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101.
AIM: To investigate the cell cycle arrest induced by hypoxia, hypoxia inducible factor-1 and their possible mechanism in human ovarian cancer cell line SW626. METHODS: CoCl2, a chemical inducer of hypoxia and hypoxic cell culture chamber were used to induce chemical and physical hypoxia in human ovarian cancer cell line SW626. The method of ‘decoy’ was used to block the function of HIF-1α because it acts as the core sequence of the target gene as a competitor combined to the HIF-1α. The cells were divided into group A1 (normal oxygen), A2 (normal oxygen plus HIF-1α decoy), B1 (CoCl2), B2 (CoCl2 plus HIF-1α decoy), C1 (hypoxia) and C2 (hypoxia plus HIF-1α). The expression of the HIF-1α protein, mRNA and cell cycle analysis were detected by Western blotting, RT-PCR and flow cytometry (FCM). RESULTS: The expression level of HIF-1α protein in group B1 (3.75±1.31) and group C1 (3.48±1.01) was significantly higher than that in group A1 (0.97±0.31) (P<0.05). The expression levels of HIF-1α mRNA in group A1 (0.65±0.32) and group B1 (0.64±0.34) were significantly lower than that in group C1 (1.28±0.62) (P<0.05). Decoy had no effect in the expression of HIF-1α protein and mRNA level (P>0.05). FCM showed that the G0/G1 phase was markedly increased in group B1 (81.78±24.33) and group C1 (77.62±22.76) and was significantly higher than that in group A1 (49.49±18.54) (P<0.05), group B2 (61.54±20.84) was lower than that in group B1 with statistical significance (P<0.05) and group C2 (56.03±21.42) was lower than that in group C1 with statistical significance (P<0.05) , but the difference between group A1 and group A2 (51.77±16.45) had no statistical significance (P>0.05). CONCLUSION: Both CoCl2 and physical hypoxia could distinctly induce cell cycle arrest in G0/G1 phase and the expression of HIF-1α in human ovarian cancer cell line SW626. HIF-1α plays an important role in cell cycle arrest induced by hypoxia in human ovarian cancer cell line SW626. 相似文献
102.
103.
应用cDNA微阵列芯片技术筛选猪蛔虫性别差异表达基因的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
采用cDNA微阵列芯片技术,从所构建的猪蛔虫雌、雄成虫cDNA消减文库分别挑取1044和1119个克隆,PCR扩增其插入片段,经纯化后点样于预先处理好的基片上(双点杂交),制备成cDNA微阵列芯片。将分别标记荧光素Cy3-dUTP和Cy5-dUTP的雌虫和雄虫cDNA探针,与制备好的cDNA芯片杂交(平行进行反标杂交试验)。根据每个点杂交后的Ratio值,筛选出双点杂交和正反标中都同时具有表达差异的基因克隆共1559个。将表达差异最明显的前831个克隆进行测序,获得720个有效序列,经生物信息学分析发现,雄虫特异表达的主要精于蛋白和雌虫特异表达的卵巢信息蛋白的基因序列多数与新杆属线虫存在同源性,有31个可能是新的ESTs。性别差异表达基因及其相关生物信息的获得为下一步研究基因功能奠定了基础。 相似文献
104.
为探讨伊氏锥虫对安锥赛抗药性的分子机理,以布氏锥虫对砷剂药物抗药性相关的TbTA1基因设计引物,以55℃、57℃、60℃、63℃和65℃不同退火温度,分别从伊氏锥虫敏感株的cDNA和基因组DNA中扩增出TbTA1基因的全长序列,但是从安锥赛抗药株伊氏锥虫的cDNA和基因组DNA中都未扩增出TbTA1基因,这表明基因TbTA1可能与伊氏锥虫安锥赛抗药性的产生有关。伊氏锥虫与布氏锥虫的,TbTA1基因序列比较,它们有10个碱基不同,即第88位的G(T.e)-A(T.b)、第144位的T(T.e)-C(T.b)、第224位的C(T.e)-T(T.b)、第471位的C(T.e)-T(T.b)、第472位的A(T.e)-G(T.b)、第549位的G(T.e)-T(T.b)、第1008位的C(T.e)-T(T.b)、第1033位的A(T.e)-G(T.b)、第1293位的A(T.e)-G(T.b)和第1384位的T(T.e)-C(T.b),其中有5个碱基所编码的氨基酸不同,即Val^30(T.e)Ile(T.b)、Ala^75(T.e)-Val(T.b)、Ile^158(T.e)-Val(T.b)、Thr^345(T.e)-Ala(T.b)和Ser^462(T.e)-Pro(T.b),这表明伊氏锥虫与布氏锥虫的TbTA1差异可能是它们的种间差异。 相似文献
105.
