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荧光PCR法定量检测动物源性饲料中的牛、羊成分 总被引：1，自引：0，他引：1
疯牛稿是由于健康牛食入含有致病性朊粗的人工蛋白质饲料(肉骨粉)所致，而目前尚未见能有效、快速地检测饲料中牛、羊成分的技术报道。本文在前期研究的基础上．运用荧光定量PCR法．针对牛、羊、鸡、猪几种不同动物的特异性基因序列设计了牛、羊两种动物的特异性探针，通过对整个PCR过程的实对荧光监测，来鉴定饲料中的牛、羊成分，并对其定量范围做了简单的计论。本方法能有效解决普通PCR的样品污染问题，具有特异性强、是敏度高、重复性好等特点。 相似文献
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43.
棉花基因组DNA的提取及RAPD反应组成优化探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
针对棉花富含棉酚、多糖、单宁、蛋白质等干扰物质的特点 ,主要通过快速研磨、加入 PVP、挑DNA、不加 RNA酶等方法 ,摸索出一条方便、快捷、产率高、适合棉花基因组 DNA提取的方法。另外 ,本文还探讨了模板浓度、Mg2 、d NTPs、Taq酶等因素对 PCR的影响 ,得到棉花 RAPD分析最佳PCR反应组成为 :60 ng模板 DNA、1 .2 mmo1·L-1Mg2 、0 .2 mmo1· L-1d NTPs、1单位 Taq酶 ,反应体积为 2 0μl。 相似文献
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应用竞争PCR定量检测猪IFN—γ mRNA 总被引：1，自引：0，他引：1
运用RT—PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ—干扰素(IFN—γ)的部分片段，经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段，将余下的2个较大片段连接，并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物，从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMDl8—T载体，重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定，验证无误后作为竞争性模板内对照，一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR，产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD)，经校正后取上述两者比值的对数值作为Y轴，取已知竞争模板相应浓度的对数值作为X轴，绘制成竞争曲线。应用建立的竞争PCR对不同样品重复试验表明，本方法操作简单，结果可靠，稳定性高，适用于猪IFN—γ mRNA的定量检测。 相似文献
45.
犬多重肠套叠的诊疗 总被引：2，自引：0，他引：2
犬的肠套叠临床较为常见 ,尤以幼犬发病率较高 ,占 80 %以上 ,临床多见于前段肠管套入后段肠管 ,以空肠、回肠套入结肠最多见 ,偶有盲肠套入结肠 ,十二指肠套入胃内的情况。但临床上肠管套叠后再套叠的“多重肠套叠”病例极为罕见。作者于 2 0 0 1年诊疗一例犬肠管多重套叠的病例 ,经手术治疗获得痊愈 ,现报道如下。1 发病情况一只 70日龄德国牧羊犬体重 8Kg,因病前来就诊。主述 :该犬购回 7天 ,3天前出现食欲减少、腹泻 ,随后呕吐 ,在当地就诊 (应用抗菌药物和止吐药 )治疗不见好转。昨日食欲废绝 ,呕吐更剧烈 ,频频努责 ,排极少量稀粪 ,… 相似文献
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本试验旨在研究禽胰多肽(APP)对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量的影响.试验以APP粗提液及层析APP制品为材料,选取90只1周龄艾维菌肉鸡随机分为5组,每组3个重复,每个重复6只鸡.Ⅰ设为对照组,Ⅱ、Ⅲ设为饲饮组,Ⅳ、Ⅴ设为注射组.在第7周末,屠宰取其肝脏、小肠组织,运用SYBR Geen Ⅰ实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对肝脏和小肠中APPR mRNA的表达进行相对定量分析.结果发现:注射组与饲饮组肝脏及小肠中APPR mRNA的表达水平与对照组相比均呈下降趋势,且注射组降低程度大于饲饮组降低程度;其中,注射组与饲饮组中均是层析APP制品比APP粗提液的下降较明显.提示在外加APP情况下可对APPR mRNA的表达呈现抑制作用.本研究结果为进一步探讨APP与其受体之间的关系,从而为阐明其生理功能和作用机制提供一定的理论依据. 相似文献
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单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌的比较 总被引：18，自引：1，他引：17
本文对单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌进行了比较。将沙门氏菌与大肠杆菌以不同比例混合后 ,分别用ELISA和PCR法检测 ,在 1∶1 0 0的比例时 ,用这 2种方法均能检测出阳性样品 ;在 1∶1 0 0 0的比例时 ,用ELISA法检测为阴性 ,而用PCR法则能检测出。检测鲜牛奶、龙虾、虾仁、熟食制品等样品 ,2种方法的符合率达 97 6 %。对冻虾仁、人粪便样品的前增菌、选择性增菌、后增菌过程进行同步检测 ,在样品的前增菌液 ,直接ELISA法检测的OD值小于 0 5 ,而PCR法扩增能出现特异条带 ,经国标方法验证为阳性 ,证实PCR法的敏感性优于直接ELISA法 ,而在选择性增菌液和M 肉汤后增菌液中 ,2种方法均能检出阳性样品。 相似文献