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为了解水稻褐飞虱中肠内共生菌的种类,用高氏1 号和马铃薯葡萄糖琼脂两种培养基对褐飞虱肠道进
行分离培养,对分离纯化后的菌株用菌类16S rDNA 的通用引物进行PCR 扩增鉴定,测序结果经BLAST 比对分析,
发现其与粉虱科的杀雄菌属内共生菌（Arsenophonus sp.）相似度达99%,说明所分离得到的为杀雄菌属的菌株。将所
得这条序列与7 条来自粉虱科不同种及来自褐飞虱的杀雄菌属内共生菌的16S rDNA 序列用邻接法构建进化关系
树,发现其与来自褐飞虱杀雄菌属内共生菌的16S rDNA（GU124505）距离较近,初步推断为同一种。 相似文献
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检测鸭疫里默氏杆菌（Riemerellaanatipestifer,RA）10个基因在不同菌株间的分布并进行序列分析,研究其在不同菌株中的保守性。分别选取8株RA的10个基因进行PCR扩增,扩增产物克隆于pMD18-T载体,进行序列测定和分析。结果显示：测定的8株RA菌株中均能检测到Lipid A、LuxE和TCTR编码基因,表明这些基因在不同血清型RA菌株中的保守性良好;TR基因仅从6株具有致病性的RA菌株中扩增得到,而2株非致病性RA菌株NJ1和NJ4未能扩增到,表明TR基因可能与RA菌株的致病性相关;IS1仅从6株血清1型和2型的RA菌株扩增得到,2株血清10型菌株均未扩增得到,提示IS1为血清10型菌株缺失基因。 相似文献
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[目的]了解鸭疫里默氏杆菌AS87-01740基因分子生物学特性,确定其编码蛋白抗原性,为鸭疫里默氏杆菌亚单位疫苗研发提供新的靶标抗原选择.[方法]采用PCR克隆鸭疫里默氏杆菌AS87-01740基因,以DNASTAR和NCBI数据库分别进行基因生物信息学分析;利用pCold-TF原核表达载体在大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达,并分别以SDS-PAGE和Western blotting检测融合蛋白的表达形式及其抗原特异性.[结果]从鸭疫里默氏杆菌基因组扩增获得的AS87-01740基因编码框全长618 bp,编码205个氨基酸,理论分子量约21.87 kD,理论等电点(pI)8.2,正电荷氨基酸总数17个,负电荷氨基酸总数16个.AS87-01740蛋白序列在同种属分离株中,与2型血清型分离株(11845、YM、GD和CH-2)有很高的相似性(>99%),与1型血清型分离株(CH-1和CH-3)的相似性为92%;在不同种属中,与金黄杆菌(Chryseobacterium sp.)、动物溃疡伯格菌(Bergeyella zoohelcum)和脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabeth-kingia meningosepticum)的相似性分别为61%、60%和57%.经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得的融合蛋白分子量约77 kD,以可溶性表达形式为主.Western blotting检测结果表明,融合蛋白能与鸭疫里默氏杆菌阳性血清发生特异性免疫反应.[结论]AS87-01740基因编码蛋白在不同鸭疫里默氏杆菌分离株中具有很高的保守性,且能与其阳性血清发生特异性免疫反应,是研发鸭疫里默氏杆菌疫苗的潜在抗原. 相似文献
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为研究水稻抗重金属的特性,构建了水稻金属硫蛋白(metallothionein,MT)原核表达载体PGEX4T-3-Os MT-1-4c,并转化到Rossetta菌株中诱导表达,得到大小为33.643 k Da的GST-Os MT-1-4c重组蛋白。将得到的沉淀用1×PBS溶解并在低温下超声破碎,离心并电泳检测,然后纯化得到融合蛋白。并在重金属Cd~(2+)胁迫下诱导表达重组载体和空载体菌株,发现能表达GST-Os MT-1-4c蛋白菌株比表达GST蛋白菌株抗重金属的能力强。 相似文献
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山西省玉米小麦需水量的变化特征及对气候变暖的响应 总被引：2，自引：2，他引：0
作物需水量是农田水分循环系统中最重要的因素之一。为了研究山西省主要作物需水量的变化特征及对气候变化的响应,基于山西省39个地面气象站1961—2010年的气象资料,运用彭曼公式计算了近50年山西省玉米和小麦的需水量。结果表明：（1）近50年来玉米需水量和小麦需水量都存在以1982年为分界点的2个明显的变化过程,玉米需水量表现为先有微弱的上升趋势（1961—1982年; 4.8 mm/10 a）而后呈现微弱的下降趋势（1983—2010年;-1.0 mm/10 a）,而小麦需水量在2个阶段均表现为显著的上升趋势（20.7 mm/10 a和17.1 mm/10 a）,但上升过程并不连续;后一阶段2种作物需水量平均值都有所降低,玉米需水量降幅大于小麦;（2）气候变暖对山西省不同地区作物需水量的影响存在差异：对高寒地区影响大于温暖地区;对干旱地区影响最大,半湿润地区次之,半干旱地区最小;（3）作物需水量的变化同作物产量显著相关,分析显示近30年玉米需水量和玉米单产呈显著负相关关系。因此,需水量的变化在一定程度上能有效地反映或预测作物产量的变化。 相似文献
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柑橘产业是西充县农业主导产业之一,在本地农业经济中发挥了重要作用。西充县是柑橘适宜种植区,但经常性冻害对中晚熟柑橘生产造成很大威胁,是柑橘生产的第一大自然灾害,研究如何避灾、防灾意义重大。基于此,笔者分析了西充县柑橘冻害发生的原因,阐述了柑橘园冻害的防控技术措施及受冻后的管理。结果表明,掌握西充县柑橘冻害发生的原因,科学采取柑橘冻害的防控技术措施及受冻后的管理,对川、渝等地区柑橘园防冻管理具有一定的指导价值。 相似文献
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[目的]确定OsWRKY78蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY78全序列设计引物,进行OsWRKY78的RT-PCR扩增,克隆了OsWRKY78基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒载体pBinGFP重组,并对重组载体进行菌液PCR和酶切验证,最后利用农杆菌介导的花蕾浸泡法将重组载体转化到拟南芥中,对其亚细胞定位进行研究。[结果]试验克隆得到了pBinGFP-OsWRKY78重组载体,经菌落PCR与酶切检测表明构建的表达载体正确,其转化到拟南芥中后得到了转基因植株,荧光显微镜检测结果表明,OsWRKY78基因表达产物主要定位在细胞核中。[结论]该研究结果为深入研究OsWRKY78基因的功能及其在相关信号传导中的作用奠定了基础,也为进一步研究OsWRKY78基因与褐飞虱之间的关系提供了理论依据。 相似文献