猪繁殖与呼吸综合征病毒SGQ株M蛋白基因截断片段原核表达载体构建及其表达的初步研究     

陈进会  冯迎春  颜其贵  黄伟  韩国全  万莉  雷燕  王志彪 《动物检疫》2010,(12):37-39,44

为表达猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）M蛋白主要抗原表位基因序列,参照GenBank中发表的PRRSVSCQ株M蛋白基因设计并合成一对特异性引物,通过PCR方法从重组质粒pMD18-T-M扩增得到缺失N端跨膜区的M蛋白基因片段dM（deletingM）,将其与pMD19-Tsimplevector连接,经测序正确后克隆至高效原核表达载体pGEX-4T-1,得到重组表达载体pGEX-4T-1-dM,并将其转化大肠杆菌Rosetta（DE3）,经IPTG于37℃诱导,PRRSVM基因获得表达。经SDS-PAGE分析,所表达的融合蛋白分子量约为35kDa。以纯化的重组蛋白作为抗原,经WesternBlot分析结果表明该重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别,可用于PRRSV的检测。  相似文献   

四川省部分猪场公猪精液带毒情况的PCR和RT—PCR检测     

冯迎春  黄攀  颜其贵 《养猪》2010,(5):71-72

近几年来,猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病仍然是危害我国养猪生产的主要病毒性传染病,特别是2010年四川部分地区发生的以高发病率和高死亡率为特点的“高热病”中,猪瘟病毒和蓝耳病病毒的检出率极高,猪乙型脑炎和细小病毒病也时有发生。而这几种病的病原不仅能水平传播,还能通过母猪胎盘和公猪精液垂直传播。  相似文献   

霉菌毒素对猪生殖的影响   总被引：5，自引：0，他引：5  

张蕾  权自芳  颜其贵  韩国全  万莉 《饲料工业》2012,33(12):34-36

霉菌毒素是由霉菌或真菌产生的无色、无臭、无味的有毒害作用的次级代谢产物,主要由霉变的饲料、谷物所产生。猪场,特别是卫生条件相对较差的猪场普遍都受到霉菌毒素的影响,从而引发猪产生疾病,表现出一系列的临床中毒症状,对猪的繁殖影响较大,引起严重的经济损失。文中主要综述常见的霉菌毒素对猪生殖的影响,以及简单的防治措施。  相似文献   

猪源粪肠球菌的分离鉴定     

舒蕾  刘杰  刘丹  马磊  张琦  颜其贵 《动物科学与动物医学》2012,(6):84-86

对来自四川地区送检病猪采样分离到2株致病性革兰氏阳性球菌进行分离纯化,根据培养形态、理化特性和16S rRNA序列同源性分析,综合判定所分离菌株为粪肠球菌,采用纸片扩散法进行药物敏感性实验,结果显示分离的致病菌均对供试的头孢唑啉钠、利福平药物高度敏感,对氯苄西林．红霉素、氧氟沙星等药物不同程度耐药,根据结果制定相应防治措施,经处理后,病情得到控制。  相似文献   

夏季猪群常见病的综合防控     

潘海波  韩国全  马磊  王彬  万莉  张琦  冯迎春  颜其贵 《猪业科学》2012,29(5):46-47

夏季高温高湿环境有利于病原微生物的大量繁殖,极易给养殖户带来严重的危害。为了预防和控制夏季猪病的发生和流行,通过采取“强化饲养管理、做好防暑保健、定期驱虫消毒、坚持科学免疫、加强疫病检疫和监测’等综合防控措施,降低夏季猪病的发生率和死亡率,保障养猪业健康发展。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株ORF5基因在E.coli中表达的初步研究     

颜其贵  张传斌  郭万柱  欧洋  肖雪  曹洪志  韩国全  樊汶樵 《黑龙江畜牧兽医》2007,(7):29-31

根据已测定的猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株序列设计1对引物,应用PCR方法从重组质粒PMD-ORF5扩增得到缺失信号肽序列的基因片段dORF5,将dORF5克隆至原核表达载体PBAD/Myc-His B上,成功地构建了重组表达质粒PBAD/Myc-His B-dORF5,转化大肠埃希菌TOP10感受态细胞,经阿拉伯糖诱导表达,SDS-PAGE可检测到分子质量约为19.4 ku的目的蛋白,经蛋白质分析软件Bandscan分析,其表达量可达17.1%。Western blotting分析结果表明,该重组蛋白可被兔抗PRRSV血清所识别,这为进一步研究GP5蛋白的结构、功能和开发新型诊断试剂盒、新型疫苗提供了理论与物质基础。  相似文献   

