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41.
捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物,以H.contortuss ZJ株的总RNA为模板,进行RT—PCR扩增,成功扩增出H11基因。将PCR产物与pUCm—T载体连接后,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆并测序。序列分析表明,其核苷酸序列与国外报道的H11基因的同源性为99.5%。编码氨基酸序列具有氨基肽酶的保守序列,推测可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡。  相似文献   
42.
一、试验材料(一)毒(菌)种1.兔瘟肝传代毒:某生药厂肝传代毒L1/5以及对人 O 型红细胞凝集价在1:1280以上的自然野毒(肝悬液),于-25℃低温冰箱保存。2.巴氏杆菌菌种:中国兽医药品监察所提供的 C51—6菌种以及自然病例分离的巴氏杆菌。(二)异硫氰荧光素标记的绵羊抗兔球蛋白荧光抗体卫生部上海生物制品研究所产品(特异性染色单位1:16),临用前用0.01M PBS 做1:16倍的稀释。  相似文献   
43.
为了能在野外调查中和野生动物执法检查、打击虎产品走私工作中对发现的可疑虎残余物或虎产品等样品进行快速,准确的鉴定,东北林业大学野生动物资源学院近日建立了可以对虎线粒体DNA进行特异性扩增的PCR方法。 虎线粒体DNA细胞色素B(Ctyb)段由1140个碱基组成,通过用Wdnasis软件比较10只苏门达腊虎、15只东北虎、7只孟加拉虎、3只印支虎及5只华南虎Ctyb的碱荃序列,寻找到它在Ctyb段的保守区域,再与猞猁、雪豹、狮、豹猫、金钱豹、云豹、猎豹及家猫等多种猫科动物和梅花鹿,黑麂、赤鹿、獐、…  相似文献   
44.
本文通过光合作用参数的测定,详细的研究了中系8541和8240两种不同产量水平的水稻品种的光合特性.论述了在含等量叶绿素的条件下,中系8541和中系8240之间在对光谱的吸收、叶片的光合作用量子转化效率,叶绿体的PSⅡ(光系统Ⅱ)潜在活性(Fv/F_0)和原初光能转化效率(Fv/Fm等的主要区别.实验结果说明,上述各光合作用参数中系8541都优于中系8240.不仅如此.在Mg~(2+)作用下,Fv/Fo和Fv/Fm比值的提高以及Mg~(2+)对两个光系统激发能分配的调节能力中系8541也强于中系8240.  相似文献   
45.
荧光抗体染色法检测猪瘟的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
利用荧光抗体技术检测病猪内脏器官可能存在的猪瘟病毒,对猪瘟的早期诊断具有十分重要意义,猪瘟的常规诊断需要4~5天,而该项技术可在半天之内作出判断,既快速又客观、准确,在规模化猪场临床上可得到很多广泛应用。  相似文献   
46.
应用PCR技术检测伪狂犬病病毒   总被引:1,自引:0,他引:1  
  相似文献   
47.
棉花基因组DNA的提取及RAPD反应组成优化探讨   总被引:1,自引:0,他引:1  
针对棉花富含棉酚、多糖、单宁、蛋白质等干扰物质的特点 ,主要通过快速研磨、加入 PVP、挑DNA、不加 RNA酶等方法 ,摸索出一条方便、快捷、产率高、适合棉花基因组 DNA提取的方法。另外 ,本文还探讨了模板浓度、Mg2 、d NTPs、Taq酶等因素对 PCR的影响 ,得到棉花 RAPD分析最佳PCR反应组成为 :60 ng模板 DNA、1 .2 mmo1·L-1Mg2 、0 .2 mmo1· L-1d NTPs、1单位 Taq酶 ,反应体积为 2 0μl。  相似文献   
48.
应用竞争PCR定量检测猪IFN—γ mRNA   总被引:1,自引:0,他引:1  
运用RT—PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ—干扰素(IFN—γ)的部分片段,经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段,将余下的2个较大片段连接,并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物,从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMDl8—T载体,重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定,验证无误后作为竞争性模板内对照,一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR,产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD),经校正后取上述两者比值的对数值作为Y轴,取已知竞争模板相应浓度的对数值作为X轴,绘制成竞争曲线。应用建立的竞争PCR对不同样品重复试验表明,本方法操作简单,结果可靠,稳定性高,适用于猪IFN—γ mRNA的定量检测。  相似文献   
49.
迪卡配套系猪RYR1的PCR分析及其利用的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
试验从鸡东县永安猪场随机抽取迪卡配套系猪B系和E系42头,通过PCR扩增技术和酶切鉴定.采用克隆技术进行测序,来检测是否含有氟烷基因序列。经过以上技术检测这42头猪均没有氟烷基因。  相似文献   
50.
本试验旨在研究禽胰多肽(APP)对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量的影响.试验以APP粗提液及层析APP制品为材料,选取90只1周龄艾维菌肉鸡随机分为5组,每组3个重复,每个重复6只鸡.Ⅰ设为对照组,Ⅱ、Ⅲ设为饲饮组,Ⅳ、Ⅴ设为注射组.在第7周末,屠宰取其肝脏、小肠组织,运用SYBR Geen Ⅰ实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对肝脏和小肠中APPR mRNA的表达进行相对定量分析.结果发现:注射组与饲饮组肝脏及小肠中APPR mRNA的表达水平与对照组相比均呈下降趋势,且注射组降低程度大于饲饮组降低程度;其中,注射组与饲饮组中均是层析APP制品比APP粗提液的下降较明显.提示在外加APP情况下可对APPR mRNA的表达呈现抑制作用.本研究结果为进一步探讨APP与其受体之间的关系,从而为阐明其生理功能和作用机制提供一定的理论依据.  相似文献   
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