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为了筛选胃排空和肠推进试验最佳示踪染料,本试验选取葡聚糖蓝2000、伊文思蓝和墨汁3种染料,用微量倍比稀释法测定一系列浓度各染料在一系列波长的吸光度值,以确定各染料的最大吸收波长和可测浓度范围。根据各染料可测范围确定小鼠最佳灌胃剂量,测定各染料在胃残留率、小肠推进率及小肠均4段各段染料残留率,确定各染料在消化道总残留率。结果显示,在本试验测定波长中,葡聚糖蓝2000、伊文思蓝和墨汁最大吸收波长分别630、630和405 nm;可测浓度范围分别为0.16~5.00 mg/mL（R2 =0.9863）、0.78~6.25 μg/mL（R2=0.9984）和0.02%~0.16%（R2=0.9979）。3种染料对胃排空率的影响差异不显著（P > 0.05）,而肠推进率伊文思蓝显著快于其他两种染料（P < 0.05）;3种染料总残留率葡聚糖蓝2000最高,其次为墨汁,伊文思蓝最低,分别为93.6%±4.5%、71.5%±8.5%和18.7%±2.8%。本试验结果提示,在检测受试物对在体消化道运动影响研究中,如果仅要求测定肠推进率可用墨汁,如果要精确检测胃和小肠各段排空情况则用葡聚糖蓝2000为宜。 相似文献
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【目的】比较新疆焉耆地区某猪场不同生长期猪只鼻腔和直肠携带葡萄球菌的耐药情况。【方法】通过微量肉汤法,对不同部位分离的葡萄球菌进行11 种抗菌药物的药敏试验。【结果】分离出332株直肠菌(83.0%,332/400)和137株鼻腔菌(68.5%,137/200)。2月龄仔猪直肠菌对四环素、苯唑西林、氧氟沙星、利福平、青霉素5种药物的耐药率高于鼻腔菌;鼻腔菌对氟苯尼考的耐药率极显著高于直肠菌(P﹤0.01)。妊娠猪直肠菌对克林霉素、利福平、阿莫西林/克拉维酸3种药物的耐药率极显著高于鼻腔菌(P﹤0.01);鼻腔菌对四环素、苯唑西林、头孢噻呋3种药物的耐药率极显著高于直肠菌(P﹤0.01),对青霉素的耐药率显著高于直肠菌(P﹤0.05)。仔猪直肠菌对庆大霉素、克林霉素、苯唑西林、头孢噻呋4种药物的耐药率显著高于妊娠猪直肠菌(P﹤0.05),妊娠猪直肠菌仅对利福平、阿莫西林/克拉维酸2种药物的耐药性略高于仔猪直肠菌;仔猪鼻腔菌对四环素、克林霉素、氟苯尼考3种药物的耐药率极显著高于妊娠猪鼻腔菌(P﹤0.01);妊娠猪源菌对头孢噻呋的耐药率极显著高于幼畜源菌(P﹤0.01),所有分离株均对阿米卡星敏感。【结论】该猪场分离的葡萄球菌耐药情况较为严重,而直肠菌的耐药情况更加严重。猪场临床用药以药敏试验结果为依据选择敏感药物及时治疗,提高仔猪成活率和育成率。 相似文献
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为制备猪圆环病毒4型(PCV4)Cap蛋白单克隆抗体,以原核表达的重组Cap蛋白免疫6～8周龄小鼠,三次免疫后取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。利用亚克隆技术和间接免疫荧光(IFA)方法筛选到2株阳性单克隆杂交瘤细胞株,分别命名为5H9和2F3。间接免疫荧光和Western blot试验表明,2株单抗均能特异性识别293T细胞中特异表达的Cap蛋白,且5H9和2F3的IFA效价分别为1∶12 800和1∶6 400。亚类鉴定结果表明,两株单抗重链均属于IgG1,轻链类型为kappa型。本研究制备的抗PCV4 Cap特异性单抗,为PCV4检测方法的建立和流行病学调查提供了有效的生物材料,也为该病毒的分离鉴定与Cap蛋白功能的探究奠定了基础。 相似文献
