表达禽流感病毒核蛋白基因重组禽痘病毒的构建及其免疫保护性研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

乔传玲  于康震  姜永萍  张建林  邓国华  孟庆文  田国斌  唐秀英 《中国农业科学》2003,36(6):704-708

 从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1)核蛋白 (NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段 ,将其亚克隆到pSY5 38质粒 ,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY5 38质粒 ,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体pSY6 81,从而构建出表达核蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体pSY(NP +LacZ)。应用脂质体介导的方法将转移载体转染已感染禽痘病毒S FPV 0 17的鸡胚成纤维细胞 ,在X gal存在的条件下 ,利用蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化以及PCR、Western blot鉴定 ,结果证明 ,获得了能高效表达AIVNP蛋白的重组禽痘病毒rFPV NP。SPF鸡体内的免疫保护试验结果表明 ,它能够诱导机体产生较高水平的NP特异性抗体 ,并对H5N1和H7N1这 2种亚型高致病力禽流感病毒的攻击提供一定的保护。  相似文献   

不同海拔高度茶树芽叶主要生化物质含量的变化     

王宗尧  陈昌辉  吉林  杨安 《四川农业大学学报》1986,(1)

本文报导了川西茶区不同海拔高度茶树新梢主要生化成份含量的变化。茶树新梢氨基酸的含量,随海拔高度的不同出现高低的变化,以1100—1200米为最多。咖啡碱的含量相对稳定,与海拔高度没有明显的相关性。茶多酚含量随海拔升高而降低。因此,川西盆边山区发展茶叶生产时,垂直分布高度以不超过1200米为好。  相似文献   

三种长效磺胺药在水牛体内的代谢动力学     

张福华  夏珍  柳仲华  张心如  周祖华  付佑全 《四川农业大学学报》1984,(2)

<正> 磺胺—5,6—二甲氧嘧啶(SDM')为人用的周效磺胺。在奶山羊体内的代谢动力学已进行了研究。磺胺—5—甲氧嘧啶(SMD)和磺胺—6—甲氧嘧啶(SMM、DS—36)亦为人用长效磺胺。SMM在鸡体内的分布、在牛、猪的血中浓度、血浆蛋白结合率如乙酰化率、对马和奶山羊体内的代谢动力学已进行了研究。  相似文献   

昆明系和Balb／C系小鼠用于显性致死试验的比较研究   总被引：3，自引：1，他引：2  

肖希龙  沈建忠 《畜牧兽医学报》1997,28(2):165-170

本研究选用昆明系和Ｂａｌｂ／Ｃ系小鼠同时进行了显性致死试验的对比试验。试验一选用封闭群昆明系９￣１０周龄的雄性小鼠７８只，随机分成６组，其中５个剂量组分别灌服１６０、５３、１６ｍｇ／ｋｇ体重的复方硝基酚钠和１５、３０ｍｇ／ｋｇ体重的环磷酰胺，另一组为空白对照组。受试物组每天给药一次，连续５ｄ后，按１：２的雄雌性比例与正常的９￣１０周龄封闭群昆明系雌鼠进行交配，每周交配一批，连续交配８批。试验二除选  相似文献   

新城疫病毒长春株NP、P、M蛋白基因的克隆与序列分析     

王承宇  金宁一  丁壮  王兴龙  金扩世  米志强  李太原  宣华 《中国兽医学报》2002,22(3):213-215

  相似文献   

Prokaryotic Expression of BPIV3 NP Protein and Its Immunoenhancing Effect on the BPIV3 Inactivated Vaccine     

WANG Yuchen  TIAN Guangyuan  ZHOU Yaping  GUO Ting  ZHAO Hongmei  SUN Yajie  ZHAO Fengmiao  BIAN Yuchen  YU Jialiang  HAO Yongqing 《中国畜牧兽医》2022,49(8):3122-3130

