全文获取类型
| 收费全文 | 8993篇 |
| 免费 | 329篇 |
| 国内免费 | 745篇 |
专业分类
| 林业 | 162篇 |
| 农学 | 580篇 |
| 基础科学 | 51篇 |
| 398篇 | |
| 综合类 | 3291篇 |
| 农作物 | 374篇 |
| 水产渔业 | 406篇 |
| 畜牧兽医 | 4068篇 |
| 园艺 | 290篇 |
| 植物保护 | 447篇 |
出版年
| 2024年 | 79篇 |
| 2023年 | 274篇 |
| 2022年 | 231篇 |
| 2021年 | 267篇 |
| 2020年 | 306篇 |
| 2019年 | 396篇 |
| 2018年 | 177篇 |
| 2017年 | 338篇 |
| 2016年 | 467篇 |
| 2015年 | 395篇 |
| 2014年 | 504篇 |
| 2013年 | 602篇 |
| 2012年 | 766篇 |
| 2011年 | 774篇 |
| 2010年 | 716篇 |
| 2009年 | 600篇 |
| 2008年 | 558篇 |
| 2007年 | 456篇 |
| 2006年 | 336篇 |
| 2005年 | 405篇 |
| 2004年 | 240篇 |
| 2003年 | 275篇 |
| 2002年 | 177篇 |
| 2001年 | 174篇 |
| 2000年 | 141篇 |
| 1999年 | 122篇 |
| 1998年 | 90篇 |
| 1997年 | 59篇 |
| 1996年 | 43篇 |
| 1995年 | 31篇 |
| 1994年 | 29篇 |
| 1993年 | 11篇 |
| 1992年 | 8篇 |
| 1991年 | 10篇 |
| 1990年 | 1篇 |
| 1989年 | 1篇 |
| 1988年 | 1篇 |
| 1987年 | 2篇 |
| 1983年 | 1篇 |
| 1981年 | 1篇 |
| 1979年 | 1篇 |
| 1963年 | 1篇 |
| 1955年 | 1篇 |
排序方式： 共有10000条查询结果，搜索用时 15 毫秒
41.
PCR技术检测猪伪狂犬病毒及其潜伏感染部位的研究 总被引：22，自引：1，他引：21
本研究合成了伪狂犬毒糖蛋白ｇｐ５０基因引笺，该引物能够扩增糖蛋白ｇｐ５０基因中４３４－６５１之间的２１７ｂｐＤＮＡ片段，该片段含 ＳａｌＩ酶切位点，应用引物对几种不同的伪狂犬病毒株多聚酶链式反应扩增结果全为阳性。 相似文献
42.
为了能在野外调查中和野生动物执法检查、打击虎产品走私工作中对发现的可疑虎残余物或虎产品等样品进行快速，准确的鉴定，东北林业大学野生动物资源学院近日建立了可以对虎线粒体ＤＮＡ进行特异性扩增的ＰＣＲ方法。 虎线粒体ＤＮＡ细胞色素Ｂ（Ｃｔｙｂ）段由１１４０个碱基组成，通过用Ｗｄｎａｓｉｓ软件比较１０只苏门达腊虎、１５只东北虎、７只孟加拉虎、３只印支虎及５只华南虎Ｃｔｙｂ的碱荃序列，寻找到它在Ｃｔｙｂ段的保守区域，再与猞猁、雪豹、狮、豹猫、金钱豹、云豹、猎豹及家猫等多种猫科动物和梅花鹿，黑麂、赤鹿、獐、… 相似文献
43.
荧光PCR法定量检测动物源性饲料中的牛、羊成分 总被引：1，自引：0，他引：1
疯牛稿是由于健康牛食入含有致病性朊粗的人工蛋白质饲料(肉骨粉)所致，而目前尚未见能有效、快速地检测饲料中牛、羊成分的技术报道。本文在前期研究的基础上．运用荧光定量PCR法．针对牛、羊、鸡、猪几种不同动物的特异性基因序列设计了牛、羊两种动物的特异性探针，通过对整个PCR过程的实对荧光监测，来鉴定饲料中的牛、羊成分，并对其定量范围做了简单的计论。本方法能有效解决普通PCR的样品污染问题，具有特异性强、是敏度高、重复性好等特点。 相似文献
44.
45.
棉花基因组DNA的提取及RAPD反应组成优化探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
针对棉花富含棉酚、多糖、单宁、蛋白质等干扰物质的特点 ,主要通过快速研磨、加入 PVP、挑DNA、不加 RNA酶等方法 ,摸索出一条方便、快捷、产率高、适合棉花基因组 DNA提取的方法。另外 ,本文还探讨了模板浓度、Mg2 、d NTPs、Taq酶等因素对 PCR的影响 ,得到棉花 RAPD分析最佳PCR反应组成为 :60 ng模板 DNA、1 .2 mmo1·L-1Mg2 、0 .2 mmo1· L-1d NTPs、1单位 Taq酶 ,反应体积为 2 0μl。 相似文献
46.
应用竞争PCR定量检测猪IFN—γ mRNA 总被引：1，自引：0，他引：1
运用RT—PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ—干扰素(IFN—γ)的部分片段，经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段，将余下的2个较大片段连接，并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物，从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMDl8—T载体，重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定，验证无误后作为竞争性模板内对照，一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR，产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD)，经校正后取上述两者比值的对数值作为Y轴，取已知竞争模板相应浓度的对数值作为X轴，绘制成竞争曲线。应用建立的竞争PCR对不同样品重复试验表明，本方法操作简单，结果可靠，稳定性高，适用于猪IFN—γ mRNA的定量检测。 相似文献
47.
48.
本试验旨在研究禽胰多肽(APP)对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量的影响.试验以APP粗提液及层析APP制品为材料,选取90只1周龄艾维菌肉鸡随机分为5组,每组3个重复,每个重复6只鸡.Ⅰ设为对照组,Ⅱ、Ⅲ设为饲饮组,Ⅳ、Ⅴ设为注射组.在第7周末,屠宰取其肝脏、小肠组织,运用SYBR Geen Ⅰ实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对肝脏和小肠中APPR mRNA的表达进行相对定量分析.结果发现:注射组与饲饮组肝脏及小肠中APPR mRNA的表达水平与对照组相比均呈下降趋势,且注射组降低程度大于饲饮组降低程度;其中,注射组与饲饮组中均是层析APP制品比APP粗提液的下降较明显.提示在外加APP情况下可对APPR mRNA的表达呈现抑制作用.本研究结果为进一步探讨APP与其受体之间的关系,从而为阐明其生理功能和作用机制提供一定的理论依据. 相似文献
49.