In vitro metabolism of ovarian steroids by bovine whole blood and plasma     

R.R. Lesniewski  J.D. Kirsch  L.E. Mrozinski  D.H. Hellwig  J. Kotwica  G.L. Williams 《Domestic animal endocrinology》1985,2(3):141-150

Experiments were conducted to evaluate the effects of time and temperature on the potential of bovine whole blood (WB) or plasma (PL) to metabolize the ovarian steroids progesterone, estradiol-17β and testosterone. During a radioimmunoassay study (Experiment 1), we observed a temperature and time-dependent reduction (P<0.001) of plasma progesterone concentrations in samples incubated as WB at 5, 15, 25, or 35C for up to 48 hr. Most notable was the observation that 27% of progesterone present in controls was lost when WB was incubated at 5C for 48 hr and a 17% reduction was observed when PL samples were incubated at 35C for 48 hr. Immunoreactive estradiol-17β concentrations (Experiment 2) in PL and WB incubates were not affected by time or temperature. However, immunoreactive testosterone concentrations increased more than 3-fold by 48 hr in WB incubates held at 35C. To examine the latter observation further, ³H-progesteone was incubated with WB at 35C, followed by extraction and thin-layer chromatography (Experiment 3). Results generally supported RIA findings and revealed the presence of significant 17α-hydroxylase, 17–20 lyase and aromatase activity. Heretofore this has not been considered to occur outside major steroid metabolizing organs.  相似文献   

长期施肥下红壤旱地CO2、N2O排放特征     

黄晶  刘宏斌  王伯仁 《勤云标准版测试》2009,29(24)

摘 要：基于中国农业科学院红壤实验站长期定位试验，采用静态箱/气相色谱法，研究红壤旱地小麦生长季节不同施肥处理(CK、NP、NPK、NPKM、1.5NPKM)下土壤CO2、N2O排放差异。结果表明，长期不同施肥处理形成不同的土壤肥力以及作物生长的差异是影响土壤呼吸CO2、N2O排放的重要因素，红壤旱地小麦季土壤呼吸CO2、N2O排放具有明显的季节变化特征；在小麦生长季，不同施肥处理之间土壤呼吸CO2、N2O排放通量差异显著，土壤呼吸CO2年累积排放量在8284.02 kg?ha-1～15863.48 kg?ha-1之间，N2O年累积排放量在0.37 kg?ha-1～2.04 kg?ha-1之间。各处理土壤呼吸CO2排放通量的大小变化：1.5NPKM>NPKM>NPK>CK>NP；土壤呼吸N2O平均排放通量大小顺序为1.5NPKM>NPKM>NPK>NP>CK；有机肥的施用显著增加了土壤呼吸CO2和N2O的排放(P<0.05)。土壤呼吸CO2与N2O排放分别与土壤温度和土壤水分显著相关性。  相似文献   

羧甲基壳聚糖对Mg~(2+)的吸附性能研究     

宋吉英 《青岛农业大学学报(自然科学版)》2009,26(2):160-162

研究羧甲基壳聚糖对Mg2+的吸附作用,探讨了溶液的pH、吸附时间、温度等因素对吸附率的影响。实验表明,在pH值为4~5时,羧甲基壳聚糖对Mg2+的吸附性能很好,其饱和吸附容量为106mg/g,方法的相对标准偏差为9.6%。  相似文献   

云南松针叶的耐火性模型研建   总被引：1，自引：0，他引：1  

李世友  刘文胜  左勇  刘会龙  赵文静  刘金龙 《林业资源管理》2009,(6)

用自行设计的装置对云南松针叶进行了耐火性试验,根据在1%红四氮唑溶液中浸泡后基部的颜色判别针叶的死活,计算了针叶在不同试验条件下的死亡率,建立了云南松针叶死亡率与平均叶长、受热时间、受热温度的关系模型。分析表明,影响云南松针叶耐火性的因子依次为受热温度>受热时间>平均叶长,宿存叶鞘对针叶有一定的保护作用。  相似文献   

玉米苗期耐碱性鉴定方法研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

崔美燕  高树仁  付艳  刘文研  蔡鑫鑫  李帅 《黑龙江八一农垦大学学报》2008,20(5)

在三叶一心期,用一定浓度梯度的Na2CO3溶液（5～25mmol&#183;L^-1）对玉米幼苗进行胁迫处理,观察其生长情况,7d后测定地上部分株高、鲜重、干重等生理指标。研究表明,各项生理指标均随Na2CO3溶液浓度的增加而降低,并在各碱浓度间、自交系间达极显著差异。综合苗情及各生理指标的变化,初步确定可以将25mmol&#183;L^-1 Na2CO3溶液作为玉米苗期耐碱性筛选的理想浓度,将该浓度下的苗情及株高、鲜重、干重及含水量变化率作为玉米苗期耐碱性筛选的鉴定指标。  相似文献   

益智药乙拉西坦的合成和结构表征     

旷春桃  胡艾希 《中南林学院学报》2006,26(2):129-130,137

以2-溴丁酸甲醵为起始原料，经氨解反应、N-烷基化反应合成了乙拉西坦，总收率为45.6％，改进后的工艺路线反应时间缩短、收率提高;并用IR、^1HNMR、^13CNMR对乙拉西坦进行了结构表征．  相似文献   

