Dot-ELISA在猪瘟病因探讨上的应用研究     

陈永锋 《福建畜牧兽医》2002,24(1):9-10

本文应用Dot-ELISA诊断试试盒对甘常规猪瘟免疫后又发猪瘟病的猪场6进行猪瘟抗体监测。结果：1、发病期间首次猪瘟抗体检测；15头母猪抗体水平均在1:80以上；仔猪10、20、30、40日龄达1:80抗体水平的个体比例分别为93.33%、86.7%、73.33%、40%；50日龄以后各组均为0%。2、猪群发生猪瘟后全场不同日龄的猪进行紧急免疫，免疫10天后控制了猪瘟病的发展，15天后再检测抗体水平，其结果是：50日龄组、60日龄组、70日龄组、75日龄组抗体水平在1:80以上的个体比例分别达80%、66.67%、53.33%、60%。结论：影响猪瘟免疫应答因素很多，猪场应定期作抗体监测。Dot-ELISA是一种简便有效的监测方法。  相似文献   

间接法Dot—ELISA检测鸡减蛋综合症抗体的建立及应用研究     

林洪强  刘尚高 《黑龙江畜牧兽医》1997,(10):3-5

应用ＳｅｐｈａｄｃｘＧ－２００层析法纯化鸡减蛋综合症病毒，利用ＮＣ膜作为载体，成功建立了检测ＥＤＳ－７６血请抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，被检血清浓度为１：２０，酶标兔抗鸡１ｇＧ浓度为１：２００．底物溶液最适ｐＨ值为７．２。对Ａ－Ｆ６个养禽场随机抽检血清１６０份，分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ、ＨＩ和ＡＧＰ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出阳性率为５１．９％，ＨＩ检出阳性率为４６．９％，ＡＧＰ检出阳性率为３１．９％。对１４０日龄鸡人工感染试验，测定抗体消长规律。本方法不需特殊仪器。适用于基层兽医部门和养鸡场对ＥＤＳ－７６的血清学诊断和流行病学调查。  相似文献   

柑桔抹芽放梢和修剪效应研究     

刘远鹏  曾伟光 《四川农业大学学报》1986,(1)

1983—1984年研究了红玉血橙(Citrus sinensis Osbeck)、兴津和尾张温州(C.unshiu Tanaka)在雅安生态条件下抹芽放梢和修剪效应的研究。研究结果表明,三个供试品种抹除夏梢,放春、秋两次梢,对于减少初投产树的落果,提高早期产量有显著作用。八月上旬为放梢适期,八月梢为最佳梢类。秋梢结果母枝可以进行人工摘心,九、十月摘心对第二年结果影响不大。秋梢母枝二、三月摘心或较重程度短截,能减少花量,促发春梢营养枝。为柑桔密植、早结丰产提供依据。  相似文献   

禽流感病毒NP基因的真核表达及抗体检测芯片的建立     

赵玉辉  王馥梅  包红梅  孙晓东  路冰  熊永忠  陈化兰  王秀荣 《中国预防兽医学报》2011,33(5)

为建立一种检测A型禽流感病毒(AIV)抗体的蛋白芯片,本研究以AIV总RNA为模板,RT-PCR方法扩增NP基因,与真核表达载体pFastBacHTa连接,并在昆虫细胞中表达.重组蛋白经纯化及western blot鉴定,点样于醛基包被的载玻片上,制备检测AIV抗体的蛋白芯片.确定芯片反应最佳条件为:点样浓度2 mg/mL,固定24 h,1%BSA进行封闭,一抗稀释度1:100,二抗稀释度1:2000.利用蛋白芯片分别对15个亚型流感病毒免疫血清、SPF鸡血清、抗新城疫病毒血清、抗法氏囊病毒血清和现地血清样品进行检测,通过与血凝抑制试验比较,表明建立的蛋白芯片方法具有良好的灵敏性和特异性,为AIV抗体检测及制备检测AIV不同亚型或多种病原抗体的蛋白芯片提供方法.  相似文献   

猪流感病毒H1N1亚型济南株HA、NA、NP基因的克隆与序列分析     

朱晓林  凌宗帅  祝素珍  谢之景  赵宏坤  姜世金  张兴晓 《中国兽医学报》2011,31(1)

根据GenBank中流感病毒H1N1亚型HA、NA、NP基因序列,分别设计扩增HA、NA、NP基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增猪流感病毒(SIV)H1N1济南株(SW/SD/JT/07)HA、NA、NP基因,分别将RT-PCR产物克隆入pMD18-T载体,进行测序分析。结果显示,SW/SD/JT/07(H1N1)HA基因长为1 701bp,编码566个氨基酸;HA蛋白切割位点为IPSIQSR↓G,属于非高致病性毒株;HA蛋白有8个糖基化位点,其中有6个在HA1蛋白上,有2个在HA2蛋白上,与个别参考毒株糖基化位点个数不同;HA蛋白上的受体结合位点与多数参考毒株一致。SW/SD/JT/07(H1N1)NA基因长为1 410bp,编码469个氨基酸;NA基因颈部未发现氨基酸缺失现象;NA蛋白的头部有5个可能的抗原位点Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ分别由5个区段组成,在340、346、366位分别为P、I、N,其余参考毒株在相应位置的氨基酸分别为S、V、S;NA蛋白共有8个糖基化位点,与个别参考毒株的糖基化个数不同。SW/SD/JT/07(H1N1)NP基因长为1 565bp,编码498个氨基酸,根据HA、NA、NP基...  相似文献   

