人胰岛素原基因转染绵羊成纤维细胞及细胞株的建立     

王红梅  刘明军  黄俊成  郭志勤  张富春 《中国畜牧杂志》2004,40(1):8-10

从动物耳皮肤组织采样 ,采用将组织块剪碎后直接贴附于培养瓶底部的方法进行原代培养 ,该方法使原代细胞出现率及可传代率均达到 10 0 %。根据上皮样细胞和成纤维样细胞贴壁紧实程度的不同 ,用 0 .0 5 %的胰蛋白酶-EDTA对其进行消化 ,可将两种不同类型的细胞进行分离和纯化。通过脂质体介导 ,以BLG -hINS(含乳球蛋白调控基因的人胰岛素原基因 )基因作为目的基因、GFP(绿色荧光蛋白 )基因作为标记基因共转染绵羊成纤维细胞 ,经G - 4 18筛选后 ,得到转染细胞。对转染的细胞分别用单细胞显微操作法和有限稀释法进行细胞克隆 ,两种方法均可得到克隆细胞。选形态正常、生长均匀的 5个细胞克隆进行PCR检测 ,结果 5个克隆均转有GFP基因 ,其中两个转有BLG -hINS基因。高代培养细胞、转染细胞和克隆细胞经核型分析后 ,染色体数目均为 2 7对 ,表明绵羊耳的成纤维细胞建立细胞株后 ,可以作为外源基因转染的有效供体细胞。  相似文献   

猫细小病毒NS部分基因的克隆及序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

张洪英  刘立奎  姜建宏  崔尚金 《中国预防兽医学报》2004,26(6):412-415

将疫苗用猫细小病毒(FPV)株提取基因组DNA,针对NS特定片段设计引物,利用PCR扩增出了部分基因并将该基因克隆到pMD18-T Vector中测序.结果表明,该基因长613bp,编码204个氨基酸.分离株基因与犬的细小病毒(CPV)、貂的细小病毒(MEV)毒株核苷酸同源性均为99%.氨基酸同源性达到97%、98%以上,与犬、貂的肠炎病毒有密切的亲缘关系.  相似文献   

三种优良禾本科牧草与本地品种生长性状对比分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

常有奎  魏永林 《青海草业》2004,13(3):11-13

分析了三种引进优良禾本科牧草与一种当地禾本科牧草的生长性状，结果表明：三种引进禾本科牧草的鲜重均比当地禾本科优良牧草垂穗披碱草高，种植第三年引进牧草品种的鲜草产量为无芒雀麦19316kg／hm^2，达乌里披碱草16457kg／hm^2，猫尾草15754kg／hm^2。引进的三种牧草品种表现出较好的抗逆性，推广价值较高，适宜在高寒地区种植。  相似文献   

禽副粘病毒-2型标准毒株与不同分离株HN基因的序列测定及分析     

杨爱梅  赵继勋  赵西星  张国中  卜春亚 《畜牧兽医学报》2004,35(4):424-427

提取实验室保存禽副粘病毒-2标准毒株Yucaipa株和3株分离毒株F4、F6、F8株的RNA，经RT—PCR，获得4株毒株的HN基因，同时测得F基因与HN基因之间的序列。序列分析结果表明，HN基因的ORF全长为1743 nt，编码一个由580个氨基酸组成的蛋白。运用DNAMAN软件分析，4株毒株与GenBank上已发表毒株的HN基因的核苷酸和氨基酸之间的同源性相比，同源率分别为99．89％和99．69％。分析F基因与HN基因间序列发现两基因间序列与副粘病毒科其他病毒的基因间序列相似，含有基因起始信号和终止信号，但不含3个碱基的连接序列。通过序列分析，在分子水平上进一步证实分离于同一批进口七彩文鸟的F4、F6株是抗原性存在差异的两个毒株。毒株间的血清学关系与分子水平的核苷酸序列、氨基酸序列的比较关系一致。  相似文献   

Characterization and PCR-based Typing of Xanthomonas campestris pv. vesicatoria from Peppers and Tomatoes in Serbia     

Aleksa Obradovic  Athanassios Mavridis  Klaus Rudolph  Jaap D. Janse  Momcilo Arsenijevic  Jeffrey B. Jones  Gerald V. Minsavage  Jaw-Fen Wang 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》2004,110(3):285-292

