Pathogen Analysis of Goat's Respiratory Diseases     

TAO Li  LAN Xian-li  LI Jun  MA Chun-xia  LAN Jin-hong  HUANG Ming-xue  LAN Mei-yi  BI Bing-fen  CHEN Ze-xiang  YANG Wei 《中国畜牧兽医》2016,43(4):1072-1078

To investigate the pathogens of goat's respiratory disease from a goat farm in Guangxi province, the epidemiological investigation, clinic observation, pathological examination, bacterium isolation and identification, biochemical test, PCR and animal experiment test were conducted.The preventive and control measures were taken on the basis of pathogen epidemiological characteristics and drug sensitive test results.The results showed that Mycoplasma, influenza virus and parasite were negative by isolation and culture or PCR, however, two strains of gram-negative bacteria named MS1 and MS2 were isolated from lung.MS1 was identified as Serratia marcescens by biochemical test and 16S rRNA sequencing, which shared 99% nucleotide homology with other Serratia marcescens in GenBank.And MS2 was identified as E.coil by the same methods that shared 99% nucleotide homology with other E.coli in GenBank.Animal experiment showed that two strains could cause death in mice.The drug sensitive tests showed two strains were highly sensitive to spectinomycin, amikacin, kanamicin and neomycin.Kanamycin and dexamethasone were used to treat the sick goats, and achieved good results.  相似文献   

驻极体对大肠杆菌的影响研究     

徐民孜  徐永刚  白洁  赵汝男  杨政  李林葳  宋艳波  刘振宇 《中国农学通报》2020,36(26):55-61

为了有效防止空气中的大肠杆菌附着在食物等表面对人和动物造成腹泻等肠道疾病。以聚四氟乙烯制作的驻极体薄膜为试材,用控制变量法与理论分析和试验研究相结合的方法测得带负电和带正电的驻极体薄膜对大肠杆菌的影响数据。结果表明：带负电的驻极体薄膜对大肠杆菌的正常生长具有抑制作用,最高抑制率达到70.82%;带正电的驻极体薄膜促进了大肠杆菌的生长,最高促进率达到54.65%。进一步用光学显微镜观察到在带正电的驻极体薄膜下处理后的大肠杆菌菌落生长密集,带负电的驻极体薄膜处理后的菌落生长稀疏。驻极体薄膜对大肠杆菌生长造成影响的机制主要是静电场影响了大肠杆菌分子的膜电位,进而影响大肠杆菌的生长。带负电的驻极体薄膜对大肠杆菌具有良好的抑制作用,可为生产与驻极体灭菌有关的材料提供理论依据。  相似文献   

利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联技术构建产肠毒素大肠杆菌LT敲除菌株     

檀克勤  马现永  崔艺燕  田志梅  邓盾 《中国畜牧兽医》2020,47(3):666-675

本研究旨在利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联的技术对产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）K88的热不稳定性肠毒素（heat-labile toxin，LT）基因进行无痕敲除并获得K88 LT^-缺陷菌株。通过序列比对获取LT两端同源序列，并构建包含LT边界、氯霉素筛选标记、sgRNA和LT同源臂的供体片段；将供体片段转化至ETEC K88，同时分别利用λ-Red同源重组系统和CRISPR/Cas9基因编辑系统，对LT基因进行敲除；通过PCR验证获得了K88 LT^-缺陷菌株，并通过试验测定了敲除菌株的溶血能力和生长曲线。结果显示，λ-Red同源重组系统可成功地将LT基因替换为相应的供体片段，CRISPR/Cas9基因编辑系统可高效地对筛选标记进行删除，最终通过λ-Red和CRISPR/Cas9结合的基因编辑系统可成功对ETEC K88的LT基因进行无痕敲除。体外试验结果表明，K88 LT^-缺陷菌株的溶血能力丧失，并且生长速度比野生型菌株减缓，LT可能和ETEC K88的致病能力和生长性能有关。表明λ-Red和CRISPR/Cas9级联的基因敲除方法可用于LT毒素基因及其他一些大肠杆菌基因的敲除。K88 LT^-缺陷菌株的构建为下一步研究LT毒素的致病机制奠定基础。  相似文献   

益生菌大肠杆菌Nissle 1917抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果研究     

李金龙  邓欢  刘金艳  毛俊霞  王瑶  唐志如 《动物营养学报》2017,29(4)