【Objective】 This study was aimed to verify whether the NP protein of Bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV3) could enhance the immune effect of BPIV3 inactivated vaccine【Method】 The antigenicity of the protein encoded by NP gene was analyzed by bioinformatics softwares,and the antigenic region was screened.The truncated NP gene sequence of BPIV3 was amplified by PCR and connected to pET-32a(+) plasmid.Then the high-purity BPIV3 NP protein was obtained by E.coli prokaryotic expression system and Ni affinity chromatography.It was confirmed by Western blotting.BPIV3 was inactivated with 0.3% formaldehyde and mixed with Freund's adjuvant 1:1 to prepare inactivated vaccine.Eight New Zealand White rabbits were randomly divided into four groups with two rabbits in each group,including inactivated vaccine group,NP protein group,inactivated vaccine and NP protein mixed group and control group.Blood samples were collected before and every 7 days after immunization.The levels of specific antibodies and neutralizing antibodies in New Zealand White rabbits of the four groups were measured and compared by indirect ELISA and virus neutralization test.【Result】 DNAStar analysis showed that the average antigen index of amino acid region 193-368 of NP protein was 0.4-1.7,and the hydrophilic index was 0-1.5,which proved that this region had strong antigenicity and hydrophilicity.The NP gene was amplified by PCR and the recombinant expression vector was constructed.Gene sequencing showed that the recombinant expression vector was consistent with the expected results.The results of SDS-PAGE showed that NP protein was highly expressed with a molecular weight of 50 ku and expressed in the form of inclusion body.Western blotting showed that the expressed protein had strong reactivity.The results of ELISA showed that 28 days after immunization,the specific antibody titer of the control group was 0,and the specific antibody titers of inactivated vaccine group,NP protein group and inactivated vaccine and NP protein mixed group reached 1:2¹¹,1:2¹⁷ and 1:2¹⁸,respectively.The results of virus neutralization test showed that 28 days after immunization,the neutralizing antibody titer of the control group was 0,and the neutralizing antibody titers of inactivated vaccine group,NP protein group and inactivated vaccine and NP protein mixed group were 1:2^3.32,1:2^4.48 and 1:2^4.98,respectively.【Conclusion】 BPIV3 NP protein could enhance the immune effect of BPIV3 inactivated vaccine.Adding NP protein to the inactivated vaccine could be used as a new vaccination method of BPIV3 inactivated vaccine.  相似文献   

秋茄子新品种91-49选育初报     

刘君绍  田时炳  皮伟  赵晓凤  陈义康  罗章勇 《西南园艺》1999,27(4):26-27

91-49是利用194号和98号两个优良自交系配制而成的秋茄子专用品种.具有中热、耐热、商品性好、丰产等优良性状.从定植至第一次采收约47天.一般667m~2产量160kg,比对照(南充墨茄)增产25.3%.其丰产性、商品性.耐热性均优于南充墨茄.目前已在西南地区大面积示范推广.  相似文献   

茶树花粉母细胞减数分裂研究初极     

喻衣尘 《四川农业大学学报》1985,(2)

本文报告了观察花蕾直径和花药颜色是茶树减数分胞的形态指标,当蕾径是4.5—5.5毫米而花药为黄色时,性母细胞成熟,温度是影响减数分裂主要的境环因素,在日平均温度24—29℃减数分裂高峰期取样是观察染色体活动的最佳时刻。  相似文献   

马尔堡病毒核蛋白的原核表达及纯化   总被引：1，自引：0，他引：1  

王皓婷  王水明  史子学  邵东华  魏建超  刘学辉  王志亮  王雪敏  马志永 《中国动物检疫》2011,28(10):35-37

目的以原核表达的方式获得了马尔堡病毒的核蛋白,并纯化。方法将马尔堡病毒核蛋白基因亚克隆到原核表达质粒pET-28(a)中,构建重组表达质粒pET-28(a)-M-NP,并将重组质粒用热休克方法转化BL21(DE3)感受态细菌,用IPTG诱导蛋白表达后,以SDS-PAGE分析表达形式及表达量,并利用His-Band Ni+柱纯化。结果成功构建重组表达质粒pET-28(a)-M-NP,以1.0mmol/L终浓度的IPTG在37℃诱导表达5h后,破菌沉淀中有目的蛋白表达。结论成功表达并纯化了马尔堡病毒的核蛋白,为后续研究奠定了基础。  相似文献   

长期氮磷化肥配施对不同种植体系土壤水分的影响     

危锋  郝明德 《水土保持研究》2011,18(6):67-70

利用长期定位实验,在黄土高原旱地研究了22a氮磷化肥配施下不同种植体系土壤水分的变化状况,为合理利用水肥资源提供参考。在小麦连作、豌豆-小麦（2a）＋糜子轮作、红豆草-小麦（2a）轮作、豌豆-小麦（2a）＋玉米轮作、玉米-小麦（2a）＋糜子轮作、小麦（2a）＋糜子-玉米轮作6个不同种植体系中,测定土壤剖面（0-300cm）含水量、储水量。结果表明：不同种植体系土壤含水量在土壤剖面上的分布不同,所有处理在土壤剖面140-300cm土层含水量均低于0-140cm土层含水量。不同种植体系在土壤剖面不同土层的储水量不同,在0-300cm土壤储水量各处理表现为豌豆-小麦（2a）＋玉米轮作（644.8mm）〉小麦（2a）＋糜子-玉米轮作（599.6mm）〉豌豆-小麦（2a）＋糜子轮作（582.3mm）〉红豆草-小麦（2a）轮作（574.0mm）〉玉米-小麦（2a）＋糜子轮作（550.8mm）〉小麦连作（536.9mm）。轮作体系0-300cm土壤储水量均高于小麦连作。粮豆轮作土壤储水量高于小麦连作,是黄土高原地区较好的种植方式。  相似文献