马流感病毒(A/equine/Qinghai/1/94)核蛋白基因的序列测定及同源性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨建德  薛飞  王晓钧  朱远茂  赵立平  吕晓玲  沈荣显  相文华  李景鹏 《中国预防兽医学报》2003,25(2):96-98

根据已发表的马流感病毒核蛋白基因序列，设计并合成一对特异性引物，经反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）成功扩增出了我国马流感病毒（A/equine/Qinghai/1/94核蛋白基因。将该片段连接到PGEM-T-EASY载体并转化DH5α，提取阳性菌落的质粒径EcRo1酶切的PCR鉴定其大小为1.5kb左右，对其测序并进行分析发现，与A/Equine/Kentucky/2/86,A/Equine/Miami/1/63等关系较近，同源率为93.3%--93.4%，而与我国马流感吉林A/Equine/Jilin/1/89株关系较远，同源率仅为84.6%。  相似文献   

母猪产后不食的防治策略探究     

赵立平 《甘肃畜牧兽医》2016,(14)

母猪产后不食是一种较为常见的疾病,同时危害性大,不容易治疗,轻微产后不食容易导致母猪泌乳能力下降,仔猪得不到充足的营养,而导致体质下降,生长缓慢,腹泻甚至死亡;重度产后不食还会导致母猪乏情、久配不育或者产仔减少。这些都会严重挫伤农户饲养的热情,影响养猪业的正常发展。文章基于此,对母猪产后不食的防治措施进行探究性分析。  相似文献   

马传染性贫血病毒LTR在驴胎皮肤细胞中的基因进化及启动子活性比较     

全滟平  沈楠  郭巍  赵立平  周建华  沈荣显  相文华 《中国预防兽医学报》2008,30(7)

将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代,分别提取第13代、18代、21代、23代、26代病毒培养物的前病毒DNA,以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR,并进行克隆及测序分析。与本实验室已测定的驴白细胞毒株LTR的序列比较发现,驴胎皮肤细胞毒株LTR的U3负调节区出现大段的插入、点突变、缺失,U3增强子区变异较小。将LTR片段插入到pCAT-basic载体CAT报告基因前,转染驴胎皮肤细胞,通过检测CAT表达量来评价LTR的启动子活性。驴胎皮肤细胞毒株LTR的启动子活性随着病毒传代次数的增加而逐渐增强,而驴白细胞弱毒株LTR的启动子活性很低。  相似文献   

山羊关节炎-脑炎病毒3＇LTR的克隆与序列分析     

张锡龙范德新  赵立平 《畜牧兽医科技信息》2005,(12):43-43

本实验通过对CAEV3’LTR克隆、测序及序列分析，对CAEV3’LTR的变异性与生物学功能有了一定的认识，为进一步揭示LTR与病毒的毒力及复制密切相关奠定了基础。  相似文献   

马动脉炎病毒GL、M和N蛋白主要抗原域的原核表达及抗原性鉴定     

王贵宾  郭巍  赵立平  李红梅  赵敏  相文华 《兽医大学学报》2012,(7):958-961

采用RT—PCR方法从EAVBucyrus株扩增了截短的GL、M和全长的N基因片段,将三者分别克隆到表达载体pGEX-6p-1中,测序验证后转化Rosetta（DE3）宿主菌中经IPTG诱导表达,诱导后菌体裂解物经SDS-PAGE分析。试验结果表明,重组菌表达出约35000、34000和38000的特异性条带,通过条件优化及切胶纯化获得较高浓度的目的蛋白。经Western-blot和间接ELISA分析,纯化的蛋白只与抗马动脉炎病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性和特异性。  相似文献   

中国华南、华中、东北和西北地区马动脉炎病毒（EAV）感染马血清流行病学调查     

李红梅  侯玉杰  时成龙  郭巍  胡兰  赵立平  相文华 《中国动物检疫》2012,29(11):54-56

马病毒性动脉炎(EVA)是一种由马动脉炎病毒(EAV)引起马属动物主要通过呼吸系统和生殖系统传播的传染病,是危害养马业及赛马业的重要疾病之一.本试验应用纯化EAV全病毒为抗原建立EAV-IgG间接ELISA方法与西班牙INGEZIM-ARTERITIS试剂盒分别检测华南、华中、东北和西北地区共计383份马血清样品.其结果为:华南地区赛马动脉炎阳性率为26%,华中地区赛马动脉炎阳性率为0,东北地区役用马动脉炎阳性率为8.26%,西北地区役用马动脉炎阳性率为7.55%.鉴于此,有必要加强EVA检测,掌握EVA在我国分布,以有效的预防和控制本病传播.  相似文献   