本试验旨在研究益生菌大肠杆菌Nissle 1917(Ec N)抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果。采用体外法对Ec N进行生长曲线绘制和耐酸、耐胆盐、耐热性能的测定;以猪肠上皮细胞IPEC-J2细胞为体外细胞模型,考察了Ec N对该细胞的黏附率以及对致病菌大肠杆菌K88的黏附抑制率;同时通过蛋白质印迹法检测了Ec N对IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4的水平的影响。结果表明:1)Ec N对高酸、高胆盐和高温环境具有一定耐受能力。2)Ec N对IPEC-J2细胞的黏附作用以对数期最佳,黏附率达33.96%,显著高于迟缓期、稳定期和衰亡期(P0.05)。3)Ec N对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制效果,黏附抑制率达87.84%。4)Ec N还能上调IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4水平。结果提示,益生菌Ec N具有较好的抗逆性能,能够良好地黏附猪肠上皮细胞,对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制作用。  相似文献   

大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展     

祁浩  刘新利 《安徽农业科学》2016,44(17)

由于DNA重组技术和蛋白组技术的发展与成熟,外源基因表达技术备受关注。其在生物、食品、工业以及医学领域发挥着举足轻重的作用。以原核生物细胞及真核生物细胞作为表达系统,进行目的基因序列的表达以生产蛋白疫苗、核酸疫苗和生物酶制剂等是近年来发酵工业的新型领域。原核和真核表达系统是近年来研究和应用最广泛和最成熟的外源基因表达系统。对近年来关于大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展进行了综述。  相似文献   

Validating an empiric sulfadiazine–trimethoprim dosage regimen for treatment of Escherichia coli and Staphylococcus delphini infections in mink (Neovison vison)     

Amir Atabak Ronaghinia  Nanett Kvist Nikolaisen  Stine Green Hansen  Helle Harding Poulsen  Henrik Lauritz Frandsen  Tina Struve  Pierre‐Louis Toutain  Peter Damborg 《Journal of veterinary pharmacology and therapeutics》2021,44(1):93-106

Antimicrobial agents are used extensively off‐label in mink, as almost no agents are registered for this animal species. Pharmacokinetic (PK) and pharmacodynamic (PD) data are required to determine antimicrobial dosages specifically targeting mink bacterial pathogens. The aims of this study were to assess, in a PKPD framework, the empirical dosage regimen for a combination of trimethoprim (TMP) and sulfadiazine (SDZ) in mink, and secondarily to produce data for future setting of clinical breakpoints. TMP and SDZ PK parameters were obtained experimentally in 22 minks following IV or oral administration of TMP/SDZ (30 mg/kg, i.e. 5 mg/kg TMP and 25 mg/kg SDZ). fAUC/MIC with a target value of 24 hr was selected as the PKPD index predictive of TMP/SDZ efficacy. Using a modeling approach, PKPD cutoffs for TMP and SDZ were determined as 0.062 and 16 mg/L, respectively. By incorporating an anticipated potentiation effect of SDZ on TMP against Escherichia coli and Staphylococcus delphini, the PKPD cutoff of TMP was revised to 0.312 mg/L, which is above the tentative epidemiological cutoffs (TECOFF) for these species. The current empirical TMP/SDZ dosage regimen (30 mg/kg, PO, once daily) therefore appears adequate for treatment of wild‐type E. coli and S. delphini infections in mink.  相似文献   

丁酸梭菌对哺乳母猪繁殖性能、免疫和抗氧化功能的影响     

冯云龙  王晶莹  于淼  刘萱  马倩  刁新平 《中国畜牧杂志》2021,(2):170-176

本试验旨在研究丁酸梭菌对哺乳母猪免疫和抗氧化的影响,选取健康经产长白母猪32头(胎次和预产期相近),随机分为4组,每组8个重复,每个重复1头。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮基础上添加250、500、1000 mg/kg丁酸梭菌。预试期7 d,试验期为28 d(产前7 d至21 d断奶)。结果表明:哺乳第1天,1000 mg/kg丁酸梭菌组血清中IgA、IgM和IgG含量均显著高于对照组;哺乳第21天,250、500、1000 mg/kg丁酸梭菌组IgA含量均显著高于对照组,500 mg/kg丁酸梭菌组IgM和IgG含量均为最高;哺乳第1、10、21天,1000 mg/kg丁酸梭菌组IL-6和IL-1β含量较对照组均显著降低;哺乳第1、10、21天,各丁酸梭菌组超氧化物歧化酶活性均显著高于对照组,丙二醛含量均显著低于对照组;哺乳第1、21天,500、1000 mg/kg丁酸梭菌组的过氧化氢酶含量较对照组均显著升高;哺乳第21天,500 mg/kg丁酸梭菌组总抗氧化能力和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高;哺乳第1天和第21天,1000 mg/kg丁酸梭菌组粪便中大肠杆菌的数量显著低于对照组。由此得出,在妊娠后期和哺乳期饲粮中添加丁酸梭菌可以显著提高母猪免疫功能和抗氧化能力,降低粪便中大肠杆菌的数量,且添加量为500~1000 mg/kg时效果明显。  相似文献   