犬淋巴外渗的诊治     

樊汶樵  颜其贵  曹洪志  王英柱  林涛 《中国兽医杂志》2007,43(12):69-69

1基本情况英国斗牛犬,约8岁,体重20 kg左右。约1年前发现耳后有一豌豆大小的疙瘩,当时未引起重视。发病前1个月,发现疙瘩开始逐渐增大,曾采用封闭疗法,后用青霉素、链霉素治疗未见好转,疙瘩继续增大。除该疙瘩增生之外未见其他异常情况。2临床检查患犬体温38.5℃,呼吸21次/min,心跳73次/min,精神好,食欲正常,营养良好,左侧颈中部有一增生物,似鹅蛋大小,触之无热痛感,柔软有波动。局部消毒后行穿刺术,有淡黄色透明液体流出。诊断为淋巴外渗。3治疗过程患部剪毛消毒,周围用1%普鲁卡因分5点封闭注射,3 min后用手术刀在肿胀正中部切开约5 cm切口…  相似文献   

猪细小病毒SC1株非结构蛋白NS1基因的原核表达及PPA-NS1-ELISA的初步建立     

陈进会  郭万柱  殷华平  颜其贵  徐志文  王印  罗燕  王小玉 《中国兽医学报》2007,27(1):13-16

含有猪细小病毒SC1株非结构蛋白NS1基因的重组质粒pPNS1通过EcoR Hind双酶切后,回收NS1基因,将其亚克隆进原核表达载体pET30a( )中,构建了重组表达质粒pET-NS1,转入表达宿主菌BL21中,通过IPTG的诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明,重组NS1蛋白高效表达,以包涵体形式存在,占细菌总蛋白的26.7%。并确定了NS1蛋白的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.6mmol/L,诱导时间为3h。Westernblotting检测表明,表达产物具有良好的免疫原性。重组蛋白经纯化后作为抗原,包被酶标板,以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白作为二抗,建立了辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白的酶联免疫吸附试验(PPA-NS1-ELISA)。结果表明,抗原最佳包被质量浓度为31.3mg/L,血清最佳稀释度为1∶40。阳性标准初步定为:待检血清D490>0.32,且待检血清D490/阴性血清D490>2.0。  相似文献   

一株扭角羚弗格森埃希菌的分离鉴定及药敏试验     

叶泥  权自芳  王彬  谌利民  杨艳  颜其贵 《动物医学进展》2015,(2):68-71

从四川省某自然保护区2014年5月送检的一只死亡青年扭角羚的肝脏中分离到1株杆菌,并对该分离株进行了生化试验和药物敏感试验。菌株纯培养后,通过菌落PCR方法扩增16SrDNA,并测定PCR产物序列,结合16SrDNA测序结果及生化特性,确定该分离株的生物学分类,然后利用药物敏感试验确定了该菌的耐药情况。将该菌株16SrDNA测序结果在NCBI数据库中Blast同源性比较分析,发现它与弗格森埃希菌相似度超过99%,结合菌株生化试验结果,确定该菌株为弗格森埃希菌。药物敏感试验结果显示,此分离株对环丙沙星、氟苯尼考、头孢他啶、丁胺卡那等敏感,对氨苄西林耐药。  相似文献   

四川某些规模化猪场大肠杆菌的分离鉴定及耐药性监测     

舒蕾  万莉  张琦  马磊  谢智勇  杨映  郭玲  颜其贵 《中国兽医杂志》2012,48(3):32-34

为有效监测四川某地区猪致病性大肠杆菌的耐药性,本试验采用纸片扩散法对采自该地区不同区域的8个猪场的70株致病性大肠杆菌进行药物敏感性测定,结果表明,分离菌对12种药物存在不同程度的耐药性:对阿莫西林、红霉素高度耐药,耐药率分别为100％、82.86％,敏感性最高的氧氟沙星、头孢唑啉敏感率分别为82.86％、60％,所有菌株耐药性至少3耐,最高达11耐,51.43％呈7耐以上,共39种耐药谱型.由此可见,该地区规模化猪场大肠杆菌耐药程度严重.故筛选有效抗生素,采取必要措施防治此病已势在必行.  相似文献