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表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析 总被引:1,自引:0,他引:1
利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3 vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。 相似文献
22.
以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
摘要:以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg/孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板,用10%免血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 相似文献
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杭州市为减少农牧生产给城市环境带来的污染,对畜牧产业结构作了强有力的调整,实行杭州市区禁养与限养的规定。2002年老城区与西湖风景区内全面实行禁养,畜牧场与个体农户饲养的家畜一律收购处理。2004年内西湖、拱墅、江干等实行全面禁养。牧场、奶牛场一律外迁;余杭、肖山等区实行限养,并对现有牧场制定污水污物净化处理达标的规定。 相似文献
25.
从20世纪90年代以来,国有企业的债务困境问题成为制约国有企业改革和发展的一个突出问题。本文通过建立债务重组模式,来讨论如何解决国有企业的债务困境问题。 相似文献
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27.
自重组人胰岛素问世以来,基因工程制剂异军突起。目前国内外已研发成功50多个品种,广泛用于癌症、肝炎、糖尿病、发育不良、遗传性疾病以及一些疑难病症的治疗,起到了化学药品难以达到的治疗作用,因为这些生物工程制剂的研发集中体现了现代生物学、医学与药学最先进的科学技术水平。大连三仪动物药品公司针对我国养猪生产中猪病的严重性和复杂性,全力研发了一批生物工程制剂。经过几年临床试验证实,此类产品具有良好的预防与治疗效果,得到广大用户的一致好评。本文就此作一简介,供同仁们参考。1猪用干扰素干扰素(IFN)是机体受病毒或其他干… 相似文献
28.
微小牛蜱Bm86基因的克隆及真核表达载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
为了克隆微小牛蜱Bm86基因及构建该基因的表达载体,以微小牛蜱饥饿幼蜱的破解物提取的总RNA为模板,参照已发表的微小牛蜱Bm86基因的核苷酸序列,设计了1对引物,采用RT—PCR技术获得微小牛蜱Bm86基因;将Bm86基因克隆入载体,并进行序列分析,结果证明,克隆的Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因序列的同源性达97.4%,而且该序列包含完整的开放阅读框。将该基因克隆入真核表达载体pPIC9K,构建并获得了重组真核表达载体pPIC9K—Bm86。 相似文献
29.
对猪瘟病毒(CSFV)C株、LT株E2基因主要抗原区在pGEX系列表达载体中原核表达的融合蛋白进行了变性、复性和纯化回收试验。用建立的变性、复性和纯化方法,获得了可溶性的纯化蛋白E2,其纯度达70%,回收率为10%。对复性纯化的E2蛋白进行了免疫活性检测,结果表明,其比未纯化蛋白的免疫活性高20倍左右。 相似文献
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