Establishment, validation and use of the Kielstein-Rapp-Gabrielson serotyping scheme for Haemophilus parasuis   总被引：6，自引：0，他引：6  

Rafiee M  Blackall PJ 《Australian veterinary journal》2000,78(3):172-174

OBJECTIVES: To produce antisera to the 15 recognised reference strains of the Kielstein-Rapp-Gabrielson (KRG) serotyping scheme for Haemophilus parasuis, validate those sera and use them to serotype 46 Australian field isolates of H parasuis. DESIGN: Antisera were produced in rabbits and validated by cross-testing with the reference strains and re-testing 15 Australian field isolates of H parasuis that had been previously serotyped in the United States of America. The validated antisera were then used to determine the serovar of 46 Australian isolates. RESULTS: Monospecific antisera were produced for 14 of the 15 KRG serovars of H parasuis. Two Australian field isolates, confirmed previously as serovars 1 and 7, were used to produce monospecific antisera for serovars 1 and 7 respectively. The antiserum for serovar 4 gave a one-way cross reaction with the antigen of serovar 14. The typing antisera correctly typed all 15 H parasuis that had been previously typed by antisera produced overseas. The 46 field isolates were shown to belong to serovars 2 (two isolates), 4 (one isolate), 5 (18 isolates), 12 (two isolates) and 13 (four isolates). The remaining 19 isolates were non-typable. CONCLUSION: Serotyping of H parasuis isolates is now available in Australia. H parasuis serovars 5 and 13 remain the predominant serovars present in Australian pigs.  相似文献   

2013－2019年贵州省副猪嗜血杆菌分离株耐药性及其演变     

史开志  杜春林  王婧  张静  杨茂生  李永明 《中国畜牧兽医》2020,47(10):3343-3350

试验旨在揭示贵州省副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，Hps）的耐药性及其变化趋势，指导Glasser's病临床防控用药，减缓Hps耐药菌株出现。通过K-B纸片琼脂法，检测2013－2019年分离自贵州省9个地区517株Hps对15种常用抗菌药的耐药性，分析不同分离时期和分离地区的菌株的耐药性差异。结果显示，针对15种抗生素分别有14.36%~70.58%的分离菌株表现耐药，其中耐头孢噻呋菌株的比例最低，耐复方新诺明菌株的比例最高；与2013年相比，2019年分离的Hps菌株对13种抗生素的耐药率分别升高了4.52%~324.68%，其中耐头孢噻呋菌株比例上升速度最快，达324.68%，耐链霉素菌株比例上升最慢，仅4.52%，耐土霉素和四环素菌株的比例分别下降2.21%和8.63%，出现负增长。相对于凯里、毕节和兴义地区，安顺、遵义、贵阳地区流行的菌株对头孢噻呋、替米考星、多西环素等在全省范围内耐药菌株比例较低的药物耐药率相对较高，而对复方新诺明、阿莫西林、链霉素等在全省范围内耐药菌株比例较高的药物耐药率相对较低。这一结果说明，贵州省Hps菌株对15种常用药物的耐药性较为严重，且总体呈现上升趋势，不同地区分离株对部分抗菌药的耐药率呈现明显的地区差异性。  相似文献   

副猪嗜血杆菌的分离鉴定与药敏试验研究     

谷禹  张东超  弓建芳  徐继鹏  金天明  李留安  高丰 《天津农学院学报》2014,(4)

副猪嗜血杆菌病是一种猪的传染病,主要引起断奶仔猪和保育猪发病。试验对天津某规模化猪场疑似副猪嗜血杆菌病猪采集病变明显的组织进行细菌分离培养、显微镜镜检、生化试验等实验室诊断,结合病猪的临床症状和病理变化特点,判定该细菌分离株为副猪嗜血杆菌。药敏试验结果显示,该株副猪嗜血杆菌对头孢噻呋、阿米卡星等药物高度敏感。  相似文献   

副猪嗜血杆菌Apd-ELISA抗体检测试剂盒的制备和初步应用     

田杨  刘云宝  马辉  潘其聪  肖静  陈焕春  蔡旭旺  徐晓娟 《畜牧兽医学报》2020,51(9):2227-2237

旨在对副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）的黏附素蛋白（autotransporter passenger domain,Apd）ELISA抗体检测方法进行参数优化、临界值确定和应用评价,获得性能稳定的副猪嗜血杆菌病抗体检测试剂盒。首先通过猪的免疫攻毒试验获得HPS阴、阳性对照血清,优化Apd-ELISA的反应参数;然后用背景确认的阴、阳性血清确定其临界值,并对封闭液及酶标板的包装方式进行选择;最后用Apd-ELISA试剂盒对临床样品进行检测并与荷兰Biocheck的OppA-ELISA试剂盒进行比较。结果表明,抗原包被质量浓度为0.5 μg·mL^-1、被检血清以1：200倍稀释后反应45 min以及二抗稀释度为1：15 000时,Apd-ELISA的反应背景下降,区分度提高。根据背景确认的27份阳性和40份阴性血清的OD_{630 nm}值以及临界值计算公式（S-N）/（P-N）,得到Apd-ELISA的阴阳性临界值是0.33。证实用封闭液K封闭和真空包装的酶标板可以在50℃保存4 d（相当于在4℃保存22个月）。用Apd-ELISA试剂盒检测1 179份临床血清,表明母猪、后备和育肥猪以及仔猪的HPS血清阳性率分别为83.76%、61.09%和27.48%。与荷兰的Biocheck试剂盒进行比较,发现Apd-ELISA与Biocheck试剂盒（OppA-ELISA）对HPS临床阴性血清和疫苗免疫血清检测的符合率为100%,对HPS临床阳性血清的符合率仅为4.76%（6/126）。然而,Apd-ELISA与OppA Western blot的阳性符合率可达到73.02%（92/126）。本研究获得了能有效区分HPS阴、阳性血清和稳定保存的Apd-ELISA抗体检测试剂盒,可用于HPS灭活疫苗免疫后的抗体检测和副猪嗜血杆菌病的血清抗体检测。  相似文献   