一株无血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及其衣壳蛋白VP60基因的克隆和序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从临床病料中分离鉴定出1株无血凝性的致病性兔出血症病毒(RHDV),命名为Yaan-1。HA试验测得该毒株原代及经兔体传3代后的肝毒在25℃、37℃和4℃时均无血凝性;但在琼脂扩散试验和对流免疫电泳中均可见分离株与常规RHDV高免血清形成清晰的沉淀线;电镜观察可见30nm左右的病毒粒子。采用RT-PCR方法将Yaan-1株的衣壳蛋白VP60基因进行了克隆测序,序列分析表明VP60基因序列全长1740bp,编码579个氨基酸,测序结果提交GenBank(注册号为DQ069280),并与世界各国的常规RHDV分离株进行比较,结果表明核苷酸同源性为90.0%~98.0%,氨基酸同源性为94.1%~99.0%,氨基酸变异多发生在衣壳蛋白C、E区;同时对Yaan-1株的分子量、等电点、疏水性、跨膜区等分子结构特征进行了分析。本研究首次报道了无血凝性RHDV中国分离株,丰富了地方毒株资源,为明确我国地方株的分子流行病学,以及对VP60蛋白分子特征研究提供了新材料。 相似文献
106.
107.
本研究经过菌落形态、染色形态、生化实验以及PCR实验,从来自湖北4个鸭场的81份病料中,分离到11株鸭疫里默氏茵。以5.0×10~8CFU/mL剂量感染健康昆明鼠和健康樱桃谷鸭,鼠和鸭分别在感染后7 h和12 h出现症状,直到感染后1周,实验动物均死亡,而对照组则未出现任何症状,表明该菌株为有毒力菌株,药物敏感实验结果显示部分细菌对某些药物已经产生耐药性。 相似文献
108.
109.
选取体重相近、健壮的4周龄合浦鹅60羽,随机分为稻草粉组、玉米秸秆粉组和花生藤粉组,每组20羽,饲养42 d。于8周龄时从上述试验组中各选取5羽体重接近的鹅,测定其对3种纤维来源的饲粮养分的利用率。结果表明,(1)饲喂含粗蛋白质约为13.80%,粗纤维约为8.0%的饲粮,稻草粉、玉米秸秆、花生藤用作饲粮纤维来源,不影响合浦鹅的日增重、血清生化指标和屠宰性能(P>0.05)。(2)花生藤粉组饲粮的中性洗涤纤维、半纤维素和无氮浸出物的表观代谢率极显著高于其他2组(P<0.01);稻草粉组和花生藤粉组的饲粮粗蛋白质、能量的代谢率显著高于玉米秸秆粉组(P<0.05)。 相似文献
110.
LI Hong-lian WANG Shao-hui LIAO Xiao-mei WANG Xiao-chuan WANG Qun WANG Jian-zhi 《园艺学报》2006,22(3):506-510
AIM: To probe into tau hyperphosphorylation at PHF-1 sites induced by glycogen synthase kinase-3β (GSK-3β) in vivo. METHODS: Twenty-one rats were randomly allocated to three groups as follows: GSK-3β transfection group, vector group and control group; 0.1 μg/3 μL GSK-3β-HA plasmid or vector was injected bilaterally into cerebrum of the rats respectively, rats without injection were controls. Western blotting and immunohistochemical staining of cortex were carried out to detect the expression of GSK-3β-HA plasmid and tau phosphorylation using phosphorylation-dependent tau antibody PHF-1. RESULTS: After transfection with GSK-3β-HA for 48 h, GSK-3β-HA was expressed in GSK-3β transfection group; and hyperphosphorylated tau at PHF-1 sites accumulated in neurons in the transfected areas. The hyperphosphorylated tau colocalized largely with GSK-3β expressed by the transfected GSK-3β plasmid. CONCLUSIONS: Transfection with GSK-3β in vivo can induce tau hyperphosphorylation involving the pathogenesis of neurodegenerative disorders. These data further prove that GSK-3β is a key kinase to induce tau hyperphosphorylation and may be a therapeutic target for tauopathy-related neurodegenerative diseases. 相似文献