普通小麦与某些杂草黑麦和野生黑麦的可杂交性研究     

蒋华仁  戴大庆  肖世和 《四川农业大学学报》1986,(2)

1982～1984年间,用与栽培黑麦杂交难易程度不同的五个普通小麦品种(系)和三个品种间杂种F_1作母本,以栽培黑麦作父本对照,研究了普通小麦与Secale ancestrale、S.dighoricum、S.segetale,S.anatolicum、S.dal-maticum、S.fragile、S.kuprijanovii和S.montanum的可杂交性。结果表明普通小麦与上述各黑整种的可杂交性同普通小麦与栽培黑麦的情况基本相似。对与栽培黑麦易于杂交和极难杂交的小麦品种,上述各黑麦种的反应是一致的;但对中间类型的品种和亲本一方为易杂交品种的品种间杂种F_1,S.ancestrale和S.fragile的杂交率则显著高于栽培黑麦和大多数其他黑麦种。  相似文献   

四川麻鸭与几个肉用品种杂交效果的分析     

蒋小松  邱祥聘  曾凡同 《四川农业大学学报》1986,(1)

用四川麻鸭母鸭与建昌鸭、北京鸭和狄高鸭公鸭杂交,纯种设平行的对照。在放牧为主、人工给饲为辅的条件下每隔10日龄测定鸭群至70日龄的体重,并于60和70日龄分别屠宰一半,进行屠体分析。建川、京川和狄川鸭60日龄体重分别为1458.0、1500.0和1436.0克,70日龄分别为1638.5、1792.5和1648.0克,均显著高于四川麻鸭(p<.05)建川和京川还具超双亲表现。自出壳至70日龄体重的杂种优势一般较高而显著。60日龄建川、京川和狄川鸭屠体重(分别为884.0、887.0和882.5克),胸肌重(分别为59.2、49.7和50.5克)和腿肌重(分别为142.4、140.2和136.6克)均超过各自的双亲,屠宰性状的杂种优势,建川和狄川70日龄比60日龄明显下降,而京川则有上升之势。建川鸭胸腿肌赖氨酸和蛋氨酸含量居参试品种和杂种之首,屠体脂肪含量以狄高鸭最高。试验还观察到三个优良肉用品种在放牧为主的条件下不能发挥其快速生长潜力。据此,在四川稻田养鸭条件下推广这三个杂种,可获较大的经济效益。  相似文献   

猪血小板谷胱甘肽过氧化物酶活性在饲粮内不同加硒水平下的变化     

雷新根  端木道  杨凤  胡祖禹  陈可容  张慎容  夏珍 《四川农业大学学报》1985,(2)

本试验选用杂交仔猪40头,分为四组,在基础饲粮内分别加硒0、0.05、0.30、0.60ppm(Na_2SeO_3),研究猪在这四个加硒水平下血小板谷胱肽过氧化物酶(GSHPx)活性的变化。结果表明:饲粮缺硒时,猪血小板GSHPx活性极显著地降低(P<0.01),若加硒0.05ppm,则可在第二周极显著地增高(P<0.01),并在此时、此加硒水平(0.05ppm)趋于稳定);猪血小板GSHPx活性与血浆GSHPx活性、血浆硒含量呈强正相关。作者认为;猪血小板GSHPx活性可以作为机体硒状况的一个标识。试验还还测定了富含血小板血浆的硒含量等指标,初步探讨了血小板GSHPx活性与它们的相关性。  相似文献   

伪狂犬病病毒gE基因主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立     

吉艺宽  王雨  程艺  张宝石  向柯宇  琚春梅 《华南农业大学学报》2015,36(4):11-15

【目的】为了区分伪狂犬病病毒疫苗免疫猪和自然感染猪,建立快速诊断的方法.【方法】利用PCR方法从伪狂犬病病毒中扩增出糖蛋白E(g E)基因的主要抗原表位区,用Bam HⅠ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体p ET-32a(+)中,构建重组表达质粒p ET-g E184,并转化至大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,用纯化后的g E184蛋白作为包被抗原,建立间接g E184-ELISA检测方法.【结果和结论】用该方法检测290份临床猪血清样本,并与商品化ELISA试剂盒检测结果比较,两者的符合率为93.1%.  相似文献   

基于复合EST-SSR 标记的大白菜种子纯度
鉴定及SNP 位点获取     

赵　新　王　永兰青阔  贺长征陈　锐　李欧静　刘　娜朱　珠　郭永泽 《中国蔬菜》2013,1(14):31

以10 份大白菜杂交种及其亲本为研究对象,基于NCBI 基因组数据库中EST 序列信息,应
用SSR 标记及高分辨 率溶解曲线技术筛选出用于大白菜杂交种纯度鉴 定的SNP 位点及复合 SSR 位 点,并
根据 高通量分子检测技术 种子纯度鉴定的需要 ,对单粒种子育苗条件、单株植株提取 状态、快速DNA
提取方法、复合PCR 体系的建立等关键 技术进行了摸索及优化。结果显示：经过48 h 破壳状态的单粒
种子,采用改良CTAB 法可于3 h 内得到较高质量的DNA;同时经7 d 达到苗期状态的单株叶片,采用
chexe-100 法亦可于40 min 内完成DNA 提取;筛选得到的SNP 位点可对6 份大白菜杂交种进行纯度鉴定,
复合SSR 位点可对10 份大白菜杂交种进行纯度鉴定。  相似文献