副猪嗜血杆菌疫苗研究进展     

王静  周媛媛  张学谅  陈欣  原婧  尹荣兰  李睿  黄晨  尹荣焕 《动物医学进展》2020,(3):92-96

近年来,副猪嗜血杆菌所引起的全身性炎性疾病使全球的养猪业造成巨大的经济损失,如何预防和控制副猪嗜血杆菌病发生成为关注的焦点,疫苗的研究开发也受到了重视。近年使用的疫苗有灭活苗、亚单位疫苗、DNA疫苗和基因工程疫苗等,论文对目前副猪嗜血杆菌应用的疫苗种类、研究现状以及发展方向进行了综述。  相似文献   

应用对流免疫电泳法鉴定胸膜肺炎嗜血杆菌血清型     

汪广荫  朴范泽 《黑龙江八一农垦大学学报》1989,(1):47-51

本文建立的对流免疫技术可用于胸膜肺炎嗜血杆菌(H·T)的血清型鉴定。应用0.05M,PH8.0的巴比妥缓冲液,以自行制备的已知血清型兔免疫血清检测H·P菌浸出抗原,通电20—45分钟获得结果。本法比琼脂扩散法敏感8—12倍,克服2—ME试管凝集试验不能检测自身凝集菌株的缺点,不存在种间、血清型间交叉反应,是一种快速、敏感和特异的方法。  相似文献   

副猪嗜血杆菌hhdA克隆、抗原表位预测和表达     

曾文斌  刘悦欣  谢巧  聂小伟  黄冬艳  王萍 《江西农业大学学报》2015,(3):512-516,563

根据Gen Bank中的副猪嗜血杆菌hhd A的基因序列,设计并合成l对特异性引物,对从江西分离的HPS的hhd A基因进行扩增、克隆、测序、生物信息学分析和原核表达。测序结果表明,扩增的目的基因大小为1 797bp,共编码氨基酸599个氨基酸。与Gen Bank上公布的ZJ0906株(CP005384.1)中对应的核苷酸序列同源性为99.8%,氨基酸同源性99.6%。生物信息学分析表明,HPS hhd A蛋白是一种混合型结构蛋白,含有α-螺旋、β-折叠、β转角和无规则卷曲;综合柔性区域、亲水性位点、抗原指数和表面可能位点预测了hhd A蛋白可能的B细胞抗原表位的优势表位。将目的基因转入原核表达载体p ET-32a(+)构建重组原核表达质粒p ET-32a(+)-hhd A,将重组质粒转化到BL21(DE3)中,进行IPTG诱导表达,经过SDS-PAGE电泳结果显示表达的融合蛋白约80 k D。为进一步研究HPS hhd A生物学功能及抗体制备和开发hhd A基因工程产品奠定了基础。  相似文献   

副猪嗜血杆菌oppA基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立     

车勇良  陈如敬  江斌  王隆柏  魏宏  吴学敏  庄向生  周伦江 《福建农林大学学报(自然科学版)》2015,44(3)

采用PCR方法扩增副猪嗜血杆菌(Hps)的寡肽结合蛋白(Opp A)基因,序列测定结果表明,扩增片段全长1654 bp.将扩增片段插入表达载体p GEX-6P-1中,转化BL21进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明,重组融合蛋白大小约为87 ku,以纯化的重组蛋白Opp A作为抗原,建立Hps抗体的间接ELISA检测方法.通过试验确定最佳的反应条件为:抗原包被浓度为1.0μg·孔-1,于37℃包被1 h,待检血清的稀释度为1∶50,阳性判断标准(D450 nm)大于0.643.特异性和重复性试验结果表明,建立的间接ELISA方法具有良好的特异性和稳定性,可用于Hps抗体的检测.  相似文献   

副猪嗜血杆菌病的病理学观察及鉴别诊断     

余群英  罗军荣  曾庆国  胡锦文  花象柏 《畜禽业》2007,(12):32-33

副猪嗜血杆菌病引起猪多发性浆膜炎和关节炎,又称为猪格拉瑟氏病。随着养猪业的发展,该病已成为全球范围内猪的重要细菌性疾病。通过流行病学﹑临床症状﹑大体病变观察结合实验室化验确诊了副猪嗜血杆菌病,并描述了重要脏器的组织病理学变化。  相似文献   

2009～2010年华南地区副猪嗜血杆菌分离株ERIC-PCR指纹图谱的鉴定和分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

张凌云  徐成刚  张斌  张建民  郭莉莉  赵静  周素明  廖明 《中国兽医杂志》2011,47(7)

本试验采用肠杆菌基因间重复一致序列多态性聚合酶链式反应(ERIC-PCR)对2009~2010年分离自华南地区的41株副猪嗜血杆菌野生菌株及15株参考菌株进行了指纹图谱的鉴定。利用BioNumerics 5.1软件对所有菌株的ERIC-PCR指纹图谱进行分析,结果显示,15株具有不同血清型的参考菌株均具有不同的指纹图谱;41株华南地区副猪嗜血杆菌野生分离株则具有26个不同的指纹图谱,该方法对所有56株副猪嗜血杆菌的鉴别率为0.984。由此可见,ERIC-PCR分型方法具有较好种间的鉴别能力,可作为副猪嗜血杆菌病流行病学研究中的一种有效的辅助分子手段。  相似文献