastBacI连接，使目的基因亚克隆到pFast BacI上的ocu基因启动子下游的MCS上，然后转化E.coliDH5α，以LB／AMP＋GM平板筛选阳性重组子，经酶切鉴定，再转化至Ecoli DH10Bac感受态细胞中，经抗性培养和蓝白斑筛选，挑取白色菌落为阳性重组表达载体，经酶切鉴定后，命名为Bacmid HNC。经小量提取后，转染sf-9细胞，27℃培养72h，应用SDS－PAGE和Western-blot检测和鉴定表达的HN蛋白。结果表明，本研究成功地构建了BacmidHN重组表达载体，本研究成功地构建了BacmidHN重组表达载体，并在sf-9昆虫细胞中表达了NDV长春株HN基因，SDS－PAGE出现一条特异性泳带，约74kDa，Western-blot结果出现一条杂交带，分子量与之相同，进一步证明我建的重组表达载体表达了NDV长春株HN基因。  相似文献   

羊源乙肝病毒与人乙肝病毒S基因序列同源性研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

丁壮  金宁一  陈创夫  邹啸环  王承宇 《动物医学进展》2001,22(4):54-58

为深入探讨动物乙肝与人乙肝之间的相关性，对用人乙肝诊断试剂盒检测出来的“三阳”（HBsAg、HBeAg、抗－HBc)羊源的乙肝病料进行了病毒分离和形态学鉴定，并以人乙肝病毒S基因两侧的保守区域作为模板，采用套式PCR方法扩增出羊源乙肝病毒部分基因。序列分析结果表明，羊源乙肝病毒与人乙肝病毒在S基因上核苷酸序列有一定的同源性，但差异是较大的。  相似文献   

猪圆环病毒2型内蒙古株全基因组的克隆及序列分析   总被引：2，自引：2，他引：0  

秦晓冰  金宁一  郑敏  马鸣啸  鲁会军  张洪勇  尹革芬  葛淑敏  邹啸环 《中国兽医学报》2004,24(4):352-354

取内蒙古某猪场疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征 (PMWS)病猪的肝、淋巴结、肺、脾等器官组织病料 ,处理后负染 ,透射电镜观察到约 17nm的病毒粒子。用 PCR法从病料中扩增获得 2型猪圆环病毒的全基因组序列 ,其全长为176 7bp,与 Gen Bank中公布的 11株 PCV- 2型序列比较 ,同源性为 95 .2 %～ 99.8%  相似文献