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为了解新疆乌鲁木齐市宠物源葡萄球菌对临床常用抗菌药物的耐药情况及携带耐药基因的情况,采用琼脂稀释法对乌鲁木齐市某宠物医院分离鉴定的154株宠物源葡萄球菌进行临床常用10种抗菌药物耐药性检测,并用PCR方法检测葡萄球菌9种耐药基因:喹诺酮类(norA)、大环内酯-林可胺类(ermB)、四环素类(tetA、tetM)、β-内酰胺类(mecA、femA)和氟苯尼考类(cfr、fexA和fexB)。耐药性检查结果表明葡萄球菌对苯唑西林、四环素、左氧氟沙星和氟苯尼考的耐药率在50%以上,宠物源葡萄球菌多重耐药集中在4~5类,且耐药谱型多样化。基因检测结果显示fexA(31.2%)基因的检出率最高,其次是ermB(26.7%),未检出cfr、fexB和tetA基因。新疆乌鲁木齐市宠物源葡萄球菌普遍存在耐药和多重耐药情况,其中氟苯尼考耐药基因fexA检出率最高,揭示宠物源葡萄球菌耐药情况严重,应根据药敏试验及基因检测结果,合理选用抗菌药物,并加强对耐药菌的监测。 相似文献
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研究旨在研制抗鸡EphrinA2蛋白的特异性单克隆抗体。试验用PCR和同源重组技术构建了鸡EphrinA2真核及原核表达载体,以纯化的EphrinA2原核表达产物免疫小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接ELISA方法筛选出阳性细胞克隆;用SDS-PAGE、间接免疫荧光试验和Western blot验证表达产物及单抗的特性。结果显示：原核表达的重组蛋白His-EphrinA2-RBD主要位于细菌包涵体中;获得2株能稳定分泌抗EphrinA2蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为4H6和1G9;单克隆抗体4H6不仅能特异性识别真核表达载体pcDNA3.1-EphrinA2在DF-1细胞中表达的EphrinA2蛋白,而且能有效识别LMH和DF-1细胞中内源性的EphrinA2蛋白。结果表明,单克隆抗体4H6与鸡EphrinA2蛋白反应性和特异性均良好,能够应用于鸡EphrinA2相关基础研究。 相似文献
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从新疆部分地区采集动物源粪样及鼻腔样共计1 781份,从中分离葡萄球菌1 667株,进行临床常用11种抗菌药物的药敏试验,采用PCR方法进行酰胺醇类耐药基因(cfr、fexA和fexB)及与cfr转移相关的移动元件IS21-558和转座酶基因Tn558的检测。结果显示:新疆动物源葡萄球菌对临床常用抗菌药物耐药严重程度为羊源宠物源猪源禽源牛源,对被检抗菌药物中的青霉素耐药最严重,耐药率为54.7%～93.6%。除牛源菌外(36.3%),其余动物源分离的葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为51.1%～98.2%。动物源葡萄球菌对阿米卡星、庆大霉素和克林霉素均有较好的敏感性。多药耐药结果显示,羊源菌以4～5耐为主,禽源菌和宠物源菌以3～5耐为主,猪源菌以4耐和7耐为主,牛源菌以1耐为主,不同动物源分离的葡萄球菌耐药谱型多样化。酰胺醇类耐药基因检测结果显示,仅在猪源菌中检出4株菌携带cfr基因。除牛源菌外,在其余动物源中均检出fexA基因,检出率为宠物源猪源禽源羊源,未检出fexB基因。16SrRNA序列扩增结果显示4株携带cfr基因的阳性菌都为模仿葡萄球菌。此外,在4株阳性菌中都检出移动元件IS21-558(包括:istAS和istBS)和Tn558转座酶基因(tnpA、tnpB、tnpC)。新疆动物源葡萄球菌耐药情况严重,耐药谱型多样化,酰胺醇类耐药基因以携带fexA基因为主。此外,多重耐药基因cfr及其移动元件的检出,提示应加强耐药性的监测,防止耐药菌的暴发和超级耐药菌出现的概率。 相似文献