禽致病性大肠杆菌Hcp2b对雏鸡气管黏膜细胞因子-细胞因子受体相互作用通路的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

宋祥军  沈啸  蒋胡艳  陈哲  刘华  邵颖  涂健  祁克宗 《畜牧兽医学报》2021,52(3):742-751

T6SS （type VI secretion system）是革兰阴性菌中常见的一种分泌系统,其效应蛋白Hcp2b作用机制迄今仍未明晰。本研究以禽致病性大肠杆菌（avian pathogenic Escherichia coli,APEC） Hcp2b蛋白为研究主体,旨在探究Hcp2b蛋白在APEC感染鸡气管黏膜过程中发挥的作用及机制。采用Red重组方法以质粒pKD3为模板构建hcp2b缺失株,pSTV-28质粒连接hcp2b目的片段构建重组载体,导入感受态Δhcp2b菌株构建回复株,并对Δhcp2b菌株的生长曲线进行测定。7日龄雏鸡气管感染hcp2b缺失株及野生株,感染后12、24 h收集鸡气管黏膜细胞进行转录组学测序及生物信息学分析。结果表明,hcp2b缺失株及回复株构建成功,hcp2b基因缺失对菌株的生长性能无影响。hcp2b基因缺失株感染气管黏膜后,mRNA的表达谱发生变化,感染后12 h,有144个基因表达量发生变化（上调差异基因87个,下调57个）;感染后24 h,有135个基因表达量发生变化（上调差异基因79个,下调56个）。生物信息学分析发现差异基因富集在Cytokine-cytokine receptor interaction、Protein processing in endoplasmic reticulum等信号通路。hcp2b基因缺失未影响APEC的生长特性,hcp2b基因缺失后影响雏鸡气管黏膜Cytokine-cytokine receptor interaction通路基因mRNA转录水平的变化,IL-1β、IL-12b的表达均上调。该结果为APEC的致病机制研究提供了理论依据。  相似文献   

A survey of antimicrobial resistance in Escherichia coli isolated from wild sika deer (Cervus nippon) in Japan     

Yukino TAMAMURA-ANDOH  Nobuyuki TANAKA  Keisuke SATO  Yoshino MIZUNO  Nobuo ARAI  Ayako WATANABE-YANAI  Masato AKIBA  Masahiro KUSUMOTO 《The Journal of veterinary medical science / the Japanese Society of Veterinary Science》2021,83(5):754

We examined the antimicrobial susceptibility of 848 Escherichia coli isolates from 237 feces samples of wild sika deer (Cervus nippon) captured between 2016 and 2019 in 39 of the 47 prefectures of Japan. Five of the 237 wild sika deer (2.1%) carried E. coli with resistance to at least one antimicrobial, and all the resistant isolates showed resistance to tetracycline. The resistant isolates contained antimicrobial resistance genes that were similar to those in E. coli derived from humans and farm animals. Although wild sika deer are not currently likely to be a source for the transmission of antimicrobial resistance in Japan, they can potentially mediate antimicrobial resistance spread by coming into contact with humans, animals, and their surroundings.  相似文献   

2019年湖南省部分地区鸡、鸭、猪源大肠杆菌耐药性调查     

唐标  陈怡飞  陈聪  王静鸽  黄磊  钱鸣蓉  杨华 《畜牧与兽医》2021,(4):54-60

旨在调查2019年湖南省部分地区不同来源的大肠杆菌对抗生素的耐药水平,为养殖合理用药提供参考。从4个市畜禽养殖场采集猪、鸡和鸭粪便285份,使用麦康凯琼脂培养基和伊红美蓝培养基对大肠杆菌筛选,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行鉴定,采用微量肉汤稀释法检测16种抗生素对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。共分离出203株大肠杆菌(鸡源146株、鸭源20株和猪源37株),对四环素和氨苄西林耐药率最高,分别达到89.2%和84.7%;对头孢他啶、奥格门丁、黏菌素耐药率较低,分别为2.5%、2.0%和0.5%;所有菌株均对美罗培南敏感。抗3种及以上抗生素的菌株数目占比为87.7%,而仅5.42%的菌株对所有检测的抗生素敏感。另外,来源于减抗示范养殖场的大肠杆菌对大部分抗生素的耐药率,与来源于非减抗养殖场大肠杆菌相比未见显著差异。上述结果表明,湖南省动物源大肠杆菌的耐药水平仍处在较高水平,重视兽药使用管理并持续开展对大肠杆菌的耐药性监测十分必要。  相似文献