PLCγ1基因对绵羊早期胚胎体外发育的影响     

吴晓雪  袁利明  刘欣杰  刘素平  陈宁  赛务加甫 《畜牧兽医学报》2022,53(8):2578-2585

旨在探究磷脂酶Cγ1（phospholipase Cgamma 1,PLCγ1）基因对绵羊早期胚胎体外发育的影响,为揭示PLCγ1基因在早期胚胎发育过程中的作用机制奠定基础。本研究选取包裹3层以上颗粒细胞的绵羊卵母细胞为试验材料,体外培养成熟后将其分为两组,利用显微注射技术将PLCγ1基因导入MⅡ期（减数第二次分裂中期）卵母细胞（n=127）中为试验组,以显微注射空载体pcDNA3.1-EGFP作为对照组（n=120）,经48 h后统计其卵裂率;并利用Ca²⁺探针Rhod 2-AM监测MⅡ卵母细胞和显微注射后16、48、72、96、120 h时各时期卵母细胞以及早期胚胎内Ca²⁺波动。结果显示,PLCγ1基因显微注射后卵母细胞被激活,卵裂率为（（19.67±0.2）%,P<0.01）,桑椹胚发育率为（（9.00±0.17）%,P<0.05）;PLCγ1基因注射后,卵母细胞和早期胚胎不同发育时期有Ca²⁺浓度变化,可观察发现Ca²⁺主要分布在胞质中且注射48 h时可达到峰值（P<0.01）。结果表明,PLCγ1基因可以引起绵羊卵母细胞发育过程中发生Ca²⁺振荡,启动其卵裂,并促使早期胚胎的继续发育。  相似文献   

宿主膜联蛋白A2与伪狂犬病病毒US3蛋白互作及其对细胞凋亡的影响     

郭振华  李翔  翁茂洋  金前跃  郭军庆  邢广旭  张改平 《畜牧兽医学报》2022,53(11):3927-3935

US3蛋白激酶是伪狂犬病病毒（PRV）的一个重要毒力因子,研究显示US3参与了细胞骨架重排、病毒复制和传播、细胞凋亡和干扰素信号通路等多个生物学过程,鉴定新的和US3互作的宿主蛋白对于认识其生物学功能具有重要意义。本研究首先利用免疫共沉淀和pull-down技术验证了US3和宿主膜联蛋白A2（ANXA2）的相互作用;然后利用RNAi技术,通过荧光定量PCR、病毒滴度测定和免疫印迹分析,发现敲低ANXA2的表达显著抑制了PRV在PK-15细胞上的增殖;进一步发现过表达ANXA2可以抑制PRV或者凋亡刺激剂诱导的细胞凋亡,提示ANXA2具有负调控细胞凋亡的作用。本研究进一步完善了可以和US3蛋白互作的宿主蛋白成员,加深了人们对ANXA2生物学功能的理解。  相似文献   

昆明犬IGF2基因克隆、生物信息学分析及其时空表达研究     

韦云芳  李飞翔  星云  黄庆国  李居东  万九生  陈方良 《中国畜牧兽医》2022,49(3):866-875

【目的】 克隆昆明犬胰岛素样生长因子2（IGF2）基因并研究其序列特征及时空表达规律,为工作犬体型及生长发育相关研究提供基础资料。【方法】 采用PCR法扩增昆明犬IGF2基因CDS区,运用生物信息学分析预测昆明犬IGF2蛋白的结构与功能;利用实时荧光定量PCR技术检测IGF2基因在2.5月龄昆明犬心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及大腿内侧肌肉和不同年龄段肝脏中的表达情况。【结果】 昆明犬IGF2基因CDS区全长717 bp,编码238个氨基酸;系统进化树分析显示,昆明犬IGF2基因与赤狐的遗传距离最近,与鸡的遗传距离最远。生物信息学分析表明,IGF2蛋白分子质量为26.46 ku,理论等电点为9.61,无信号肽和跨膜结构,属于亲水性非分泌蛋白;主要分布于细胞核（47.8%）和线粒体（17.4%）,存在23个磷酸化位点;该蛋白的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,三级结构与二级结构预测结果相符。组织表达谱分析显示,IGF2基因在2.5月龄昆明犬肝脏中相对表达量最高,且极显著高于肾脏、肺脏及肌肉组织（P<0.01）;仔犬期（2.5月龄）肝脏中的IGF2基因的表达量极显著高于幼犬期（6月龄）、青年期（1岁）及成年期（1.7和2.5岁）（P<0.01）。【结论】 本研究成功克隆昆明犬IGF2基因,并发现IGF2在多个组织广泛表达,在肝脏中的表达量最高,可为深入探讨昆明犬IGF2基因在生长发育中的调控机理提供参考。  相似文献   

1型鹅星状病毒ORF2蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定     

刘莉  顾玲玲  张硕  谢军  朱善元  王安平 《中国畜牧兽医》2022,49(1):368-374

[目的] 利用原核表达系统表达1型鹅星状病毒（Goose astrovirus 1,GAstV-1）结构蛋白ORF2,并制备其多克隆抗体。[方法] 根据GAstV-1 TZ03株基因序列,对ORF2基因序列进行大肠杆菌密码子偏爱性优化和合成,将其克隆至原核表达载体pET-30a（+）,构建重组质粒pET-ORF2,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达重组蛋白,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白;将鉴定正确的重组蛋白纯化后免疫家兔制备多克隆抗体,以间接免疫荧光试验鉴定多克隆抗体的特异性。[结果] 酶切和测序结果显示,成功获得重组质粒pET-ORF2;SDS-PAGE结果显示,表达的重组蛋白分子质量约为70 ku,主要以包涵体形式存在;Western blotting结果表明,该蛋白能与抗His标签鼠单克隆抗体发生特异性反应。间接ELISA检测制备的兔抗ORF2蛋白多克隆抗体效价达1：128 000;间接免疫荧光试验结果显示,制备的多克隆抗体能与GAstV-1发生特异性反应。[结论] 原核表达的GAstV-1 ORF2重组蛋白具有良好的免疫原性,制备的兔源多克隆抗体具有较高的效价和特异性,为研制GAstV-1相关诊断试剂奠定了基础。  相似文献