During the last two decades bacterial strains associated with necrotic leaf spots of pepper and tomato fruit spots were collected in Serbia. Twenty-eight strains isolated from pepper and six from tomato were characterized. A study of their physiological and pathological characteristics, and fatty acid composition analysis revealed that all of the strains belong to Xanthomonas campestris pv. vesicatoria. Being non-amylolytic and non-pectolytic, pathogenic on pepper but not on tomato, containing lower amounts of fatty acid 15 : 0 ante–iso, the pepper strains were designated as members of the A group of X. campestris pv. vesicatoria. However, the tomato strains hydrolyzed starch and pectate, caused compatible reactions on tomato but not on pepper, had higher percent of 15 : 0 ante–iso fatty acid, and were classified into B phenotypic group and identified as X. vesicatoria. PCR primers were developed which amplified conserved DNA regions related to the hrp genes of different strains of X. campestris pv. vesicatoria associated with pepper and tomato. Restriction analysis of the PCR product resulted in different patterns and enabled grouping of the strains into four groups. When xanthomonads isolated from pepper and tomato in Serbia were analyzed, they clustered into two groups corresponding to the grouping based on their physiological and pathological characteristics. According to the reaction of pepper and tomato differential varieties, the strains from pepper belong to races P7 and P8 and tomato strains belong to the race T2. All strains were sensitive to copper and streptomycin. Advantages and disadvantages of various bacterial spot management practices are discussed.  相似文献   

优质肉鸡繁育体系的效益评估   总被引：1，自引：0，他引：1  

唐辉  吴常信  李同树 《畜牧兽医学报》2005,36(9):951-955

近十多年来，我国优质肉鸡的生产方兴未艾，许多育种公司和科研院所不断推出新品系。为充分发挥新品系的遗传潜力，探求优质肉鸡最佳的繁育生产模式具有重要意义。由于不同的品系及其杂种后代在不同的性状上各有优缺点，很难用生产性能进行直接比较，而适合用育种规划的方法通过经济学指标进行评价。系统分析通过把生产系统抽象概念化并用数学手段模型化的方法，  相似文献   

以催乳素受体基因作为撒坝猪部分生产性能候选基因的研究   总被引：8，自引：0，他引：8  

李国治  连林生  鲁绍雄  严达伟 《养猪》2005,(4):36-38

此文运用PCR-RFLP技术检测催乳素受体(PRLR)基因在撒坝猪群体中的多态性分布,并采用最小二乘分析模型初步统计分析基因多态性与部分生产性能的相关性。结果表明,PRLR基因等位基因B及其基因型BB在群体中占优势,频率分别为0.6594和0.4438;PRLR基因在群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态;头胎繁殖性状有利等位基因B对生长性状无不利影响。  相似文献   

野生冰草种质资源同工酶遗传多样性分析与评价     

李景欣  云锦凤  鲁洪艳  李国瑞 《中国草地学报》2005,27(6):34-38

分析了分布在内蒙古地区的16份野生冰草种质资源酯酶和过氧化物酶的基因位点,结果表明:2种酶共检测到4个等位基因位点,21条酶带,均为多态位点,两种等位酶4个基因位点平均杂合度为77.22%,显示了较高的多态性;依据同工酶谱带信息,把供试种群聚类并划分成3个类群,类群之间存在明显的遗传差异,但是基于同工酶分析进行的分类来确定材料的地理区域有一定的局限性。  相似文献   

土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白基因的克隆及其序列分析     

魏佳何国声  徐梅倩姚宝安 《中国兽医寄生虫病》2005,13(4):1-8

目的利用RT-PCR和RACE技术克隆土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白基因全长序列并进行序列分析.方法根据日本血吸虫和曼氏血吸虫肌动蛋白基因的保守区设计引物,利用RT-PCR扩增出土耳其斯坦东毕吸虫的肌动蛋白基因的大片段,再结合RACE技术分别得到肌动蛋白的3＇端和5＇端,将三部分序列拼接后获得肌动蛋白基因的全长cDNA序列并进行序列分析.结果成功克隆了土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白的全长cDNA并提交GenBank,登录号为DQ017265,核酸序列比对表明东毕吸虫肌动蛋白基因的核苷酸序列和日本血吸虫、曼氏血吸虫的同源性分别为90%和91%.结论土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白的全长cDNA的克隆为进一步表达及其生物学性能的分析提供了理论基础.  相似文献   

绵羊肺腺瘤病毒NM株前病毒gag基因的克隆与序列分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

刘淑英  马学恩  李景鹏 《畜牧兽医学报》2005,36(1):54-57

参照GenBank中已发表的绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的全基因序列，设计合成3对引物，对JSRVNM株的gag基因分3段进行PCR扩增，经琼脂糖凝胶电泳分析，分别呈3条531、888和949 bp的特异条带，将其分别克隆人pMD-18T载体中，进行序列测定并拼接序列，得到完整的gag基因序列。分析结果表明，与南非代表株(基因序列号NC-001494)的gag基因序列比较，核苷酸同源性为89．0%，推导出的氨基酸同源性为90％。与美国代表株(基因序列号AF105220)的gag基因序列比较，核苷酸同源性为86．3％，氨基酸同源性为87％。  相似文献