应用TaqMan荧光定量PCR检测H3N8亚型马流感病毒   总被引：2，自引：1，他引：1  

戴伶俐  郭巍  李雪峰  黄文强  赵立平  阿依吐拉·肉孜  相文华 《中国预防兽医学报》2009,31(8)

为建立马流感病毒(ETV)的检测方法,本试验针对H3N8亚型ETV血凝素(HA)基因高度保守序列设计并合成了2对引物和1条TaqMan荧光探针,建立了TaqMan荧光定量PCR方法.经用TaqMan荧光定量PCR、RT-PCR和病毒分离方法分别检测新疆等省135份疑似EIV马鼻拭子样品,其结果表明:3种方法的马流感检出率分别为54.07%、37.78%、0.89%;TaqMan荧光定量PCR可检出马流感病毒基因组RNA的灵敏度可达10拷贝/反应.而且与其他马呼吸道病毒均无交叉反应,具有良好的特异性、敏感性和重复性.该方法为H3N8亚型马流感的早期诊断及分子流行病学调查等提供了一种新的快速、准确的定量检测技术.  相似文献   

貉球虫和大肠杆菌混合感染的诊治     

韩先桂  王佩良  丁继业  赵立平 《中国兽医杂志》2007,43(8):78-79

1 发病经过 我县陆某饲养貉120只,发现部分貉精神沉郁、食欲减少、拉稀.病程1周左右有2只貉死亡,发病期间用环丙沙星、恩诺沙星等药物治疗,效果不理想.  相似文献   

牛传染性鼻气管炎间接ELISA诊断方法的建立   总被引：7，自引：0，他引：7  

朱远茂王海燕  薛飞辛九庆  赵立平童光志 郭巍李兆利  相文华 《中国兽医科技》2005,35(12):959-963

以牛肾细胞系（MDBK）培养牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）Bartha Nu/67株,经超速离心纯化病毒,再经超声破碎处理后作为诊断抗原,建立了检测牛血清IBRV抗体的间接酶联免疫吸附试验.该ELISA的判定标准为：血清D490 nm值大于0.369的判为阳性,小于0.295的判为阴性,在0.295与0.369之间的为可疑.特异性和重复性试验结果表明,该方法特异性高、重复性好.与法国进口ELISA抗体诊断试剂盒比较,其符合率为96.3%;与中和试验比较,符合率为95.8%,且敏感性更高.应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染情况,结果显示,这些地区的IBRV感染率为67.1%.  相似文献   

一种快速的酸奶质量跟踪监测检验新方法   总被引：1，自引：0，他引：1  

李武  王凌华  张晓君  庞小燕  赵立平  赵勇 《中国乳业》2005,(9):44-47

分析酸奶中的菌种组成是酸奶质量控制的重要指标。本文用PCR—DGGE（denaturing gradient gel electrophotesis，变性梯度凝胶电泳）指纹图谱技术对市售某品牌酸奶在1个月内进行了动态监测。共收集了6个生产批次的18个酸奶样品，通过建立16S rDNA V3区PCR—DGGE分析、DGGE图谱条带割胶回收测序等一套完整的检测评价方法．结合常规分离培养方法．对样品微生物组成及其稳定性进行跟踪监测。结果显示。所有供试样品在整个动态监测期内DGGE指纹图谱都出现2条带．显示。其微生物组成比较稳定．割胶回收测序结果表明其微生物组成与厂家标注完全一致．分别为Lactobacillus delbrueckii subsp．balgaricus（保加利亚乳杆菌）和Streptococcus thermophilus（嗜热链球菌）。分离计数结果表明前者比后者低3个数量级．二者的DGGE条带亮度也有显著差别。本研究用菌种组成及其稳定性两个指标对酸奶样品质量进行评价，建立了DGGE评价方法，结果表明。该技术可以作为酸奶质量控制和动态监测的快速简便的新方法。  相似文献